为何实际检测到的WB条带与预期的有所区别？
WB是根据蛋白质的大小来分离蛋白的，通常小分子量蛋白在凝胶中的迁移速度要快。但是迁移率也是受到其他因素影响的，这就造成了实际检测到的条带与预期条带的不一致。主要有以下几种常见因素：翻译后修饰－比如磷酸化、糖基化等，这些修饰会增加蛋白质的分子量翻译后剪切－ 比如很多蛋白是以前体蛋白的形式合成的，在执行功能时需要进行剪切成活化的形式，如pro-caspases不同剪切体 – 有些来源于同一基因的蛋白有不同的剪切方式，每个剪切方式得到的蛋白大小都是不同的相对电荷（Relative charge） – 氨基酸的组成(charged vs non-charged)多聚体－如二聚体或三聚体。这些多聚体的形式通常会抵制WB时所做的还原条件，因此造成检测的条带偏大。......阅读全文
为什么wb做出来目的条带有两条
估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且，你也可以查查目的蛋白的相关资料，看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式，也有可能是这种情况导致的。
wb内参可以跑出来，目的基因条带却没有
很正常。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。1.目的蛋白是否表达量很低，因为内参表达是很高的。2.抗体的选择是否有问题，有没有阳性对照？？ 是一点都没有？还是能看到一点点？
你的－WB－内参选对了么？
你的 WB 内参选对了么？ 关键词： 科研 WB 内参 2019-08-14 17:00 来源：CST 点击次数：19 要想底气十足地秀
为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测..
为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到？人血浆中的蛋白是有上万种的，而一般质谱只能检测到五六百种，也就是说只占了其中的百分之几，这是普遍现象，说明咱们的方法是不存在问题的；其次，ELISA/WB与质谱相对来说灵敏度不一样，前者具有放大效应，因为其间会用到相应的抗体，所以
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
Western－Blot（WB）实验最后显色过程中总是没有条带
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。
材料粘度一致为何实际应用效果不同？
某些油墨行业的客户反馈，用粘度计测试样品的粘度时，测试结果显示两样品粘度相差不大，但实际在生产工艺上使用时，喷涂量就差别很大，是粘度测试不准？针对以上问题，我们要引入两个概念：牛顿流体和非牛顿流体，牛顿流体不受剪切率（与转速有关）的改变而改变，而非牛顿流体就比较复杂，不同的剪切率下有不同的粘度值，甚
RTPCR－与WB结果的变化趋势相反
RT-PCR 与WB结果的变化趋势并不总是一致的,可以从以下几个方面来解释：1、基因的表达分为转录和翻译两个层面，即mRNA水平和蛋白水平。而真核基因表达的转录和翻译发生的时间和位点存在时空间隔；2、在转录后，又会有转录后加工，转录产物的降解，翻译，翻译后加工及修饰好几个层面。所以转录水平和翻译水平
WB－条带大小和蛋白预测八字不合？先检查这－5－点！
实验室玄学千千万，预测和结果不符占一半。WB 实验是各位艾粉们，时常光顾的一个实验。但就是这样一个初级又常用的实验，却会出现各种稀奇古怪的问题。比如在 WB 实验鉴定蛋白时，我们得到的蛋白质条带大小常常会和预测值有所偏差。这是身患「强迫症」的艾粉们不能忍的。如果是实验出错或者预测不准这种情况，小艾是
凝胶电泳图谱为何纯化后还有多个条带
可能是没纯化好，或者实验过程中，蛋白质被氧化了SDS使寡聚体蛋白解聚，实际测定出来的相对分子质量，只是代表寡聚体蛋白的亚基分子质量。如血红蛋白有两条带……血红蛋白是由两个α-亚基和两个β-亚基组成的一种四聚体。
检测蛋白用WB实验还是ELISA实验好它们有什么区别
检测蛋白的实验有很多种,WB实验和ELISA实验是比较常用的两种实验方法,这两种方法哪一种的实验结果更为可靠呢?有些人说ELISA自己包被抗体的话会比较麻烦，WB相比更加科学，容易被杂志接纳。但是血清中没有内参可以选择。是不是ELISA实验操作要简单很多，那么又如何来解决这样的一个问题呢？今天上
盐雾试验与实际情况的关系
一、盐雾的腐蚀 腐蚀是材料或其性能在环境的作用下引起的破坏或变质。大多数的腐蚀发生在大气环境中，大气中含有氧气、湿度、温度变化和污染物等腐蚀成分和腐蚀因素。盐雾腐蚀就是一种常见和最有破坏性的大气腐蚀。这里讲的盐雾是指氯化物的大气，它的主要腐蚀成分是海洋中的氯化物盐——氯化钠，它主要
紫外分析仪的实际应用与范围
紫外分析仪的实际应用范围一般有：1.在科学实验工作中检测，紫外分析仪可以对科学实验工作中的许多物质如蛋白质、核苷酸等进行鉴别分析。2.在药物生产和研究中，紫外分析仪可以用来检查生物碱、维生素等各种能产生萤光药品质量的物质。并且紫外分析仪特别适宜作薄层分析、纸层分析斑点和检测。3.在染料涂料橡胶、石油
同一个基因的琼脂糖电泳条带为何层次不齐
同一个基因的琼脂糖电泳条带为何层次不齐，高高低低你跑的是PCR扩增后的电泳鉴定吗?如果是的,那么要看你扩增所用的引物是否为特异性的,如果是特异性的引物,那么理论上应该是一条主带；如果是兼并引物或者是随机引物,那么有可能扩增到无数条带（原因是引物特异性不强,可以在很多序列位置上结合扩增）.
