PFS预灌封玻璃注射器中的蛋白质聚集和颗粒形成

预灌封注射器(PFS)中形成的治疗性蛋白质的稳定性可能会因蛋白质分子暴露于硅油-水界面和空气-水界面而受到负面影响。另外,诸如在运输过程中经历的搅动可能增加蛋白质与界面的相互作用的有害作用(即,蛋白质聚集和颗粒形成)。在这项研究中,将含有单克隆抗体或溶菌酶的无表面活性剂的制剂在PFS中孵育,将其暴露于硅油-水界面(硅化的注射器壁),空气-水界面(气泡)和搅拌应力(发生在首尾翻转期间)。使用流动显微镜,在所有条件下都可以检测到颗粒(直径≥2 m)。在装有气泡的搅拌式硅化注射器中发现了最高的颗粒浓度。在这种条件下形成的颗粒由硅油滴和聚集的蛋白质以及蛋白质聚集体和硅油的附聚物组成。我们提出了一种在PFS中产生颗粒的界面机制,其中三相(硅油-水-空气)接触线上的毛细作用力从界面上去除了硅油和胶凝的蛋白聚集体,并将其运输到主体中。这种机制解释了硅油-水界面,空气-水界面和搅拌在蛋白质配方中颗粒生成中的协同作用。 文章链接:仪器设......阅读全文

SSR及PAGE电泳2

2、反应混合液配制在0.5mL Eppendorf管中加入下列试剂: 稀释DNA 2 μL primer 各0.5 μL 10×PCR Buffer 2.5 μL dNTP 2 μL MgCl2 1.5 μL Taq酶 0.2 μL

共振质量测试法在生物制药开发中的应用(一)

预测和测量蛋白质聚集,是生物制药配方中的一个重大难题。Lisa Newey-Keane博士描述了一种新型分析方法,可以方便地研究蛋白质的聚集。 由于在药物研发总体经费支出中,生物分子研究工作所占的比重越来越大,因此分析测试在迅速发展的生物制药行业受到广泛关注。这些分子开发不仅成本高昂,而且受到严格监

聚丙烯酰胺凝胶(PAGE胶电泳)电泳的方法与银染方法

PAGE胶电泳(聚丙烯酰胺凝胶电泳 )主要是以PAGE为介质,根据DNA分子大小和电荷分离DNA分子。PAGE胶电泳采用银染法进行显色。银染的原理:一、银离子(一般是AgNO3 )和DNA结合;二、还原剂甲醛把Ag+ 还原成银颗粒,最终DNA呈现为黑褐色。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持

生物实验室实战经验分享(二)

  注:不能用Gu-HCl代替。   13. 我也推荐几个偷懒的方法   1. 做SDS-PAGE跑胶通常都是现配现用,但配胶要>1h,所以如果想第二天睡个懒觉而又不耽误跑胶可以于前一天晚上做好浓缩胶和分离胶,待凝聚后不要拔下梳子,把含胶玻璃板从制胶槽取下,用保鲜膜包上,注意玻璃板上下两

生长激素各剂型及其特征

  1、 冻干粉  注射用人生长激素,也通常被称为生长激素粉剂,不添加防腐剂,注射时需以无菌注射用水溶解后,使用注射器注射。注射频率为每天一次。  2、 注射液  人生长激素注射液,也通常被称为生长激素水剂,分为卡式瓶包装和预灌封包装。  (1)预灌封包装:单支单剂量包装,不添加防腐剂,直接一步注射

定氮仪在小麦颗粒蛋白质含量检测中的应用

      蛋白质是较为复杂的含氮有机物的合成,以往我们用人工方式检测的时候是比较费时的,而且容易受到人为的影响,在使用的试剂方面也是比较多的,但是容易对环境造成污染。而现在我们都在使用定氮仪进行操作,该法具有自动、省时、准确,减少环境污染等优点。小麦的品质高低受小麦的蛋白质含量的影响很大,这样会严

简介无针注射器的修理-和维护

  贮存  1、无针注射器在存放时应保证安全锁和注射按钮处于未弹起的状态。  2、请不要将注射器及其配件长时间暴露于强光下。  3、注射器应存放在远离儿童的位置。  4、请勿将注射器置于水或其它液体中。  5、避免在冰箱中存放注射器。  6、避免注射器从高处坠落。  保养  1、注射器的所有外表面可

