免疫学细胞因子的定量检测,Elispot酶联斑点分析技术五
ELISPOT 实验方案 对应BD的试剂盒 实验材料的准备 试剂盒中没有但是必须的 材料: • 已消毒的移液器 (Gilson)。单道20ul,100ul,200ul,1ml, 8/12道200ul • 无菌一次性聚苯乙烯吸量管 (1ml, 5ml, 10ml)(Axygen)。 • 一次性乳胶手套 。 • 无菌一次性离心管(15ml、50ml)(Corning cat#430052 and 430290)。 • 吸水纸(卫生纸) • 无菌tip头, 200ul,1ml, ......阅读全文
RD-Systems试剂-QA-常见问题解答(五)
问:我用了DuoSet ELISA开发系统,但几乎就没有颜色产生。那些步骤可能出了问题?答:很多方面都会影响到颜色的产生。比如:1) BSA的干扰。选择不含脂肪酸的ELISA级别的BSA很重要,可以降低球蛋白对实验的干扰。R&D Systems建议使用Serological Proteins的
异相酶免疫试验和均相酶免疫试验
Ag为待测抗原,AgAb-E为结合标记物,Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失,即结合标记物(AgAb-E)无酶活性,游离标记物(Ab-E)有酶活性; (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E
有效评估疫苗引起细胞免疫的效应IFNγ-ELISpot法
自新冠肺炎疫情爆发以来,至今已有大半年时间。目前尚无任何直接有效的药物能阻止疫情蔓延。疫苗的研发进程可能直接决定了这场抗疫战的持续时间。全球研究学者对新冠病毒疫苗的研究也正在如火如荼地开展。 5月22日,医学期刊《柳叶刀》发表了我国军事医学研究院陈薇院士和江苏省疾控中心
关于Th细胞检测的酶联免疫点法介绍
Schauer等对胞内细胞因子的测定作出综合评价,标本来源包括末梢血单个核细胞、肿瘤细胞、组织细胞等,检测方法常用免疫组化法,主要为碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)技术[6] 和测定mRNA的荧光原位杂交技术(FISH),此外还有显微荧光法,将单个细胞用多聚甲醛固定,皂素渗透后,行间接免疫荧
干扰素释放试验(IGRAs)两种技术原理的比对
目前,临床上应用的结核感染T细胞免疫检测的IGRAs技术有两种:一是ELISPOT;一是酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。IGRA-ELISPOT方法(也称为细胞检测)采用的ELISPOT技术是细胞培养技术与ELISA技术结合产生的新
细胞因子的检测方法介绍
细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法主要有以下几类一.生物学检测法生物学检测又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。由于各种细胞因子具有不同的活性,例如IL-2促进淋巴细胞增殖,TNF杀伤肿瘤细胞,CSFci 激造血细胞集落形成,IFN保护细胞免受病毒攻击,因此选择某一细胞因子
什么是酶联免疫斑点试验
常用于类风湿因子、IFN-γ等细胞因子分泌细胞的定量测定。 在作ELISPOT时,选择的特异性抗体应该具有高亲和力、高特异性、低内毒素的特性。选用的细胞激活物必须不影响细胞的分泌功能。
ELISPOT
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体
关于白细胞介素检测的操作方法介绍
1.生物学活性检测 (1)促进细胞增殖和增殖抑制法:常用检测细胞增殖的方法有氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法、比色法、染色法和直接计数法等,其中测定细胞代谢酶来反映细胞增殖数的比色法常用,将不同稀释度的待测样品或细胞因子标准品与培养的依赖细胞株共同培养一定时间,用酶标仪检测增殖的细胞数。
结核菌γ干扰素释放试验的介绍
细胞免疫介导的结核菌γ干扰素释放试验(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,又称IFNGRA或GRA)是近年来采用酶联免疫吸附测定(ELISA)或酶联免疫斑点(ELISPOT)法定量检出受检者全血或外周血单个核细胞对结核分枝杆菌特异性抗原的IF
结核菌γ干扰素释放试验介绍
细胞免疫介导的结核菌γ干扰素释放试验(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,又称IFNGRA或GRA)是近年来采用酶联免疫吸附测定(ELISA)或酶联免疫斑点(ELISPOT)法定量检出受检者全血或外周血单个核细胞对结核分枝杆菌特异性抗原的IF
免疫学检测法检测细胞因子
细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现,可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体,因此可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。尽管细胞因子种类繁多,只要获得了针对某一因子的特异性抗体(包括多克隆抗体或单克隆抗体)均可采用相似的技术开展工作。
细胞因子免疫学检测法
