WB实战之抗体孵育
由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万--数十亿倍，所以当特异性抗体与非特异性'抗体'（不好描述，指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白，我们可以把它们看成非特异性的一抗）竞争时，尽管抗体稀释液中封闭蛋白的浓度是一抗浓度20K：1以上，在碰撞几率相同的条件下，由于时间的积累加孵育过程中反复漂洗（孵育抗体要摇晃，对吧），特异性一抗积累了识别、结合优势。 同样在TBST等漂洗的情况下，由于亲和力等原因，使得一抗很牢靠并进一步增加对比优势，再经过2抗特异性积累和ECL的最终放大形成特异性条带和非特异性背景之间荧光信号的巨大差异。 由以上碰撞结合、亲和力差异这些基本现象，我们可以解释WB中出现的现象。 1.在样品制备时， PBS漂洗目的时去除培养基中BSA。不漂洗的后果，是在BSA位置任何抗体都可以非特异性的结合从而显影。用碰撞的原理去解释：当杂带很浓的时候，抗体的特异性已经毫无意义，它只符合物理定律中的......阅读全文
wb中pvdf膜活化时间长有影响吗
有影响。用甲醇活化不能超过15秒，时间太久会对pvdf膜造成损伤。pvdf膜用甲醇泡的目的是为了活化pvdf膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合，做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目的。
胚囊的孕育过程
不同生物的囊胚细胞的运动过程的变化极大，但是脊椎动物都有一个共同的特点：在囊胚的表面形成一个开口，叫胚孔（blastopore），细胞通过胚孔移入到囊胚的内层。桑椹胚进一步发育，细胞开始出现分化，聚集在胚胎一侧，个体较大的细胞，称为内细胞团（inner cell mass，ICM），将来发育成胎儿的
囊胚的孕育过程
不同生物的囊胚细胞的运动过程的变化极大，但是脊椎动物都有一个共同的特点：在囊胚的表面形成一个开口，叫胚孔（blastopore），细胞通过胚孔移入到囊胚的内层。桑椹胚进一步发育，细胞开始出现分化，聚集在胚胎一侧，个体较大的细胞，称为内细胞团（inner cell mass，ICM），将来发育成胎儿的
IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IPWB实验的验...
IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IP-WB实验的验证方法免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在
WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系
分子量越大转膜时间越长，60KD转膜可以用300毫安恒流100min，20KD的话一个小时足够了，胶越厚越不容易转完全，不建议用1.5的胶。
一抗、二抗如何保存
工作液根据需要稀释在5%奶粉里，再加入少量叠氮化钠（大约0.01% w/v），4度保存。Alisa_lin(站内联系TA)分装，-20度保存。不要反复冻融，没有用过粉末的二抗，按说明书呗石头2011(站内联系TA)液体的一抗没加甘油的话尽量不要放在负二十，因为用的时候反复冻融不好。粉末状的二抗负二十
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。 而因为western blot的膜应该是完全覆盖SD
WB实验中9％和11.5％的分离胶凝固时间是否不同
时间上应该会略有不同。扩展知识：WB，蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting)，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫
青海：孕育世界锂电基地
2014中国·青海绿色发展投资贸易洽谈会暨首届环青海湖（国际）电动汽车挑战赛，6月10日—13日在青海举行。新能源，成为本届青洽会的突出主题。 已成功举办14届的青洽会，是推动青海发展、促进青海开放、宣传大美青海的重要平台和窗口。在本届“青洽会”上，青海依托丰富的锂资源，大力推广锂电池技术、风
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。 5%脱脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。 5%脱脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或
怎样稀释一抗和二抗
一抗的确比二抗贵，我们实验室1：500~1：1000稀释一抗体都可以，杂交袋尽量小，一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以
一抗/二抗该选谁？
