PFS预灌封玻璃注射器中的蛋白质聚集和颗粒形成
预灌封注射器(PFS)中形成的治疗性蛋白质的稳定性可能会因蛋白质分子暴露于硅油-水界面和空气-水界面而受到负面影响。另外,诸如在运输过程中经历的搅动可能增加蛋白质与界面的相互作用的有害作用(即,蛋白质聚集和颗粒形成)。在这项研究中,将含有单克隆抗体或溶菌酶的无表面活性剂的制剂在PFS中孵育,将其暴露于硅油-水界面(硅化的注射器壁),空气-水界面(气泡)和搅拌应力(发生在首尾翻转期间)。使用流动显微镜,在所有条件下都可以检测到颗粒(直径≥2 m)。在装有气泡的搅拌式硅化注射器中发现了最高的颗粒浓度。在这种条件下形成的颗粒由硅油滴和聚集的蛋白质以及蛋白质聚集体和硅油的附聚物组成。我们提出了一种在PFS中产生颗粒的界面机制,其中三相(硅油-水-空气)接触线上的毛细作用力从界面上去除了硅油和胶凝的蛋白聚集体,并将其运输到主体中。这种机制解释了硅油-水界面,空气-水界面和搅拌在蛋白质配方中颗粒生成中的协同作用。 文章链接:仪器设......阅读全文
变性聚丙烯酰胺凝胶的制备方法
1.胶板准备(1)胶板的清洁是灌胶能否成功的第一关键步骤。反复使用时要将玻璃板和间隔片上凝胶去除干净,彻底洗净后干燥。用乙醇擦拭玻璃板上残留水渍。不能有一点残留的凝胶和残渣,否则灌胶时会产生气泡。(2)灌胶前要对玻璃板分别进行处理。长玻璃用亲和硅烷,短玻璃用剥离硅烷处理,便于电泳结束后长短玻璃板的分
新冠病毒与颗粒讨论——病毒诊断和治疗中的颗粒
这场新冠病毒的袭击可谓是来势汹汹,然而要想真正打赢这场“战疫”,病毒的诊断和疫情治疗是必不可少的步骤。现在市面上诊断的主流方案无非有三种,基于肺部造影成像的CT技术,基于病毒核酸检测的PCR类技术,以及基于病毒抗原抗体的胶体金层析技术。CT成像技术:基于肺部感染的影像学来诊断。优点是速度快、设备普及
凝胶过滤层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 凝胶过滤缓冲液仪器、耗材 布氏漏斗凝胶过滤层析柱分光光度计实验步骤 1. 如果凝胶过滤的介质是干粉,则需在凝胶过滤缓冲液中完全溶胀。2. 在远离过往通道及直接光照的恒温环境,将层折柱垂直安装在稳固的实验室支架上。3. 用一注射器将凝胶过滤缓冲液从柱子的输出管注入柱
放射性同位素标记的DNA序列测定分析
放射性同位素标记的DNA序列测定分析 测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷
放射性同位素标记的DNA序列测定分析
测定DNA 的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA 测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA 聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA 核苷酸序列的方法。它要求使用一种
《Cell》子刊:逆转蛋白质聚集的天然细胞机制
你在平底锅里打一颗鸡蛋,只需几分钟蛋清就会从透明的粘液状态变成富有弹性的白色固体,蛋黄也慢慢变硬,一系列生理和化学变化导致鸡蛋内化学键断裂、蛋白质发生聚集和重塑,你得到了一颗不可逆的固态煎蛋。 从生鸡蛋到熟煎蛋容易,但是,从熟煎蛋到生鸡蛋却不可逆。特拉维夫大学(Tel Aviv Univers
“保和颗粒”中橙皮苷的含量测定
01 参考标准 中国药典2015年版一部 02 色谱条件 色谱柱:月旭Ultimate®XB-C18(4.6×250mm,5um) 流动相:乙腈/0.1%磷酸=17/83 检测波长:283nm 柱温:30℃ 流速:1.0mL/min 进样量:5
生命伊始,最先形成的蛋白质
《Journal of the American Chemical Society》杂志报道了课题组对一种原始肽(短蛋白)的描述性研究。 1960s至1990s,化学家Günter Wächtershäuser假设海洋中含铁和含硫的岩石如果能孕育生命的话,那么,作为生命催化剂的短肽应该可以与这
影响蛋白质面团形成的因素
小麦胚乳中的面筋蛋白质在当有水分存在时在室温下混合和揉搓能够形成强内聚力和粘弹性糊状物的过程。水合的面粉在混合揉搓时,面筋蛋白质开始取向,排列成行或部分伸展,这样将增强蛋白质的疏水相互作用并通过二硫交换反应形成二硫键。最初的面筋颗粒形成薄膜,形成三维空间上具有粘弹性的蛋白质网络。 影响蛋白质面
凝胶过滤层析实验
蛋白质的凝胶过滤分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
蛋白质的二硫键在哪种细胞器中形成
在真核生物细胞中,二硫键一般是在粗面内质网内生成,而非原生质.这是因内质网的氧化环境及原生质的还原环境(参考谷胱甘肽).所以二硫键多会在分泌的蛋白质、溶酶蛋白质及膜蛋白质的外浆区域中找到.但是亦有例外的情况.在原生质的蛋白质附近出现的半胱氨酸残基会成为氧化感应器,当细胞的还原潜能转弱时,它们氧化及触
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤
蛋白质技术专题:凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤
蛋白质的双向电泳实验
实验方法原理 蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing ,IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点
