多肽硫酯蛋白合成新技术
伦敦大学Macmillan研究组对采用化学配体技术合成经修饰改变的肽和蛋白感兴趣。蛋白合成和半合成——由合成和重组来源制备的多肽片段——对生产治疗性蛋白和理解转录后主导修饰的机制很重要。理解该过程很困难,因为它们不是按模板工作,也不直接受遗传控制。Macmillan组研究采用有机合成化学、分子生物学、蛋白表达、蛋白工程来研究转录后的修饰改变。尤其是,Macmillan研究组发现了NCL关键试剂多肽硫酯的新过程:多肽硫酯能从末端为Xaa-Cys序列的天然多肽中制备得到(其序列中Xaa 为Gly、His或者 Cys )(图1, Ref 1A)。该反应产生的硫酯已经应用于合成具有生物活性的人β-defensin 3 (Ref 1B)类似物和人Hepcidin。最近已经证实它们同O- and N- 糖肽合成 (Ref 2)和磷酸化蛋白半合成相容。图1 通过N→S酰基转换形成硫酯。典型反应条件:10% v/v MESNa; 0......阅读全文
多肽硫酯蛋白合成新技术
伦敦大学Macmillan研究组对采用化学配体技术合成经修饰改变的肽和蛋白感兴趣。蛋白合成和半合成——由合成和重组来源制备的多肽片段——对生产治疗性蛋白和理解转录后主导修饰的机制很重要。理解该过程很困难,因为它们不是按模板工作,也不直接受遗传控制。Macmillan组研究采用有机合成化学、分子生物学
多肽合成蛋白测序仪介绍
433A多肽合成系统 —— 公认的经典高效全自动合成系统l 合成规模0.1-1.0 mmol,可采用Fmoc和tBoc两种方法l 特有的涡流混合式反应腔和NMP溶剂系统:活化氨基酸与肽充分反应,偶联率高达99%以上l ZL的零死体积阀门设计:去除交叉污
氯甲酸酯与硫氰酸盐反应合成法制备硫氰酸酯
目前,N—烃氧基羰基异硫氰酸酯的合成方法主要是以氯甲酸酯和硫氰酸盐为原料,采用以水为溶剂的相转移催化合成方法,相转移催化剂是其技术关键,如图2。 美国氰胺公司和拜尔公司分别拥有N—烃氧基羰基异硫氰酸酯及其衍生物制备方法的ZL,氰胺公司采用的催化剂为吡啶、喹啉等含有1个或2个氮原子的六元单环或十
二硫键成环多肽合成技术及策略
蛋白质和多肽类药物的研究和发展已经成为生物医药领域研究的一个热点。二硫键在维持多肽和蛋白质的空间立体结构及由此决定的生物活性中发挥着重要的作用。我们在多肽领域内长期深入的研究,让我们积累了大量的宝贵经验,我们已经成功给客户交付了大量的包括一对和两对以上二硫键成环的多肽,并保持了我们高成功率,高质量的
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,分
固相多肽合成的应用——多肽合成仪
多肽固相合成技术的发明同时促进了多肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的多肽合成仪出现在1980年代初期,它是利用氮气鼓泡来对反应物进行搅拌,用计算机程序控制来实现有限度的自动合成。虽然在各项功能方面有着明显的缺陷,但是它毕竟把人从实验室里解放出来,极大地提高了工作效率。随着多肽科学的发展,科学家
多肽合成仪
美国洛克菲勒大学教授Bruce Merrifield 在1963年发明的多肽固相合成技术(SPPS)是多肽合成领域的一个重大突破,对化学,生化,医药,免疫和基因科学等学科和领域都起了巨大的推动作用。 他本人也因此项发明荣获1984化学诺贝尔奖。
多肽合成步骤
1、树脂的选择及氨基酸的固定 用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。 2、氨基、羧基、侧链的保护及脱除 要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺
多肽合成仪
多肽合成仪,是以固相合成为原理合成多肽粗品的仪器。整体由主体、传输设备、动力装置以及软件系统组成。以固相合成为反应原理,在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序不断添加、反应、合成,操作最终得到多肽载体。
多肽合成历史
多肽合成概述: 1963年,R.B.Merrifield[1]创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上,然后在此树脂上依次缩合氨基酸,延长肽链、合成蛋白质的固相合成法,在固相法中,每步反应后只需简单地洗涤树脂,便可达到纯化目的.克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难,为自动化合成肽奠定了基
无需活细胞的蛋白合成新技术
来自美国能源部橡树岭国家实验室(Oak Ridge National Laboratory)的研究人员研发出了一种无需细胞培养,人工合成蛋白质的新系统,这一研究成果公布在12月22日的Small杂志上。 这个生物反应器采用的是一种混合液,其中包含有大肠杆菌细胞提取物,一种绿色荧光蛋白DNA编码
无需活细胞的蛋白合成新技术
来自美国能源部橡树岭国家实验室(Oak Ridge National Laboratory)的研究人员研发出了一种无需细胞培养,人工合成蛋白质的新系统,这一研究成果公布在12月22日的Small杂志上。 这个生物反应器采用的是一种混合液,其中包含有大肠杆菌细胞提取物,一种绿色荧光蛋白DNA编码
酰氯与硫氰酸盐反应合成法制备硫氰酸酯
此方法一般用于合成酰基异硫氰酸酯,反应方程式如图3。 魏太保等分别采用固一液相转移催化法和液一液相转移催化法合成了苯甲酰基异硫氰酸酯,并分别考察了各反应条件对收率的影响,在n(苯甲酰氯):n(硫氰酸胺)=0.010:0.015、反应时间为1 h时收率最高,为98%。其中采用固一液相转移催化法时
合成多肽与重组蛋白作为抗原的区别
重组蛋白质抗原上往往带有多个不同的抗原决定簇,其中有些是顺序决定簇,有些为结构决定簇。利用变性的抗原免疫动物获得多克隆抗体是针对各个抗原决定簇的抗体的混合物,在一般应用中能够用于检测天 然结构或变性的目标蛋白。 利用变性蛋白做为免疫原的一个附带的好处是变性蛋白往往有更强的免疫原性, 能够刺激动物产生
多肽合成的技术
固相合成 1963年,Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(SPPS),由于其合成方便,迅速,成为多肽合成的首选方法,而且带来了多肽 有机合成上的一次革命,并成为了一支独立的学科—— 固相有机合成,固相合成的发明同时促进了肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的 多肽合成仪出现在19
多肽合成的种类
多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称,常常被应用于功能分析、抗体研究、尤其是药物研发等领域。 因为多肽合成的步骤很繁琐,又很耗时,多
什么是多肽合成?
