大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定(二)

1.4 颗粒细胞鉴定1.4.1 HE染色 取生长旺盛的第4 d的细胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的细胞悬液,种植于已预置好小盖玻片的24孔培养板中,放人CO2 培养箱中,在37 ℃、5% CO2及完全饱和湿度条件下进行培养。当细胞生长至70%融合时取出玻片,用PBS冲洗盖玻片3次,每次5 min。4%多聚甲醛固定20 min。取出细胞爬片,PBS冲洗2次,苏木素染色2 min,流水冲去浮色,入盐酸酒精中分色数秒,流水冲洗3 min,镜下细胞核染色清晰,胞浆不着色。5%伊红染色2~3 min,流水冲去浮色,梯度酒精脱水,二甲苯透明,封片后光镜下观察细胞形态。1.4.2 FSHR表达鉴定颗粒细胞 细胞爬片制作同前,4%多聚甲醛固定。按以下步骤进行细胞免疫化学染色:固定好的细胞爬片,PBS洗涤3 min×3次;3% H2O2室温孵育5 min,消除内源性过氧化物酶活性,PBS......阅读全文

大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定(二)

1.4 颗粒细胞鉴定1.4.1 HE染色 取生长旺盛的第4 d的细胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的细胞悬液,种植于已预置好小盖玻片的24孔培养板中,放人CO2 培养箱中,在37 ℃、5% CO2及完全饱和湿度条件下进行培养。当细胞生长至70%融合时取出

大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定(一)

大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定 许 川1/舒为群1,/张 亮1/曹 佳2/周 新3(1.第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室, 重庆 400038; 2. 第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室,重庆 400038;3. 第三军医大学西南医院烧伤科, 重庆 400038) Cultur

想要实现大鼠卵巢颗粒细胞原代培养,必须完成这些步骤

大鼠卵巢颗粒细胞分离自PMSG诱导后3天的大鼠的卵巢组织,颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞,其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。细胞形状呈圆形或椭圆形。    大鼠卵巢颗粒细胞原代分离培养:    1、材料准备:取21-25天雌性SD大鼠,每日皮下注

大鼠原代细胞分离与培养

  一、大鼠神经元细胞(酶消化法)   简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。   二、大鼠雪旺细胞(植块法)   简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C

新生大鼠心肌细胞原代培养实验(二)

 3.   用第二套手术器械进行下列操作。用眼科直镊和眼科弯剪把培养皿中的心脏周边的血凝块及纤维组织剔除掉,放在另一个预先装好D-Hank's液的培养皿中,把心脏组织再洗一遍后,将心脏组织放在另外一个培养皿中(或者其它合适容器中,视个人习惯),加少许 0.06%胰酶,用眼科弯剪将心脏

新生大鼠心肌细胞原代培养实验——原代培养技术

新生大鼠心肌细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于细胞形态研究;(3)应用于临床研究。实验方法原理将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD 乳鼠试剂、试剂盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青链

大鼠肝星状细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠肝星状细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠骨髓原代培养用于生产MSCs

试剂和材料:完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经F杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。含0.2μg/ml两性霉素B。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;2.A;3.

用于生产MSCs的大鼠骨髓原代培养

试剂和材料:1. 完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经FBS杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。含0.2μg/ml两性霉素B。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周

原代细胞分离与培养

对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实是个

卵巢颗粒细胞瘤的治疗方法

治疗治疗颗粒细胞瘤的最通常方法为手术切除,最常见的是施行肿瘤细胞减灭术。对于肿瘤包膜破裂的患者,通常兼顾化学药物治疗,并多是采用与卵巢癌类似的以顺铂为主的多药联合化疗方案;此外放射治疗也是有益的综合治疗手段之一。

卵巢颗粒细胞瘤的临床特征

临床特征绝大多数的卵巢颗粒细胞瘤患者均有临床症状,因为患者年龄和性别不同,症状会有所区别。对于女性患者而言,症状包括:激素症状。由于肿瘤细胞可以分泌雌性激素,如果患者是绝经后,通常会发生非正常阴道出血,偶然伴有乳房胀痛、乳房增大、阴道涂片鳞状上皮成熟指数右移等;如果患者是生育期妇女,则会出现月经过多

卵巢颗粒细胞瘤的预后介绍

  颗粒细胞瘤一般预后较好。  1.临床期别是影响预后最重要的因素  临床期别早,5年生存率高;临床期别晚,5年生存率低。  2.肿瘤细胞分化程度  肿瘤细胞有明显的异型性,核分裂活跃≥5/10HPFs,甚至可见不正常核分裂,均提示肿瘤恶性程度高,预后不佳。肿瘤组织学类型与预后的关系,未得出一致的结

关于卵巢颗粒细胞瘤的简介

  卵巢颗粒细胞瘤为最常见的一种具有内分泌(以雌激素为主)功能的卵巢肿瘤。可发生于任何年龄,多数在绝经期后,青春期前者很少。常会有急剧的腹痛症状出现,晚期易复发。  颗粒细胞瘤患者,其子宫内膜癌的机会是正常人的10倍,颗粒细胞瘤也易合并子宫肌瘤,更加重了阴道不规则出血症状。6%的患者有合并乳腺癌的可

怎样预防卵巢颗粒细胞瘤?

