miRcroRNA转染流程

细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。本实验室主要是质粒转染、miRcroRNA转染、慢病毒转染、药物转染、多肽转染等。 一. 实验材料及试剂 六孔板、CO2培养箱、EP管、酒精灯等;无血清培养基、MEM-α或DMEM、RNA、lipofectamine 2000、MSC细胞等。 二、实验内容 1、当六孔板中MSC细胞密度达90%时,准备转染,将无血清培养基、MEM-α或DMEM取出复温并注意平衡好; 2、取出细胞,将培养基换成无血清培养基,放回孵箱培养; 3、取灭菌的EP管,按要求混好RNA(约100pmol/孔),每管250ul DMEM,混匀; 4、另取EP管,加入lipofectamine 2000(5 ul/孔)和MEM-α或DMEM(250ul/孔),轻轻混匀后室温静置5min; 5、将上述两个EP管混匀; 6、室温静......阅读全文

Lipofectamine™2000转染Stealth™-RNA或者siRNA进入哺乳动物细胞

前言Lipofectamine™ 2000试剂是一项ZL配方,用于高效转染Stealth™ RNA或者短的干扰RNA(siRNA)到哺乳动物细胞,以进行RNAi分析(1,2)。该说明书提供了一般的指导以及使用Lipofectamine™ 2000转染Stealth™ RNA或者siRNAj进入哺乳动

Transfection-of-Mammalian-Cells-Using-Lipofectamine

Materials:        Lipofectamine Basal Medium containing 10% fetal bovine serum, 1% glutamine, 1% aa Basal Medium containing 1% glutamine

lipofectamine转染后细胞需要换液吗

用的脂质体太多了,导致细胞膜大量破裂,所以细胞死亡,也有可能是每个孔的溶液体积太少了 我用lipofectamine 2000,DNA只用0.8微克,2微升的lipofectamine 2000 无血清培养基用的50微升加50微升,总共是100微升,然后每个孔其实还放了500微升的。

你所不知道的lipo2000转染原理

  Lipofectamine 2000转染试剂是一种同时便于DNA或RNAi转染的试剂,易于针对广泛的细胞类型进行优化。  Lipofectamine 2000可以在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染,Life Technologies提供的用于siRNA和质粒DNA共转染的最佳试剂。研究人员可使

脂质体2000使用说明书及特点

注意事项 推荐在混合前使用Opti-MEM I低血清培养基(Cat. No. 31985-062)稀释 Lipofectamine 2000和核酸。 转染过程中勿向培养基中添加抗生素,以免造成细胞死亡。 不同批实验请保持细胞接种条件相同。 请检测无血清培养基与Lipofectamine 20

手把手教你质粒转染

  胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。本实验室主要是质粒转染、miRcroRNA转染、慢病毒转染、药物转染、多肽转染等。  一. 实验材料及试剂  六孔板、CO2培养箱、EP管、酒精灯等;无血清培养基、MEM-α或DME

Transfecting-Plasmid-DNA-into-NIH3T3-Cells-Using-Lipofectamine™-LTX-Reagent

实验概要Lipofectamine™  LTX Reagent is a proprietary, animal-origin free formulation for the  transfection of DNA into eukaryotic cells with low cytotoxic

更换无血清培养基后细胞大量死亡的问题

问:我使用Lipofectamine2000转染成骨细胞,在转染前要换上无血清的培养基。本来条件模的好好的,转染效率也可以接受。但是寒假一回来就发生了怪事:细胞在有血清的培养基中长的好好的,一换无血清的培养基就死亡。大概4个小时就能看到较多的细胞飘起来。但是原来我换无血清培养基,就算放那里10个小时

各种转染试剂的中文转染方法

FuGENE6(Roche)转染步骤: 转染前一天将细胞分至培养板,转染当天细胞应50-80%融合。将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。 将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。 1. 在PCR管中加入不含血

pcDNA3.1GFP转染细胞实验

实验概要本实验学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法 — 脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白)。实验原理外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于

miRcroRNA转染流程

  细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。本实验室主要是质粒转染、miRcroRNA转染、慢病毒转染、药物转染、多肽转染等。  一. 实验材料及试剂  六孔板、CO2培养箱、EP管、酒精灯等;无血清培养基、MEM-α或DM

干细胞稳定转染操作步骤

外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于前两者的效率低且伤害较大,所以现在除了对于一些特殊细胞系,一般的转染方法都利用脂质体。利用脂质体转染和其他方法一样,最重要的就是防治其毒性,因此脂质体与

台式测序仪机皇之争:MGISEQ2000-vs-NextSeq-2000

作为业内玩咖,今天看到了第一台NextSeq 2000入驻客户实验室,画面颇有宜家质感。隔着屏幕,不能“开箱测评”,但昨天下午准点收看了illumina的新品云发布会现场录播后,我决定为大家带来一场“云测评”——台式测序仪的机皇之战:MGISEQ-2000 vs NextSeq 2000。   基本

什么是CDMA2000?

