全血基因组提取操作步骤
操作步骤((200ul全血))* 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇! 1. 取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入1.5ml离心管。对如果全血起始量小于200μl,则用缓冲液BB补足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之间,则后续操作需要按照比例增加试剂用量。如果起始量介于300μl-1毫升之间,则需要先进行红细胞裂解操作(见本说明书后附录)。2. 加入200μl 结合液CB,立刻剧烈颠倒轻摇,充分混匀,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,颠倒轻摇充分混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮(但颜色偏黑色)。3. 加入100μl 异丙醇,剧烈颠倒轻摇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。上述各操作步骤中适当力度充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀,但不可用手剧烈振荡,以免剪切DNA。4. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都......阅读全文
全血锰的注意事项
(1) 孕妇血清锰测定可升高。 (2) 锰在体内的分布,一般认为发锰含量较稳定,比血锰、尿锰更能反映人体内的水平,其含量发尖部多于发根部,且与头发颜色有关,通常黑发含锰量>黄色>白色。参考值1.2-2.1μg/g。
全血铬的注意事项
(1) 本法的特点是采用了平台石墨炉原子化技术,积分吸光度,样品和铬标准液用含磷酸二氢胺、Triton-X 100和硝酸的基体改进剂稀释,以及简单的连续背景校正,这些都是稳定温度平台石墨炉(STPF)技术的基本条件。方法学评价结果:最低检测限约5μg/L(0.025μmol/L),精密度:批内C
全血乳酸测定的临床应用
乳 酸 测 定 乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳,肌肉,脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。 乳酸酸中毒 相乳酸升高最常见于乳酸酸中毒,但也可与呼吸性碱中毒关联
怎么做全血质控图?
近年来,高科技术在医疗领域的渗透和应用,使得血红胞分析仪得到了迅猛的发展,血细胞分析仪由于其操作简便、测定快捷,计数结果准确度高、精密性好,已逐渐取代传统的手工操作方法,成为各大、中型医院临床实验室的主要检测手段。由于不同的血细胞分析仪生产厂家各自使用的测定原理和方法不尽相同,使得其测定结果及参考范
全血乳酸测定的临床应用
序 言 John Toffaletti博士:纽约杜克大学医学中心血气室主任,血气研究领域久负盛名,发表了一篇题为“全血乳酸浓度的测定及重要临床意义” 的综述,该文章从乳酸的定义、检测的意义、临床应用及样品分析前处理细节做了一个非常好的概述…… 乳 酸 测 定 乳酸是糖无氧氧
全血锰的临床意义
升高:锰中毒、缺血性心脏病、心肌梗死、急慢性肝炎、坏死性肝硬化、风湿性关节炎、日光过敏症等。
全血乳酸测定的临床应用
序 言 John Toffaletti博士:纽约杜克大学医学中心血气室主任,血气研究领域久负盛名,发表了一篇题为“全血乳酸浓度的测定及重要临床意义” 的综述,该文章从乳酸的定义、检测的意义、临床应用及样品分析前处理细节做了一个非常好的概述…… 乳 酸 测 定 乳酸是糖无
血RNA快速提取的操作步骤
操作步骤:提示:(1) 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!(2) 使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X。(3) 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μlβ-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT
人类全基因组测序计划
全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。 1986年, Renato Dulbecco是Z早提出人类基因组测序的科学家之一。他认为如果能够知道所有人类基因的序列,对癌症的研究将会很有帮助。美国能源部(DOE)与美国国家卫生研究院(NIH),分别在1986年与1987年加入人类基
虎尾海马全基因组破译
中科院南海海洋研究所、德国康斯坦茨大学、华大基因和新加坡A*STAR研究院联合破译了虎尾海马的全基因组。有关研究成果日前以封面文章的形式发表在《自然》杂志上。 海马隶属于海龙科。与其他硬骨鱼不同,海马呈现高度特殊的形态,例如头部前方具有管状长嘴,无腹鳍和尾鳍,尾端卷曲,全身覆盖硬骨骼,没有鳞片
全基因组扩增技术介绍
研究人员通常会在下游分析中遭遇DNA样本量有限或不足的问题。QIAGEN的全基因组扩增技术通过以包括单细胞在内的小量样本或珍贵样本扩增获得基因组DNA,解决此类难题。REPLI-g Kit能够准确地复制原始DNA样本,不会造成偏差,扩增后的DNA可以直接应用于广泛的遗传学分析。什么是全基因组扩增(w
细菌基因组DNA提取实验
细菌基因组DNA提取可应用于:(1)获得细菌基因组DNA;(2)作为PCR模板;(3)用于测序、遗传信息分析等。实验方法原理本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DN
细菌基因组DNA提取实验
实验方法原理 本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD
细菌基因组DNA提取实验
实验方法原理 本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0×109 细菌中获得多至20 μg 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。实验材料 细菌培养物