蛋白质的双向电泳实验_等电聚焦法

蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。本实验目的是

15%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的步骤

实验步骤:凝胶的制备:1、 清洗干净两块玻璃板,晾干后按要求装配好垂直电泳板,两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边,防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45~60℃角。把玻璃板在灌胶支架上固定好。3、 分离胶:按1∶3∶8∶水=1∶2∶4∶1的比例,先将贮备液1,3和

广东特色实验室体系初步形成-高层次人才聚集

  今年是广东省重点实验室建设25周年。  1986年,广东省在国内率先启动重点实验室建设计划。经过25年的开拓进取,如今的广东省重点实验室已成为广东科技创新体系的重要组成部分,成为广东基础研究、应用基础和应用开发研究、战略性高新技术研究的核心力量和骨干平台,成为广东经济、

灌砂筒操作步骤

确定砂筒内下圆柱体内砂的重量,其步骤如下:●在储砂筒内装满砂,筒内砂的高度与筒顶的距离不超过15mm,称取筒内砂的重量,难确至1g(m),每次标定及以后试验都应该维持这个重量不变。●将开关打开,让砂流出,并使流出的砂体积与工地所挖试洞钵积相等, (或等于标定罐的容积),然后关上开关,并称量筒内不再流

灌砂筒仪器标定

灌砂筒仪器标定:标定灌砂筒下部圆锥体内砂的重量,其步骤如下:●在储砂筒内装满砂,筒内砂的高度与筒顶的距离不超 过15毫米,称取筒内砂的重量准确至1g(m1),每次标定及而后的试验都应该维持这个重量不变。●将开关打开、让砂流出,并使流出砂的体积与工地所挖试洞的体积相等(或等于标定的容积),然后关上开关

灌砂筒标准器具

灌砂筒标准器具:●饭盒(存放挖出的试样)若干。●量砂 粒径0.25~0.5㎜清洁干燥的均匀砂,约20~40㎏。应先烘干,并放置足够时间,使其与空气的湿度达到平衡。●打洞及从洞中取料的合适工具,如凿子、铁锤、长把勺、长把小簸箕、毛刷等。●金属标定罐:内径100㎜,高150㎜和200㎜的金属罐各一个,上

Nature:揭示一种阻止蛋白聚集物在线粒体中聚集的新机制

  蛋白聚集物对线粒体功能是有害的,因而会破坏向它们的宿主细胞提供化学能。在一项新的研究中,来自德国慕尼黑大学等研究机构的研究人员描述了一种阻止这些蛋白聚集物在线粒体中聚集的蛋白复合物。相关研究结果近期发表在Nature期刊上,论文标题为“Structure and function of Vms1

医用注射针针尖穿刺力检测方法

注射器是医学临床使用范围比较广泛的一种医疗器械,其质量的优劣,直接与人的身体健康和生命安全息息相关。注射器的注射针穿刺力是否合适直接影响其使用适应性能,是各生产企业重点关注的指标之一。因此,国家标准YBB00092004中就对注射针穿刺力进行了明确的规定。 医用注射针针尖穿刺力强度测试用什么检测仪器

蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在

蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在

膜片钳技术的操作步骤

  (1)膜片微电极的制作  拉制  膜片微电极是将玻璃毛细管用拉管仪拉制而成。  涂硅酮树酯  将硅酮树酯涂于微电极的最尖端以外的部分,然后将其通过加热镍铬电阻线圈而烘干变固。  热刨光  在显微镜下,将微电极尖端接近热源进行热刨光处理可提高巨阻抗封接的成功率。  充灌微电极液  用于灌充微电极的

载体两性电解质pH梯度等电聚焦实验—薄层分析等电聚焦

实验方法原理利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性 pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析。所以利用等电聚焦技术分析的对象只限于蛋白质和两性分子。分析的条件是凝胶中有稳定的、连续的和线性的 pH 梯度。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液仪器、耗材注射器水浴实验步骤一

载体两性电解质pH梯度等电聚焦实验

实验方法原理 利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性 pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析。所以利用等电聚焦技术分析的对象只限于蛋白质和两性分子。分析的条件是凝胶中有稳定的、连续的和线性的 pH 梯度。试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液仪器、耗材 注射器水浴实验

蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验——均一浓度的微型凝胶电泳

实验材料蛋白质试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材电泳仪梳子注射器夹子实验步骤1.  按顺序安装带凹口的小玻璃平板或小矩形玻璃平板、0.75 mm 垫片、大矩形玻璃平板叠放在一起组装成夹层,并确保夹层放入多胶灌制装置后,垫片能安放妥当,两头均与玻璃平板的上下边缘对齐。 2.  将凝胶夹层紧密地安放在多板

微型垂直电泳槽

微型垂直电泳槽微型垂直电泳槽是用来对少量核酸及蛋白质样品进行垂直电泳的装置,玻璃板与垫条的一体化设计确保垫条表面及垫条制胶密封端的平整,彻底防止漏液。备选多种厚度间隔的垫条玻璃板和制胶梳子( 0.75mm/1.0mm/1.5mm ),满足不同上样量需要。可同时运行二块 8.3 × 7.3cm 胶,做

博勒飞粘度计在胶粘剂行业应用

  胶粘剂指通过界面的黏附和内聚等作用,能使两种或两种以上的制件或材料连接在一起的物质。电子胶粘剂是胶粘剂的细分产品,主要用于电子电器元器件的粘接、密封、灌封、涂覆、结构粘接、共行覆膜和SMT贴片。   电子胶粘剂市场快速发展   近年来,在国家政策大力支持下,中国电子信息产业

蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳2

(4)10% 过硫酸铵,5ml(0.5g过硫酸铵, 加5ml蒸馏水, 新鲜配置),-20℃保存一个月左右。(5)10% (w/v)SDS,10g SDS加蒸馏水100ml, 室温保存。(6)10% TEMED 0.1ml TEMED , 加0.9 ml蒸馏水。(7) 2×上样缓冲液(10ml):0.

液氮灌的使用注意事项

液氮罐是一种低温容器,常见的分类是储存型及运输型用于室内及室外远距离运输中。但是当我们正常使用液氮罐的过程中,应该注意哪些安全注意事项呢?1:防止冻伤液氮温度低只有-196摄氏度,温差比较大,容易发生剧烈沸腾及喷射现象,操作时防止出现冻伤。2:降低蒸发液氮是通过空气中的氧气在高压低温下形成的液态氮,

薄膜热封仪的结构和功能特点

薄膜热封仪采用热压封口法测定塑料薄膜基材、软包装复合膜、涂布纸、铝箔及其它热封复合膜的热封温度、热封时间、热封压力等参数。根据各种材料不同的热封性能,及其封口工艺参数的差别,通过本仪器标准化的设计、规范化的操作,可获得的热封试验指标。供塑料软包装厂家、食品企业、实验室和检验机构等试验制袋工艺使用。 

封头抛光机的概述和特点

  概述  适用于各种不锈钢椭圆,蝶形,及锥形封头的内外抛光.从60-400目及镜面抛光或拉丝亚光。封头抛光机可以做到低成本,高效率,高质量,有效解决工人进入罐内抛光安全性及职业病的问题。  适应范围  各种不锈钢椭圆,蝶形,及锥形封头的内外抛光.从60-400目及镜面抛光或拉丝亚光  产品特点  

PNAS:ALS是一种蛋白质聚集疾病

  最近,康奈尔大学的化学研究人员,利用一种技术阐释单个蛋白的微妙变化,对肌萎缩侧索硬化症(ALS)的根本原因,提出了新的见解。  康奈尔大学化学和生物化学系教授Brian Crane,指导了这项研究,随后他和物理化学教授Jack Freed,以及康奈尔大学国家先进ESR技术生物医学中心副主任Pet

说说蛋白质聚集体可以做哪些检测呢

 蛋白质聚集体是蛋白类药物研发和商业化过程中一个重要的挑战之一。聚集体在蛋白质产品开发和生产过程的所有阶段都可以观察到,如蛋白表达、纯化、冻干等。可能对产品的质量和功效有显著的负面影响,其通常会减弱蛋白生物活性。此外蛋白聚集体可能存在潜在增强免疫原性的风险。   蛋白质聚集体的积累是许多神经退休性疾

Cell发布惊人发现,为蛋白质聚集体正名

   当细胞暴露于非致命性高温下时形成蛋白质聚集体似乎是一种有组织的应激反应的一个组成部分,而非是在遭到破坏的过程中受损蛋白累积所致。在发表于9月10日《细胞》(Cell)杂志上的研究论文中,来自芝加哥大学和哈佛大学的科学家们发现完全可以逆转蛋白质聚集体——在细胞回到正常温度之后,聚集的蛋白质会松开