实验技术：组织切片的制备
【目的】组织标本必须首先被制成组织切片，再经过染色处理，然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术，也称为H & E染色。苏木素是碱性染色，细胞核被染成深紫或兰色，常用作核染色；伊红是酸性染色，细胞浆染呈红色，常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液（1）2-甲基丁醇(异戊醇)（2）干冰（3）O.C.T.(Tissue-Tek, SAKURA)（4）冰冻或石蜡组织块（5）酸性Harris 苏木素染料（6）1％酸性酒精70％酒精 99 ml浓盐酸 1 ml（7）醇溶性伊红染料（8）酒精（9）二甲苯（10）树脂封片液2.设备（1）......阅读全文
冰冻切片前的组织怎样保存
冰冻切片组织可先固定后冻存，也可直接冻存，直接冻存一般采取液氮中速冻，然后转入-20度保存，冻存组织应避免反复冻融，且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。未包埋的组织在-20度长期保存的组织会逐渐脱水(比如肌肉)，影响形态学观察。
LSCM组织切片的细胞核标记
组织切片的细胞核标记目前仍然采用 DAPI(4，6-联脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特点是专一性强、灵敏度高、稳定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激发，获取明亮的核标记荧光图像。PI(碘化丙啶 ex 536nm / em 617nm)也可以用于核标记，因
组织切片机常见问题分析
分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施： 常见问题一：所有切片呈阴性 原因分析：a.缓冲液内含叠氮化钠，抑制酶的活性； b.染色未完全按照操作步骤进行； c.漏加一种抗体或抗体失活； d.复染或脱水剂使用不当； e.底物中加入的过氧化氢少或失活。
硬组织切片机使用范围
1.可以进行软硬组织联合切片。 2.可以进行鲜活组织分切、取材。 3.能够制作大骨组织切片。 4、不脱钙骨组织切片 5、可选配激光线定位指引切割 6、可配套E400CS硬组织磨片机、E520光固化包埋机、E401/402平行载片粘合压片装置,共同组成硬组织切磨系统
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡，并浸入组织内部，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡，并浸入组织内部，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡，并浸入组织内部，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
TUNEL分析实验——组织切片的－TUNEL－染色
实验材料组织试剂、试剂盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 取下组织，立即用新制备的 4% 甲醛固定，室温过夜。用多聚甲醛制备 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通风橱中加热至 50~60℃，加几滴 1
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡，并浸入组织内部，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡，并浸入组织内部，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
组织固定、包埋及切片实操指南
如何做出一张合格的组织切片？ 一般要先取材→固定→透明→包埋→切片，最后进行染色组化等操作。本文着重叙述取材以后如何进行包埋和切片。 包埋可分为OCT包埋（冰冻切片）与石蜡包埋。 冰冻切片对于组织的抗原性保留比较好，但是形态保留比较差，一般用来做原位杂交ISH，免疫荧光IF。冰冻切片较厚一
抚生试剂免疫组织化学组织细胞的组织切片
一、载玻片的处理 免疫组化染色时间长，特别是双PAP、免疫金银染色等方法，所需时间更长，并要反复洗涤，切片在试剂中长时间浸泡，经多次洗涤，极易造成脱片而影响实验的结果。需采用以下方法处理：载玻片先置于洗洁液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min，清水洗干净后放人清洁液中浸泡12—24h，漂洗，用蒸馏
组织切片标本制作的基本原理
最为广泛应用的方法:石蜡切片 不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺
硬组织切片机的技术指标
1.切割带速度：10-560m/min；2.最大横切面：100×80mm；3.切片厚度：100µm；4.切削力：0.5-1.0N；5.工作台高度：800mm；6.切割方式：点接触带式切割；7.操作尺寸:800×700×850mm；8.切割刀具：金刚石带锯。
组织学切片机分类及应用
切片机分为很多种类，包括药材类切片机，器材类切片机，食品类切片机，组织切片类切片机等。按其结构又可分为摇动式切片机、轮转式切片机、滑动式切片机、推动式（雪橇式）切片机等。组织切片机是一种对人体组织及动植物组织作病理切片分析的设备。组织切片机一般分为：轮转式切片机和冷冻切片机。轮转式切片机：是借转动手
普通组织石蜡包埋切片的注意事项
1、固定剂应有足够的量，一般为组织块体积的10∽15倍。 2、根据组织的不同和实验目的的不同，选取不同的固定剂。 3、固定时间依材料大小、固定剂种类而异，可从1小时到几时小时，有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强，作用时间应严加控制，不能过长。 4、取材切面要平整，厚度不
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸；染色架；保湿盒；晾片盘；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟；2. 脱蜡和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修复工作液（pH8.0，稀释50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀释10倍使用） DAB显色液（临用前配制：试剂盒A、B、C各50ul，于1ml水中混匀）。方法1. 石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜 2.