WB实验的那些事儿
1.二抗需和一抗宿主的物种相同（如一抗来自兔，二抗为抗兔抗体）。原因： 一抗和二抗不匹配。2.参照说明书，设置阳性对照。原因：一抗不识别检测物种蛋白。3.每泳道蛋白上样量不低于20~30μg，设置阳性对照。原因：抗原量不足。4.使用可逆染色剂如丽春红S检测转膜效果，检测转膜操作是否正确。PVDF膜预
天平与砝码的调修在实际中的应用
天平与砝码的调修在实际中的应用质量计量的发展是人类社会发展的结果，zui早出现在什么时间尚未没有明确的说法。目前，只知道zui新zui早的质量计量器具是天平。而砝码早在1889年就选定了铂铱合金圆柱体，要求成分是90%铂，10%铱直径和高均为39mm的圆柱体，作为国际原器。质量计量是整个计量工作的一
酶与酶技术以实际应用
面对日益严峻的全球化环境污染问题，环境工程技术与生物技术的结合发展，为环境保护污染治理提供了新的技术手段。传统的污染治理方法存在着诸多的自身缺陷。主要表现在：处理效率低下、占地广、浪费土地资源和能源、处理成本高、效果不尽理想、容易产生新废弃副产物，甚至产生新的污染源。所以以环境生物技术为新技术体系解
电磁流量计的实际优势与改进空间
电磁流量计的应用非常广泛，而且在管道里也有所应用。其实电磁流量计本身就有所优势，当然随着时代的发展，也会有很大的发展空间。 保持流动 对水和废水的关注之一是准确地测量流量并知道问题何时何地发生，同时还要确保添加适量的氯以杀死有害细菌。电磁流量计在这里非常适合跟踪通过管道的流量的任务。 电磁
艾滋病补充试验的简单介绍
HIV检测的初筛结果如果为阳性，按照规范的检测流程，将进入到HIV的补充试验，做进一步的检测。下面就艾滋病的主要的补充试验，做一个浅显的介绍。 一、何谓补充试验 在《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）中，如筛查结果为阳性
Biosensis肌萎缩侧索硬化（ALS）研究相关抗体的应用
众所周知，霍金因患“渐冻症”，被禁锢在轮椅上，他却身残志坚，克服了残废之患而成为国际物理界的巨星。他不能写，甚至口齿不清，但他超越了相对论、量子力学、大爆炸等理论而迈入创造宇宙的“几何之舞”——无边界条件。尽管他那么无助地坐在轮椅上，他的思想却使人们遨游到广袤的时空，解开了宇宙之谜
WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系
分子量越大转膜时间越长，60KD转膜可以用300毫安恒流100min，20KD的话一个小时足够了，胶越厚越不容易转完全，不建议用1.5的胶。
电泳条带的宽度亮度与什么成正相关
扩增产物大小。电泳条带指的是用途为分析各种物质的成分和含量的工具，分析对象为氨基酸、多肽、核苷酸等。电泳条带的宽度和大小有关系，而它的亮度与扩增产物的增加有关系，导致变明或变暗。因此电泳条带的宽度，亮度与扩增产物大小呈正相关。亮度是指画面的明亮程度，是指发光体光强与光源面积之比，定义为该光源单位的亮
免疫印迹（Wb)的原理
(1)是一种蛋白质测定的技术,集合凝胶电泳的高分辨率,固定免疫测定的敏感及特异性和不需要对靶蛋白进行放射性核素标记,在固相膜上保持的时间很长等优点。(2)可以在样本中检测到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗体中检测到单克隆抗体,还可以对已经转移到固相膜上面的蛋白质进行连续的分析。
wb实验的原理和步骤
WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质（例如PVDF膜）上。再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与相对应的第一抗体特异性结合，之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合，最终通过底物显色或放射自显影来检测特异性目的基因表达的蛋白成分。
RTPCR、Western－blot和ELISA三者的区别
PCR是从转录水平上检测目的基因,而非蛋白,从转录到翻译还有复杂的过程,因此基因的表达量与蛋白的表达量不一定是正相关的.WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说你可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响基因翻译蛋白质, PCR可以检测基因的表
食品中快检与定量检测的区别
食品中快检与定量检测的区别是快速检测可以做到对样品的快速筛查，能有效解决样品运输保管难、储存难的问题， 定量检测主要在实验室开展，是使用大型分析仪器和国标规定的方法对农产品质量安全进行精准检测。快速检测可以及时得到检测结果，降低检测费用。快速检测也存在一些不足，主要是灵敏度低，容易出现假阳性，从而造
食品中快检与定量检测的区别
食品中快检与定量检测的区别是快速检测可以做到对样品的快速筛查，能有效解决样品运输保管难、储存难的问题， 定量检测主要在实验室开展，是使用大型分析仪器和国标规定的方法对农产品质量安全进行精准检测。快速检测可以及时得到检测结果，降低检测费用。快速检测也存在一些不足，主要是灵敏度低，容易出现假阳性，从而造
琼脂糖电泳时，条带为何在点样孔中跑不出来
1）可能条带中（目的DNA）掺有基因组DNA（因基因组DNA分子量很大，不能从上样孔中出来）2）可能条带中（目的DNA）掺有蛋白质（因蛋白质与DNA一起，分子量很大，不能从上样孔中出来）总之，你目的DNA提取、分离的不纯，掺有基因组DNA或没有和蛋白质分离开，因此导致分子量大大加大，跑不出上样孔还有