电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基...(一)

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基因编辑效应 2006年,日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)教授利用逆转录病毒将4个转录因子转入成体细胞,将其转变为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。从此后,诱导多潜能干细胞研究领域取得了极大进步,被用于研究人类疾病,目前已经有多项研究进入到临床实验阶段。CRISPR/Cas9基因编辑系统已成为目前最常使用的基因编辑工具,在基因组中生成靶向DNA双链断裂(Double strand breaks, DSBs),再通过内源性细胞DNA DSB修复途径进行修复。将CRISPR技术与iPSC技术结合,将模拟疾病发生的突变引入iPSC,或修复iPSC疾病模型中的突变, 再分化得到所需要的特定细胞进行研究或疾病治疗,是目前iPSC研究和转化领域的热点。 目前,基于CR......阅读全文

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基...(一)

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基因编辑效应 2006年,日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)教授利用逆转录病毒将4个转录因子转入成体细胞,将其转变为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。从此后,

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基...(三)

研究人员发现,NHEJ抑制剂NU7441和SCR7分别提高了iPS细胞中HDR效率,联合使用时,进一步提高了HDR效率。DNA-PKcs在DSB形成后被特异性激活,并募集NHEJ途径的蛋白组分,包括可连接DNA末端的DNA连接酶IV。作者怀疑利用NU7441抑制DNA-PKcs可能会绕过NHEJ复杂

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基...(二)

5个基因座(KCNH2 N588D/N588K, APRT M136T, HES7 R25W and PSMB8 G201V)上,在XL+N+S处理下32个克隆中获得18-23个具有HDR等位基因(56%-72% 总HDR效率)。与N+S联用时,XL413引起的细胞周期停滞对HDR率的影响强

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基因编辑...

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基因编辑效应 2006年,日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)教授利用逆转录病毒将4个转录因子转入成体细胞,将其转变为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。从此后,

电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:-协同基因编辑效应

  2006年,日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)教授利用逆转录病毒将4个转录因子转入成体细胞,将其转变为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。从此后,诱导多潜能干细胞研究领域取得了极大进步,被用于研究人类疾病,目前已经有多项研

CRISPR-实验利器:BTX-电转仪

什么是 CRISPR?CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats), 是细菌中用于与病毒进行斗争的免疫武器。 生命进化历史上,细菌为了将病毒的外来入侵基因清除,进化出 CRISPR 系统,利用这个系统,细菌可以不动

首次完成CRISPR体内编辑骨髓细胞

  前沿 | 诺奖得主创建公司再获突破:  Intellia Therapeutics是由2020年诺贝尔化学奖得主Jennifer Doudna博士联合创建的生物技术公司,致力于利用CRISPR基因编辑技术,通过在体内和体外进行基因编辑开发创新疗法。去年11月,该公司的在研基因编辑疗法NTLA-2

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(一)

1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西?     细胞系和细胞类型     细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等     细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn,  Rice, Tomato

首次利用明星技术CRISPR编辑人血管细胞

  来自耶鲁大学医学院的研究人员利用近年来备受瞩目的CRISPR/Cas9系统基因改造了我们人体内的内皮细胞,这些细胞构成了血管内壁,具有吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织的作用,还参与集体免疫活动。  这一研究成果公布在5月4日的Circulation Research杂志上。  血管内皮细胞通常指

CRISPR编辑人类胚胎有效性首次获证

  广州医科大学附属第三医院生殖医学中心刘见桥主任3月16日接受科技日报记者采访时表示,他们课题组首次用CRISPR-Cas9基因编辑技术对6个可移植人类胚胎进行基因编辑,成功修复了其中3个胚胎内的遗传变异。新研究不仅推翻了之前CRISPR技术不能有效编辑人类胚胎的结论,更让人类向“设计”出不会患某

学者首次发现CRISPR的新编辑作用:非分裂细胞基因编辑

  Salk研究院,广州医科大学等处的研究人员第一次发现基因编辑技术可以在非分裂细胞靶定位置上插入DNA,这种技术被证明可以部分恢复失明啮齿类动物的视觉反应,这将为基础研究和许多临床治疗,如针对视网膜、心脏和神经系统的疾病打开了一扇新的窗口。  这一研究成果公布在11月16日的Nature杂志上,文

CRISPR临床新进展!美国将首次进行CRISPR体内临床研究!

  患者将参加首项研究,测试一种名为CRISPR的基因编辑技术在体内的效果,该研究旨在治愈遗传性失明。患有这种疾病的人拥有正常的眼睛,但缺少一种可以将光线转换成信号、传递给大脑、使其能够看见东西的基因。  这项实验治疗的目的是为孩子和成人提供他们缺乏的健康版本的基因,使用一种工具来切割或"编辑"特定

全新CRISPR/Cas9基因编辑系统助力肝癌建模

  最近发表在开放获取期刊《Genome Medicine》上的一项研究,报道了一种建立肝癌小鼠模型的新方法,即利用CRISPR/Cas9系统快速将癌症相关基因敲入小鼠的DNA中。  研究的通讯作者、麻省大学医学院RNA疗法研究所的王文说:“为了更好地理解肿瘤生物学、开展临床前研究以及为病人找到潜在

BEX电转化仪高效转染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因编辑

BEX电转化仪高效转染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因编辑摘要近期,CRISPR/Cas9系统被广泛地应用于突变体小鼠的构建,但是借助于微注射方法很大程度上限制了基因编辑于高通量上的应用。这篇文章中,我们阐述了一个简单,高效,大规模的基因编辑方法:即借助于电转染将RNAs转入卵,而不是通过

