为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测..

为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到?人血浆中的蛋白是有上万种的,而一般质谱只能检测到五六百种,也就是说只占了其中的百分之几,这是普遍现象,说明咱们的方法是不存在问题的;其次,ELISA/WB与质谱相对来说灵敏度不一样,前者具有放大效应,因为其间会用到相应的抗体,所以只要选对抗体,感兴趣的蛋白基本都会被检测到;因此, ELISA/WB检测到的蛋白在组学中没有被检测到也是正常的。 ......阅读全文

为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测..

为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到?人血浆中的蛋白是有上万种的,而一般质谱只能检测到五六百种,也就是说只占了其中的百分之几,这是普遍现象,说明咱们的方法是不存在问题的;其次,ELISA/WB与质谱相对来说灵敏度不一样,前者具有放大效应,因为其间会用到相应的抗体,所以

为什么有些目的蛋白-WB-很难检测到目标条带?

很多时候检测不到目的条带的问题竟都是出在样本制备这一步。质粒有没有转染到细胞中去,转进去后有无表达,表达量是否足以用 WB 检测,目的蛋白是否容易降解?想要得到最佳实验结果,了解清楚这些问题比一遍一遍优化和改进 WB 操作本身更为重要。相信若非首次接触 WB 实验的科研同行,每人都应有一套成熟的实验

蛋白质组学相关问题与解答

  1.为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到?    人血浆中的蛋白是有上万种的,而一般质谱只能检测到五六百种,也就是说只占了其中的百分之几,这是普遍现象,说明咱们的方法是不存在问题的;其次,ELISA/WB与质谱相对来说灵敏度不一样,前者具有放大效应,因为其间会用

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?     要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子

细胞提取液中没有检测到目的蛋白原因分析

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(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。

进口内参抗体:在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗

进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子

免疫方向研究思路

在“蛋白组学在临床科研中的应用”这一系列的文章中,我们分享了眼科、内分泌、心血管、神经等方面的研究思路。今天我们来介绍一个非常重要的,并且离不开蛋白质组学研究的一个学科——免疫方向的科研套路,哦不,是思路。话不多说,满满干货! 第一篇,      强直性脊椎炎杂志:Cts-Clin Transl S

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Western-Blot(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。

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