10mg／ml牛血清蛋白(BSA）配制方法
加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。......阅读全文
酵母遗传学方法4：质粒DNA的羟基突变
质粒DNA的羟基突变1．临用之前制备羟胺溶液，置冰上待用。2．将用氯化铯纯化的10μg质粒DNA加到含500μl羟胺溶液的微型离心管。3．在37℃下培养20小时。4．加入10μl的5mol/L NaCl、50μg 1mg/ml的牛血清蛋白（BSA）和1ml无水乙醇终止反应，置－70℃沉淀DNA10分
考马斯亮兰法的实验试剂与器材
试剂：（1）标准蛋白质溶液，用 g—球蛋白或牛血清白蛋白(BSA)，配制成1.0mg/ml和0.1mg/ml的标准蛋白质溶液。（2）考马斯亮兰G—250染料试剂：称100mg考马斯亮兰G—250，溶于50ml 95%的乙醇后，再加入120ml 85%的磷酸，用水稀释至1升。器材：（1）可见光分光光度
如何准确测定样品中蛋白质的含量
5种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。二、双缩脲法（biuret法） 1、实验原理双缩脲是两个分子脲经180
如何准确测定样品中蛋白质的含量
5种方法测定蛋白质含量一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。二、双缩脲法（biuret法） 1、实验原理双缩脲是两个分子脲经180
考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度试剂与器材
试剂：（1）标准蛋白质溶液，用 g―球蛋白或牛血清清蛋白(BSA)，配制成1.0mg/ml和0.1mg/ml的标准蛋白质溶液。（2）考马斯亮兰G―250染料试剂：称100mg考马斯亮兰G―250，溶于50ml 95%的乙醇后，再加入120ml 85%的磷酸，用水稀释至1升。2. 器材：（1）可见光分
elisa试剂盒试剂的配方配比说明
各种ELISA配置方法汇总如下：(1) ELISA实验包被缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(3) ELISA实验稀释液;(4)ELISA实验终止液(5)ELISA底物缓冲液(6)ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液（7）标准品稀释液。(1) ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05
植物体内可溶性蛋白质含量的测定:考马斯亮蓝G250染色法
【原理】 考马斯亮蓝G－250(GooMAssIe BrIllIAnT Blue G－250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G－250在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nM，后者在595nM。在一定蛋白质浓度范围内(1
植物体内可溶性蛋白质含量测定:考马斯亮蓝G－250染色法
【原理】 考马斯亮蓝G－250(GooMAssIe BrIllIAnT Blue G－250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G－250在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nM，后者在595nM。在一定蛋白质浓度范围内(
荧光原位杂交（FISH）之二：实验用具、材料及相关溶液...
实验用具及材料相关溶液的配制1）20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，加水至1000mL（用10mol/L NaOH调pH 至7.0）。2）去离子甲酰胺（DF）：将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min，用Whatman l号滤纸滤。3）体积分数70％
长白猪精原细胞的分离和纯化
实验方法原理酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质，采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。实验材料长白种系公猪
长白猪精原细胞的分离和纯化
实验方法原理 酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质，采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。 实验
长白猪精原细胞的分离和纯化
实验方法原理酶消化法制备2月龄未成熟长白猪睾丸组织的单细胞悬液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)连续梯度作为分离介质，采用重力沉降法并结合细胞贴壁培养的方法分离精原细胞。实验材料长白种系公猪试剂、试剂盒胶原酶胰蛋白酶脱氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培养基HE染液PBS仪
3分钟了解蛋白质含量测定考马斯
实验概要运用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。实验原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白质浓度范围内（0～100μg/ml），蛋白质－色素结合物在595
蛋白质定量/蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法)
实验概要运用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。实验原理考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白质浓度范围内（0～100μg/ml），蛋白质－色素结合物在595
测定蛋白质含量只有凯氏定氮法吗
当然不是一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so
蛋白质的定量测定方法
一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S
蛋白质的定量测定方法
一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S
MTT的配制方法
MTT一般最好现用现配，过滤后4oC避光保存两周内有效，或配制成5 mg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多，尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用
存在干扰物质条件下的蛋白质浓度测定实验
习惯上，蛋白质的浓度通常是按 Lowry 及其合作者（Lowry 等，1951) 的方法用 Folin-Ciocalteau 试剂进行测定的。但样品中的盐或去垢剂等对这种方法有干扰。Peterson(1977) 介绍了一种改进方法，可部分地解决这些问题。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱
抗原的抗原性（一）
自发现抗体后，用血清学方法在体外实验，证明了天然抗原与其相应抗体发生特异性结合，这是一个重要的免疫学现象，称这种特性为抗原的抗原性。在早期由于尚未建立对蛋白质抗原进行分析的方法，为研究抗原性的化学本质造成了困难。奥地利免疫化学家Landsteiner在本世纪20年代创建了人工结合抗原，并应
雌二醇检测实验
实验方法原理 采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定在硝酸纤维膜上的雌二醇结合物相结合，固定有雌二醇结合物的检测线处就显现明显的颜色。实验材料 雌二醇抗体试剂、试剂盒 氯金酸牛血清白蛋白卵清白蛋白兔抗鼠多抗雌二醇仪器、耗材 硝酸纤维膜玻璃纤维膜分光光度计低温高速离心机点膜机实验步骤 一
什么是牛血清白蛋白，他的作用、用途保存方法有哪些？
一、定义：牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一种球蛋白，包含607个氨基酸残基，分子量为66.446KDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。二、主要成分1、蛋白质是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞
由酶循环确定烟酰胺核苷酸实验——NADP（H）－的测定
烟酰胺核苷酸可以作为脱氢酶的底物被测定（特别是 LDH，ADH 作用于 NAD＋ 和 G6PDH 作用于 NADP＋），根据各自的吸收系数可以利用酶循环的方法在低浓度下被测定。实验方法原理为了测定 NADP（H），可以采用谷氨酸脱氢酶（GluDH）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH） 的偶联反应：
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直...2
三、器材与试剂： 1．器材： ①夹心式垂直板电泳槽，凝胶模（135×100×1.5mm）（北京六一仪器厂） ②直流稳压电源（电压300—600V，电流50—100mA） ③吸量管（1,5,10 ml） ④烧杯（25,50,100 ml） ⑤ 细长头的滴管 ⑥1ml注射器及6号长针头 ⑦微量注射器（1
从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验1
从人关节软骨中分离软骨祖细胞实验材料人关节软骨试剂、试剂盒胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶（0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白（BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBSC配制仪器、耗材尼龙膜40μm筛孔（“细胞
固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中...
本研究利用BCPDA进行固相TRF IA研究,它克服了解离增强体系需增强溶液、易受环境铕离子污染、只能液相测量等缺点,简化了测量步骤。结合BCPDA标记BSA,研究标记过程中的蛋白质含量测定。为TRF IA体系提供理论依据和实验技术 。材料和方法1 材料1. 1 仪器 分光光度计,核酸蛋白检测仪,
测定蛋白质含量的6种方法
一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S
T7RNA聚合酶的基本信息
T7RNA聚合酶具有高度启动子专一性，且只会转录T7噬菌体中位于T7启动子下游的的DNA或DNA复制品。此酶在合成RNA的过程中，需要DNA模板与镁离子（Mg2+）作为辅因子。牛血清蛋白（bovine serum albumin，BSA）及精胺（spermidine）对此酶具促进效果。与细菌的RNA