Nature:CRISPR基因编辑技术助力破解重要生物学谜题

  鱼类的后代变成可以在陆地上行走的动物必须发生的一个重大转变就是,要用手指和脚趾来替代长长的鳍条(fin rays)。在8月17日的《自然》(Nature)杂志上,来自芝加哥大学的科学家们证实,在鱼类中构成鳍条的细胞也在四条腿动物手指和脚趾的形成过程中发挥重要作用。  采用新型的基因编辑技术和敏感

基因编辑crispr原理

ZFNZFN,即锌指核糖核酸酶,由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成(一般 3~4 个),每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族(transcription fa

基因编辑crispr原理

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基因编辑crispr原理

ZFNZFN,即锌指核糖核酸酶,由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由一系列 Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成(一般 3~4 个),每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基。锌指蛋白源自转录调控因子家族(transcription fa

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?

1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西? 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato,Tr

新型编辑酶:“CRISPR工具箱”又一利器

  英国《自然》杂志近日发表了一项遗传学最新研究:美国加州大学伯克利分校科学家报告了一种能调控人类基因组的新型酶CasX,其编辑功能与先前已描述的CRISPR-Cas系统都不相同,这为人类的“CRISPR工具箱”再添一员。图片来源于网络   有“基因魔剪”之称的CRISPR于上个世纪90年代初被发现

基因编辑新进展:-关键酶消除CRISPRCas技术脱靶效应

  近来全球兴起的CRISPR-Cas编辑技术是基于细菌和古细菌天然防御机制的一项技术。与真核生物体内的RNA干扰过程极为相似,CRISPR-Cas 技术能够特异性切割核酸片段,不过该技术也有可能发生非特异性切割,引起基因组非靶向位点的突变,这一问题越来越受到科研人员的关注。   CRISPR

Nature医学揭示:改良版CRISPR新进展-有望实现产前编辑

图片来源于网络  CRISPR基因编辑技术有很大的作为,科学家们的终极目标是将其应用于疾病治疗。10月9日,《Nature Medicine》期刊同时发表两篇文章,揭示改良版的CRISPR技术成功预防或治疗小鼠的两种遗传性肝脏疾病。更重要的是,其中有一项研究是在胚胎阶段进行的。  1、论文一:纠正成

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(二)

植物细胞转化 (系统:ECM630/830) 对植物原生质(玉米、烟草等)及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品质及产量增加的作物。Lin等人(1997)优化了多种植物上用于GUS表达

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(二)

植物细胞转化         (系统:ECM630/830)      对植物原生质(玉米、烟草等)及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品质及产量增加的作物。Lin等人(1997)优化了多种植物上用于GUS表

诺奖得主创建公司首次完成CRISPR体内编辑骨髓细胞

  吉利德CAR-T疗法斩获第三项适应症;  74%患者持续缓解超过18个月,吉利德CAR-T疗法斩获第三项适应症  吉利德科学(Gilead Sciences)旗下Kite Pharma日前宣布,美国FDA加速批准CAR-T疗法Yescarta(axicabtagene ciloleucel)扩展

我科学家用CRISPR纠正癫痫致病突变

  编码Nav1.1通道α亚基的SCN1A基因发生突变,可导致具有各种临床表型的癫痫,这与通道功能缺失或功能获得的对比效果有关。近期,来自中国科技大学、中科院广州生物医药与健康研究院、广州医科大学第二附属医院和中南大学的研究人员,在Nature子刊《Translational Psychiatry》

浸入式电转印

实验概要采用浸入法将蛋白质从凝胶转移至硝酸纤维素膜是先将凝胶紧贴于一块硝酸纤维素膜,然后再将这种夹层组合浸入盛有大量缓冲液的转印槽内,使电流从转印槽的一侧通向另一侧。通过电洗脱的方法可将蛋白质从凝胶中转印至滤膜上,如同在凝胶中迁移,只不过移动方向与胶平面垂直。若操作仔细,这是一种可将许多蛋白质转印至

STEMCELL新推成分确定的iPSC培养基

  加拿大著名的STEMCELL公司(STEMCELL Technologies Inc.)近日宣布将推出一系列新产品,以加速人多能干细胞的研究和转化应用。这些新产品包括全新的多能干细胞培养基TeSR-E8,以及诱导多能干细胞定向分化的STEMdiff系列产品。   TeSR™-E8™是一种成

Editas达成协议-CRISPR联手干细胞技术开发新一代细胞疗法

  4月4日,由基因编辑界的领军人物张锋博士创建的基因组编辑公司Editas Medicine宣布,与BlueRock Therapeutics签订了一项战略性合作和交叉授权许可协议。两家公司将各自在基因编辑和细胞疗法方面上的专长和优势进行整合,以期发现、开发、制造新型的基因工程化细胞疗法。  依据

北师大Nature子刊:协同作用助力超薄电极电生理监测

  表皮电生理信号,如肌电(EMG)、心电(EEG)、眼电(EOG)和脑电(EEG)等是反映人体健康状况的重要生理指标。然而,运动状态采集高信噪比的电生理信号仍是一大挑战,是可穿戴电子器件用于医疗健康和人工智能领域亟需解决的问题。其原因是:1)电生理信号非常微弱(比如脑电信号核心频率为0-50 Hz