  颗粒细胞瘤为卵巢低度恶性肿瘤,因为其有“晚期复发”的特征,长期随诊更为必要。  1.成人型颗粒细胞瘤  开始每3个月随诊1次,1年后每半年复查1次。重要的是坚持长期随诊。成人型颗粒细胞瘤术后5年、10年甚至20年复发均有报道。  2.幼年型颗粒细胞瘤  大约有5%的幼年型颗粒细胞瘤为恶性,其特点

大鼠肺成纤维细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、

大鼠肺成纤维细胞原代培养实验

实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 Wistar乳鼠试剂、试剂盒 PBS牛血清青霉素链霉素EDTA胰酶碘酒酒精仪器、耗材 绵球科直剪眼科弯剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿塑料

大鼠肺成纤维细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、

新生大鼠心肌细胞原代培养实验

原代培养技术             实验方法原理 将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

新生大鼠心肌细胞原代培养实验

原代培养技术             实验方法原理 将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠MSCs的获得和扩增实验—大鼠骨髓原代培养用于MSCs生产

实验材料大鼠骨髓试剂、试剂盒灭菌CCM含0.2μg ml两性霉素B(两性霉素B洗剂)非灭菌0.85%台盼蓝盐溶液PBSA仪器、耗材聚丙烯离心管 15 ml或50 ml塑料组织培养Petri培养皿 直径15 cm改良的Neubauer血细胞计数器实验步骤(a)从一根股骨所得的骨髓悬液中取出10μL,与

细胞技术专题:大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验-二

 三、 脑微血管段的分离与脑微血管内皮细胞原代培养  1.  大鼠颈椎脱臼处死后浸泡于75%乙醇中消毒3~5 min后断头置于玻璃培养皿中,打开颅腔后取出全脑置于盛有冷D-Hanks'液的玻璃培养皿中解剖去除小脑、间脑(包括海马)。2.  随后将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以吸除软脑膜及脑膜大

原代细胞的培养与建系

  凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。细胞的纯化或细胞克隆技术是细胞培养工作的基础。  原代细胞的取材  人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件,直接影响细胞的体外培养。  一、取材的基本要求  1.取材要注意新鲜和保鲜  2.应严格无菌

大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项

大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项:1. 收到后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承

卵巢颗粒细胞瘤的基本信息

卵巢颗粒细胞瘤(英语:Granulosa cell tumours,granulosa-theca cell tumours),是一种由颗粒细胞异变引起的肿瘤。它是一种性腺间质肿瘤及非上皮组织肿瘤,并占性腺间质肿瘤病例的40%。尽管颗粒细胞瘤通常仅现于卵巢,极个别情况也出现在睾丸中。这类肿瘤应当被视

治疗卵巢颗粒细胞瘤的相关介绍

  1.手术治疗   手术是颗粒细胞瘤最重要的治疗手段,根据临床期别的不同手术范围亦有区别。   (1)Ⅰ期 行全面分期手术,术中探查十分重要。应仔细检查盆、腹腔脏器、腹膜、子宫直肠窝等处,并多处取材活检。   (2)Ⅱ期以上 均应施行肿瘤细胞减灭术,切除全子宫、双附件、大网膜腹主动脉旁、腹膜

卵巢颗粒细胞瘤的诊断方式介绍

  卵巢颗粒细胞瘤是临床特征明显的肿瘤。患者附件发现包块伴有明显的雌激素刺激引起的内分泌紊乱症状,诊断多不困难。对于临床症状不典型的患者,则要根据其年龄肿瘤大小、质地、辅助检查等综合材料加以分析、鉴别后,得出较准确的诊断。尚有少数患者,需术中冰冻病理检查得以确诊。   在肿瘤标记方面,血浆抑制素抗

卵巢颗粒细胞瘤的病因及病理

病因到目前为止,颗粒细胞瘤的发病原因尚不清楚。但研究发现97%的颗粒细胞瘤在FOXL2中存在一类完全相同的基因缺陷(DNA复制错误),但这类突变不会遗传给后代。很多研究推定此为颗粒细胞瘤的病因。病理对成人型颗粒细胞瘤中,肿瘤多数为单侧性,双侧性占5%至10%,直径平均为12cm;呈囊性、实性或两者兼

新生大鼠心肌细胞原代培养实验(一)

新生大鼠心肌细胞原代培养可以:(1)细胞保种;(2)用于细胞形态研究;(3)应用于临床研究。实验方法胰酶消化法实验方法原理将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD 乳鼠试剂、试剂盒低糖 DMEM、胰