球虫卵囊基因组提取
实验概要卵囊基因组的提取是在基因层面研究球虫生理活动功能的前提。主要试剂2×CTAB 溶液配制:10ml 1M Tris-HCl(pH7.5或8.0)2g CTAB28ml 5M NaCl4ml 0.5M EDTA(pH 7.5 或8.0)1g亚硫酸氢钠加双蒸水至100ml实验步骤1. 先将卵囊
拟南芥基因组DNA的提取
实验概要本实验介绍了用CTAB法提取拟南芥基因组DNA。主要试剂CTAB提取液(2%CTAB,50mMEDTA,50mM Tris-HCl,PH 8.0,0.84M NaCI,0.05%巯基乙醇),氯仿,无水酒精,70%的酒精主要设备1.5 mL离心管,65℃水浴锅,高速离心机,研钵实验材料拟南芥叶
关于土壤基因组DNA提取
土壤样品含有大量的微生物,其中绝大部分的微生物都是无法直接培养进行繁殖和研究。从土壤样品中提取 DNA 是研究土壤微生物zui为有效的方法。目前从土壤样品中提取微生物 DNA 的方法主要有直接法和间接法。直接法是指把土壤样品放在裂解液中,经过有效的破壁方法使微生物的DNA 全部释放到裂解液中,然后再
植物基因组提取(CATB法)
一、实验目的 掌握植物总DNA的抽提方法和基本原理。学习根据不同的植物和实验要求设计和改良植物总DNA抽提方法。 二、实验原理 通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)
人末梢血微量全血培养染色体显示法
实验概要 人末梢血微量全血培养染色体显示法实验步骤1.培养液准备:取15ml培养瓶数个,每瓶内分别充入5ml培养液(pH 7.2),内含:1640培养液(含10%~15%小牛血清),PHA 0.1ml,青霉素100单位和链霉素100微克/毫升 培养液2.抽血针管准备:取2~5ml针管一
怎么分辨正常的全血和溶血后的血
溶血指血中红细胞被破坏.只要将血液离心后,分离的血清正常时候为淡黄色,如果血清出现淡红色或者红色,就说明血液已经发生溶血了.也就不能进行正常的检验了. 发生溶血有很多因素影响,有的是因为疾病本身,有的是因为人为操作.比如:抽血时特别是用注射器时没有取下针头直接打入试管或者没有沿管壁慢慢注入试管;也可
全基因组的比较基因组杂交技术介绍
Whole-Genome and Custom Fine-Tiling Array CGHComparative Genomic Hybridization (CGH) measures DNA copy number differences between a reference genome a
血液的化学检验项目全血黏度
全血黏度介绍: 全血黏度指血液流动时,邻近两层平行流体层互相位移时的摩擦而形成的阻力。全血黏度是血清黏度、血细胞比容、红细胞变形性和聚集能力、血小板和白细胞流变特性的综合表现。另外,血黏度还受血液理化性质(如温度、酸碱度、血浆渗透压等)、血管因素等影响。血黏度还与血流灌流量有关,因此全血黏度又有高
临床化学检查方法介绍全血铁
全血铁介绍: 铁是必需元素,原子式亚铁原子为Fe2+,正铁原子Fe2+,原子量为55.84。正常成人体内铁总量为71.63-89.54mmol/L,其中2/3左右有生理活性,1/3为贮存铁。全血铁正常值: 男:788-1003μmol/L (44-56mg/dl); 女:752-859μmol
全血葡萄糖7.42正常吗
全血葡萄糖正常值如下:(1) 空腹:① 邻甲苯胺法(O-TB): 3.89-6.11mmol/L。 ② 葡萄糖氧化酶法(GOD):3.89-6.11mmol/L。 ③ 分光光度法(AAS): 3.88-5.8 mmol/L。 ④ 自动生化仪: 3.89-6.11mmol/L。 (2) 进食后2h:
临床化学检查方法介绍全血黏度
全血黏度介绍: 全血黏度指血液流动时,邻近两层平行流体层互相位移时的摩擦而形成的阻力。全血黏度是血清黏度、血细胞比容、红细胞变形性和聚集能力、血小板和白细胞流变特性的综合表现。另外,血黏度还受血液理化性质(如温度、酸碱度、血浆渗透压等)、血管因素等影响。血黏度还与血流灌流量有关,因此全血黏度又有高
全血、血浆和血清有何区别?
血液经抗凝处理后的全部血液为全血;离心除去血细胞后所得到的淡黄色液体为血浆。如血液不经抗凝处理,让他自行凝固,则在抽血后的一段时间内,血液会自动在一系列凝血因子的作用下发生凝集,血液首先凝固成一个整体,再经过一段时间或用离心机离心,血液中凝固的部分会与一些清澈淡黄色的液体分离开,这些液体称为血清。血
全血乳酸测定的检查过程
精密称取供试品1g,精密加水50mL,再精密加入氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL,煮沸5分钟,加酚酞指示液2滴,趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定,至溶液显粉红色,并将滴定的结果用空白试验校正,记录消耗硫酸滴定液的体积数(mL),每1mL氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于90.
临床化学检查方法介绍全血铅
全血铅介绍: 铅(plumbum,Pb),原子量207.19,银灰色软金属。比重11.35(20℃),熔点327.4℃,沸点1620℃。化合价2和4。不溶于水、稀盐酸和硫酸。可溶于硝酸、醋酸和碱液。加热到400-500℃时,即产生大量蒸气。铅蒸气在空气中迅速氧化成氧化铅(Pb2O)。常见的无机铅化
全血乳酸测定的注意事项
检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。血乳酸测定时取样时间非常重要,安静值应在早晨起床前安静时采样;运动后血乳酸的测定应根据不同
全血检测和血清检测有不同
关于全血和血清检测,只要判定结果时间不超过30分钟,两者无差别。为什么呢?因为样品在醋酸纤维薄膜上层析的过程中,血液中的各组分扩散速度不一,当血清中的HIV抗体到达检测区,并使区带显红色时,血浆中的血红蛋白还没有到达检测区,这时(30分钟内)判定结果,没有什么问题。超过30分钟,本身带红色的血红蛋白