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
组织学切片机分类及应用
切片机种类很多，包括药材类切片机，器材类切片机，食品类切片机，组织切片类切片机等。组织切片机主要是对人体组织及动植物组织作病理切片分析的设备。组织切片机一般主要分为：轮转式切片机和冷冻切片机。轮转式切片机：是借转动手摇轮进行切片动作。蜡块台镶装于可在沟槽内上下运动的金属夹座中，借微动螺旋向前推进切断
组织切片的免疫荧光标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 PBS抗体仪器、耗材 玻片加湿盒实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3. 稀释的第
LSCM冷冻组织切片的免疫荧光标记
冷冻组织切片的免疫荧光标记 将冷冻组织切片从 -80℃ 冰箱中取出，室温放置 10 min，待切片回温并干燥，浸于 PBS 中 10 min洗去OCT，可以无需 Triton 处理，即可进行免疫荧光抗体标记，操作步骤与培养细胞反应方法相同。反应在避光湿盒中进行，反应结束时用无荧光封固剂封片，4℃保存
组织切片的免疫荧光标记实验
实验方法原理免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。实验材料组织样品试剂、试剂盒PB
组织切片的免疫荧光双标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 第一抗体IgG实验步骤 1. 当进行双标记实验时，最重要的准则是：第一抗体应为不同类型，从而使第二抗体能分别识别之。第一抗体最好是来源于不同免疫动物。但如使用单克隆抗体，这一要求就有可能达不到，当使用单抗时，不同型的抗体如IgG和IgM，可被第二抗体确切区分
组织切片的免疫荧光双标记实验
间接免疫荧光显微镜检术可使两种或更多种抗原可以在同一切片，同一时间内被显示出来，可用于（1）细胞标记；（2）免疫荧光筛选干细胞。实验方法原理通过使用激发波长及发射波长均不相间的荧光染料而进行的。通常限用两种荧光染料，最常见的是罗丹明（绿光激发，发射红光）和荧光素（蓝光激发、发绿光）联合使用。实验材料
石蜡切片组织有横向裂纹是怎么回事
组织的形态不是很清晰，可能没有固定好。 建议： 1、取材要快，离体5分钟内修整好组织块，放入固定液，越快越好，减少组织自溶； 2、组织固定时体积要小，不大于5mm； 3、固定液充分，固定液与组织的体积比10-20：1。 石蜡切片（paraffin section）组织学常规制片技术中最
冰冻切片实验技巧（四）：脂肪组织的处理
脂肪组织无疑是冰冻切片者的绊脚石，道理很简单脂肪不会结冰，把温度降低让脂肪变硬可以切出较薄的片子，但是这个温度对同一组织中的其他成分来说显得太低而不合适切片，当脂肪破碎影响切片时这个问题就变得明显，下面是一些我的经验总结。1.尽可能的削掉不需要的脂肪组织当我准备切淋巴结时，我会先检查一遍，小心翼翼地
脑组织冰冻切片的步骤和注意事项
1.固定。大鼠或小鼠灌注取脑，取脑后用多聚甲醛浸泡固定，即能达到冲洗的目的，又不损害组织。2.脱水。先后用15%，20%，30%的PB蔗糖溶液 进行脑组织梯度脱水，脑组织沉下去就是脱水好了。3.冰冻切片，推荐瑞沃德冷冻切片机。取出脑组织，用OCT胶包埋，一层层的包埋，注意:不能有气泡，否则营销切片；
石蜡组织切片的保存方法和注意事项
许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下，而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。一些研究发现，切片在室温下保存3个月以上，免疫组化染色结果会出现减弱，甚至阴性。因此，有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片，共110片，常温空气中放置1个月