细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现,可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体,因此可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。尽管细胞因子种类繁多,只要获得了针对某一因子的特异性抗体(包括多克隆抗体或单克隆抗体)均可采用相似的技术开展工作。
细胞因子的检测方法
细胞因子的检测方法细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。
细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子
细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。 但
细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子
细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子
MHC-Tetramer-技术:检测抗原特异性-T-细胞的金标准
MHC 四聚体(MHC Tetramer)是一类免疫学试剂,由四个主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)与抗原肽结合的单体分子组成,并标记有荧光,用于 T 细胞免疫分析的 MHC 四聚体检测(MHC Tetramer Assay,
ⅠCTP试剂盒介绍
为生命科学研究提供ELISA试剂盒(仅供科研)、抗体和抗原(仅供科研)、流式抗体,使您的检测结果更稳定可靠,用心服务科研。ELISA kit 优势1:标准品采用真核表达重组蛋白 定量更准确优势2:90%以上采用单抗-单抗组合 稳定性更好优势3:独特的兔单抗技术 鼠靶点检测有保障优势4:8大试剂盒质控
ⅧAg试剂盒介绍
为生命科学研究提供ELISA试剂盒(仅供科研)、抗体和抗原(仅供科研)、流式抗体,使您的检测结果更稳定可靠,用心服务科研。Ⅷ-Ag试剂盒ELISA kit 优势1:标准品采用真核表达重组蛋白 定量更准确优势2:90%以上采用单抗-单抗组合 稳定性更好优势3:独特的兔单抗技术 鼠靶点检测有保障优势4:
结核感染T细胞斑点试验在结核性心包炎诊断中的应用
背景:近年研究表明,结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测外周血中经结核菌特异性抗原刺激后释放干扰素的T细胞,诊断活动性结核分枝杆菌感染具有较高的敏感性⋯ ,本研究主要针对我院收治的高度怀疑结核性心包炎的患者进行ELISPOT检测,评价该方法对结核性
Ƴ干扰素释放试验临床应用的价值、问题与展望
根据最近两次的结核病流调看,我国目前结核病疫情和结核分枝杆菌感染的情况呈现两个特点。首先,我国的潜伏结核感染率为44.5%-50.2%(用PPD试验检测),应用ELISPOT方法检测的LTBI率为15.4%-30.7%;其次,临床结核病患者中有85.6%的活动性肺结核是菌阴患者。由此可见,潜伏结核感
酶联免疫检测影响因素的分析
酶联免疫(EIJISA)是目前检验科常用的免疫学检测方法之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。1实验室操作人员的素质因素实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、
免疫学检测法检测细胞因子知识点来了!
细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现,可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体,因此可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。 尽管细胞因子种类繁多,只要获得了针对某一因子的特异性抗体(包括多克隆抗体或单克隆抗体)均可采用相似的技术开展工
酶联免疫分析仪的技术参数
波长范围: 330-1100nm *滤光片配置:10个滤光片位置,标配405nm、450nm、492nm、630nm,选配6定制波长 吸光度范围:0.000―4.000A *光通道数:8通道光路检测,另设一个独立参比通道(选配) *示值稳定性:≤±0.002A或≤0.5%T/10min。
细胞因子的常见检测技术
1.生物活性检测 多种细胞因子(如IL-2、IL-6)在体外试验中可刺激其依赖株细胞增生。以3H-胸腺嘧啶参入法做细胞增生试验就可判定这些细胞因子的生物学活性。 利用某些细胞因子的功能特点也可检测其生物学活性。例如,利用干扰素可保护L929细胞免受水泡性口炎病毒的破坏的性质可检测干扰素的生物
免疫学技术专题:斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)
基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6cm
酶联免疫分析缺点
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗
荧光免疫斑点FluoroSpot技术在新冠免疫学研究的应用
想同时进行多细胞因子检测,你只需要一个“复联”FluoroSpot 众所周知,免疫反应是由先天性免疫和适应性免疫细胞之间复杂的相互作用机制协调进行的。适应性免疫也就是后天免疫,其主要包括T淋巴细胞参与的体液免疫和B淋巴细胞参与的细胞免疫。 而当机体要产生对抗