蛋白质的双向电泳实验
等电聚焦法 实验方法原理 蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing ,IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离;
强化生物除磷系统中好氧颗粒污泥形成与研究
强化生物除磷 (enhanced biological phospho- rus removal,EBPR) 被认为是一种有效的除磷工 艺,反应条件先厌氧后好氧,利用聚磷菌的富集 生长去除水中大部分的磷[1]。EBPR 法与其他传统 方法相比,是一个相对低廉和可持续的方法, 同时该工艺已经在全球
注射器滑动性测试仪
介绍:采用7寸单彩液晶触摸显示屏,中英文菜单显示。并由键盘进行选择卡式瓶的规格、实时显示并打印*作用力、启始力、重新启始力、活塞在卡式瓶内壁运动全过程中所需的推动力和活塞移动位移的纪录图。 卡式瓶又名笔式注射器用硼硅玻璃套筒,该瓶前部装有橡胶密封保护的注射用针头,瓶口用胶塞铝盖密封,尾部用橡胶活塞密
重要发现:突触后受体聚集、神经肌肉接头形成的新机制
我们日常生活中的每一个活动如走路、吃饭、喝水、呼吸甚至静坐都离不开肌肉收缩。控制肌肉离不开人体里一个叫神经肌肉接头的结构,这是一个运动神经元与骨骼肌纤维之间的链接(神经科学上叫突触)。神经肌肉接头是一个化学突触,运动神经元膜稍释放乙酰胆碱,后者激活肌肉细胞膜上的乙酰胆碱受体产生电位变化,这样就把
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖类物质,使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验材料蛋白质试剂、试剂
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直...4
2、将长、短玻璃板分别插到 形硅橡框的凹形槽中。注意勿用手接触灌胶面的玻璃。3、将已插好玻璃板的凝胶模平放在上贮槽上,短玻璃板应面对上贮槽。4、将下贮槽的销孔对准已装好螺丝销钉的上贮槽,双手以对角线的方式旋紧螺丝帽。5、竖直电泳槽,在长玻璃板下端与硅胶模框交界的缝隙内加入已融化的1%琼脂(糖)。其目
蛋白质双向电泳过程与体会
蛋白质双向电泳过程与体会 双向电泳IEF (sigma) IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的,嘻嘻! IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(ft,六一厂应
神经组织块膜片钳全细胞记录实验
实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料 细胞试剂、试剂盒 人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备
神经组织块膜片钳全细胞记录实验
实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近原始的生理环境,细胞具有更好的生理状态,封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内
神经组织块膜片钳全细胞记录实验
基本方案 实验方法原理 通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动,是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言,细胞更接近
共振质量测试法在生物制药开发中的应用(一)
预测和测量蛋白质聚集,是生物制药配方中的一个重大难题。Lisa Newey-Keane博士描述了一种新型分析方法,可以方便地研究蛋白质的聚集。 由于在药物研发总体经费支出中,生物分子研究工作所占的比重越来越大,因此分析测试在迅速发展的生物制药行业受到广泛关注。这些分子开发不仅成本高昂,而且受到严格监
注射器器身密封性测试方法(正压和负压)
注射器器身密合性测试方法: (1)无菌注射器器身密合性正压法:将注射器吸入公称容量的水,用表1规定的轴向压力及侧向压力,对芯杆作用30s,外套与活塞接触的部位不得有渗漏现象。 (2)无菌注射器器身密合性负压法:在88kPa的负压作用下保持60s±5s,外套与活塞接触部位不得产生泄漏现
定氮仪在小麦颗粒蛋白质含量检测中的应用
蛋白质是较为复杂的含氮有机物的合成,以往我们用人工方式检测的时候是比较费时的,而且容易受到人为的影响,在使用的试剂方面也是比较多的,但是容易对环境造成污染。而现在我们都在使用定氮仪进行操作,该法具有自动、省时、准确,减少环境污染等优点。小麦的品质高低受小麦的蛋白质含量的影响很大,这样会严
SSR及PAGE电泳2
2、反应混合液配制在0.5mL Eppendorf管中加入下列试剂: 稀释DNA 2 μL primer 各0.5 μL 10×PCR Buffer 2.5 μL dNTP 2 μL MgCl2 1.5 μL Taq酶 0.2 μL
生长激素各剂型及其特征
1、 冻干粉 注射用人生长激素,也通常被称为生长激素粉剂,不添加防腐剂,注射时需以无菌注射用水溶解后,使用注射器注射。注射频率为每天一次。 2、 注射液 人生长激素注射液,也通常被称为生长激素水剂,分为卡式瓶包装和预灌封包装。 (1)预灌封包装:单支单剂量包装,不添加防腐剂,直接一步注射