多肽合成是一个固相合成顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点,从而大大的
小型多肽合成仪
仪器 产品详细描述 简单 根据序列填料,显示开始和停止的位置。给每个偶联指定标准和客户自定义程序,然后按“运行”。整个仪器使用就是如此简单。 快速 每个偶联典型的循环时间在40分钟之内,三个反应瓶可以连续合成3个多肽 灵活 PS3可以使用不同的偶联技术:
多肽合成仪重点
科研单位考虑因素a) 设备本身对实验研究的帮助①对于多肽合成化学反应,使用设备可避免人手工操作对人体的伤害(试剂腐蚀)②由于程序化设定,可保证每步骤偶合反应的充分性以及实验整体的稳定性③可以合成难肽以及超长肽(制造商需要提供其使用研究型多肽合成仪合成多肽的检测报告)④在休息时间可以不间断合成工作研究
小型多肽合成仪
简单 根据序列填料,显示开始和停止的位置。给每个偶联指定标准和客户自定义程序,然后按“运行”。整个仪器使用就是如此简单。 快速 每个偶联典型的循环时间在40分钟之内,三个反应瓶可以连续合成3个多肽 灵活 PS3可以使用不同的偶联技术:FMOC-N-carboxyan
多肽的生物合成
同时,游离在细胞质中的转运RNA(tRNA)把它携带的特定氨基酸放在核糖体的mRNA的相应位置上,然后tRNA离开核糖体,再去搬运相应的氨基酸(amino acid),这样,在合成开始时,总是携带甲硫氨酸的tRNA先进入核糖体,接着带有第二个氨基酸的tRNA才进入,此时带甲硫氨酸的tRNA把甲硫氨酸
多肽合成主要途径
多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。 化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时,由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学
多肽合成的定义
多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的 生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过 肽键结合而成的化合物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称,常常被应用于 功能分析、抗体研究、尤其是药物研发等领域。 多肽合成服务包括标准化学多肽合成
多肽合成的过程
1) 去保护:Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂(piperidine)去 除氨基的保护基团。2) 激活和交联:下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联,形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。循环:这两步反应反复循环直到合成完成。3) 洗脱和脱保护:
多肽合成方法
1.酰基叠氮物法 早在1902年,Theodor Curtius就将酰基叠氮物法引入到肽化学中,因此它是最古老的缩合方法之一。在碱性水溶液中,除了与酰基叠氨缩合的游离氨基酸和肽以外,氨基酸酯可用于有机溶剂中。与其他许多缩合方法不同的是,它不需要增加辅助碱或另一等当量的氨基组分来捕获腙酸。
卤代烃与硫氰酸盐反应合成法制备硫氰酸酯
Lewellyn等采用四丁基溴化铵做相转移催化剂,通过硫氰化钠和烯丙基氯在水溶液中进行相转移催化反应,制备烯丙基硫氰酸酯(人造芥子油)中间体,然后升温、回流,使硫氰酸酯异构成异硫氰酸酯。近年来,国内开发了烯丙基异硫氰酸酯的人工合成工艺,即采用硫氰酸盐与烯丙基卤的液固非均相反应,通过常压蒸馏提纯法
多肽合成仪的重点
科研单位考虑因素 a)设备本身对实验研究的帮助 ①对于多肽合成化学反应,使用设备可避免人手工操作对人体的伤害(试剂腐蚀) ②由于程序化设定,可保证每步骤偶合反应的充分性以及实验整体的稳定性 ③可以合成难肽以及超长肽(制造商需要提供其使用研究型多肽合成仪合成多肽的检测报告) ④在休息时间
多肽合成仪的原理
多肽合成仪以固相合成为反应原理,在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序(序列,一般从C端-羧基端 向 N端-氨基端)不断添加、反应、合成,操作最终得到多肽载体。固相合成法,大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生,参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的,并且在反应之前