我们在生活中经常会面临做选择这样的一个难题，其实做选择本身并不是多么困难的事情，关键在于您是否了解自己内心真正需要的是什么。就好比我们的实验者在选择产品的品牌、质量、规格等，根据这些信息再去做相关的判断。比如zui简单的一个例子，不少的伙伴都对一抗、二抗的选择方面甚是苦恼，那如何选择呢，技术教
AMCA荧光二抗？EarthOx新型DyLight－405荧光二抗
中英文品名品牌货号规格详情 山羊抗小鼠IgG二抗, 黄红色DyLight 549荧光标记 -DyLight 549 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG（H+L） EarthOx E032310 ￥200/100μl ￥800/500μl详情 山羊抗兔IgG二抗
二抗如何选择论一抗与二抗种属及类型区别
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般
如何选择二抗
二抗选择（1）种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化，WB二抗主要选择HRP，Biotin标记的二抗，而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗，如FITC、
二抗的选择
二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用， 二抗一般连接荧光素FITC或发光团。
ELISA如何选一抗与二抗
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般
一抗和二抗用什么稀释
一抗的确比二抗贵，我们实验室1：500~1：1000稀释一抗体都可以，杂交袋尽量小，一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以
孕育“龙芯”的478个日夜
■本报记者 赵广立“八五”“九五”期间，我国连续10年没有部署通用处理器（CPU）研制项目。于1999年底出任中国科学院计算技术研究所（以下简称计算所）所长的李国杰，为此心急如焚。“错过这5年，以后就没机会了！”李国杰到处奔走呼吁：“十五”期间要花大力气做通用处理器。通用处理器是芯片中的“珠穆朗玛峰
如何避免IP检测过程中的重链干扰与轻链干扰？
免疫沉淀 (Immunoprecipitation，IP) 是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与ProteinA/G偶联的agarose或Sepharose珠子孵育，通过离心得到珠子-蛋白A/G-抗体-目的蛋白复合物，沉淀经过洗涤
做WB时SDSPAGE胶凝固后多长时间上样最好
配胶时，建议浓缩胶室温凝固20-30分钟后，再加分离胶，室温凝固2-3小时后再用效果佳，如果当天配完不用，需塑料薄膜手套之类的将其包好，放置 4°冰箱过夜，第二天即用，不建议时间过长使用！
为什么一抗可以回收二抗不能
因为一抗我们是用BSA加叠氮钠稀释的，要回收，一般只要不长细菌就一直用，但是中间要补一些抗体，不然太稀了曝不出来，二抗是用脱脂奶粉稀释的，不回收。
抗HBs弱阳性，是抗HBs存在时间短，还是强度弱？
安哲 西安交通大学第二附属医院 严谨的说是：抗HBs水平越低机体内抗HBs的持续存在时间越短。不直接说抗HBs弱阳性，是因为抗HBs弱阳性可能是抗HBs低水平，但不都是低水平，也存在抗HBs假阳性。也不说抵抗能力强弱，是因为抗HBs是评价保护能力或免疫抵抗力持续时间的一个有效且实用的指标，但不全面
一抗孵育时间，不能超过多久
回答 一抗的孵育时间与温度、抗体浓度有关。一般情况下，在37°C的条件下，孵育1-2小时左右。在室温的条件下，孵育3小时左右。在4°C的条件下，孵育18-24小时左右。如果一抗的浓度过高或者是孵育时间过长，会导致非特异性吸附，增加洗涤的难度，最终因洗涤不彻底而出现非
一抗孵育时间，不能超过多久
回答 一抗的孵育时间与温度、抗体浓度有关。一般情况下，在37°C的条件下，孵育1-2小时左右。在室温的条件下，孵育3小时左右。在4°C的条件下，孵育18-24小时左右。如果一抗的浓度过高或者是孵育时间过长，会导致非特异性吸附，增加洗涤的难度，最终因洗涤不彻底而出现非
戊二醛消毒灭菌时间
用戊二醛消毒需要浸泡10个小时以上，这样才能达到消毒灭菌的效果。戊二醛不需要频繁使用，每周使用一次就可以，戊二醛消毒有刺激性，会给眼睛以及喉咙带来危害性，在使用过程中，记得戴上口罩和眼镜。在使用戊二醛杀毒的过程中，只有浸泡这一种方法，戊二醛的用量不需要太多，倒入2%的戊二醛即可，然后将需要杀菌的物品
WB中为什么封闭还有一抗孵育过夜时都要在四度冰箱
一抗在4度下最好放保存
青海正储备力量孕育锂电基地
碳酸锂是制备锂电池正极材料的必需原料，国内碳酸锂年市场容量约10万吨。青海锂资源储量占全球的三分之一，占全国的三分之二，但受技术限制，青海的锂资源一直无法开发。 “在以新能源、新材料为代表的第四次产业革命浪潮中，动力及储能电池这一新兴产业将面临增长的爆发期，特别是主要应用于电动汽车的动力电池