CDMA2000是TIA 标准组织用于指代第三代CDMA的名称。适用于3G CDMA的TIA规范称为IS-2000,该技术本身被称为CDMA2000。 CDMA2000全名:Code Division Multiple Access2000,是从cdmaOne蜕变进化出来,支援3G的一种制式。   

贴壁细胞的脂质体转染

一、实验材料1、宿主细胞CHO(贴壁细胞)2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000(invitrogen公司)3、6孔细胞培养版4、无血清培养基OPTI-MEM(GIBICO)5、转染级质粒二、实验步骤invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔

HTY2000B集菌仪|无菌检查仪HTY2000B

HTY-2000B集菌仪    产品简介:HTY-集菌仪是Steritailin®集菌培养器的配套使用仪器,通过集菌仪的定向加压作用,供试品添加至杯体内并正压过滤,过滤后冲洗滤膜除去产品的抑菌性(如有必要),然后在滤器内灌装培养基进行培养,以检验供试品是否含菌。该产品可广泛适用于无菌制剂的无菌检测,

物理参数Maya2000-Pro

物理参数Maya2000 Pro  大小:149 x 109.3 x 50.4 mm重量:0.96 kg检测器类型:薄型背照式,2D选件:Hamamatsu S10420(紫外-可见光应用的最佳选件)Hamamatsu S11510 (可见-近红外光应用的最佳选件)量子效率:75% peak @ 6

氢气发生仪HAD2000

新产品-氢气发生器/氢气发生仪    型号;HAD-2000氢气发生器/氢气发生仪 型号;HAD-2000专用氢气发生器1)可提供高纯度的氢气发生器,没有任何危险;2)H2纯度可达9999%;3)由纯水器中生产,流量可达0~2L/min;4)只要补充纯水、供电,该仪器就可连续、日夜地生产;5)与高压

XRF2000镀层测厚仪规格

儀器功能 : 測量電鍍層厚度(单镀层 双镀层 合金镀层 电镀液分析 元素定性分析)系統結構 :主機箱,專用分析電腦,,彩色打印機主機尺寸610 x 670 x 490 mm主機箱重量 : 75 公斤配件重量 : 約 35 公斤以电脑鼠标移動方式,驅動 XYZ 三軸移動,步進馬達XYZ 樣片台移動尺寸

转染和转染效率测定步骤

LIPOFECTAMINE 2000转染试剂转染步骤此实验步骤设计用来进行24孔板贴壁细胞的瞬时或稳定转染,其为设计用来在生长培养基中直接加入复合物。1. 转染前一天,胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生长的培养基中。2. 对于每孔细

TS2000A多用脱色摇床使用

  一、简介:   脱色摇床用于电泳凝胶分离谱带的固定,考马斯蓝染色和脱色时的振荡晃动,硝酸银染色的固定、染色、显影等,放射自显影实验中X光底片的显影、定影,电泳转移后纤维素膜的进一步处理,抗原抗体的反应和染色,分子杂交细胞培养。   二、详细说明:   1、用途:

API2000操作培训教程_英文

API 2000质谱操作培训

HR2000+ES光谱仪

增强灵敏度的高分辨率光谱仪非常适合等离子体监测、太阳照度测量、荧光特性和其它光敏应用。 产品详情                               灵活 — 可编程微控制器兼容 — 触发功能同步光谱仪到其他设备HR2000+ES视频介绍规格                   

D2000-|-紫外氘灯光源

D2000 | 紫外氘灯光源 D-2000氘灯光源上海闻奕光电技有限公司的D-2000氘灯光源能够产生稳定的190-400nm的输出光谱。其峰-峰稳定性小于0.005%,漂移仅为+/-0.5%每小时。特点:1、深紫外覆盖。覆盖范围是190-400nm;2、性能卓越。峰-峰稳定性小于0.005%的超级

Xt2000i白细胞检验

1. 实验原理 本实验采用半导体激光器,以流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后,通过流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图,从而计算出白细胞的数量。2. 标本采集:2.1 标本种类:新抽取的凝血或手指末梢血 2.2 标本要求:2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝 2.2.2 用

HR2000+CG光谱仪

用于生物和化学应用的高分辨率光谱仪HR2000+CG光谱仪非常适合需要快速测量和高分辨率的应用。产品详情:灵活 — 可编程微控制器兼容 — 触发功能同步光谱仪到其他设备HR2000+CG视频介绍规格:工程规格                                   

2000万,字节跳动出售海豚股票

2月21日,华林证券发布公告称,已就购买字节跳动旗下证券业务海豚股票APP签署协议。为了更好地运营海豚股票App及开展客户服务,华林证券拟受让海豚股票App运营主体北京文星在线科技有限公司(简称“文星在线”)100%股权,并申请将其备案为信息技术专业子公司。本次交易拟作价2000万元。企查查APP显

2000床位医院污水处理设备

点击进入官网2000床位医院污水处理设备2000床位医院污水处理设备介绍——沉淀池污水经过接触氧化后,夹带氧化过程中产生的少量的活性污泥及新陈代谢的生物膜,以及不能进行生物降解的少量固形物,进入二沉池进行固液分离。使水得到澄清排出。沉淀池采用斜管式,总停留时间4.0小时,沉淀的污泥全部回流至污泥池作

2000床位医院污水处理设备

点击进入官网2000床位医院污水处理设备油含量及原油中的水溶性有机物对COD的贡献:HgSO4掩蔽)由于无机可还原性物质对采油废水COD的影响小,废水COD的构成应主要归于废水中的有机物,这包括两部分:一是可被60~90C石油醚萃取的油份;二是不能被石油醚萃取且仍保留在水相中的水溶性有机物(各种可能

涂层测厚仪2000A故障分析排除介绍

涂层测厚仪2000A可无损地测量磁性金属基体(如钢、铁、合金和硬磁性钢等)上非磁性涂层的厚度(如铝、铬、铜、珐琅、橡胶、油漆等) 及非磁性金属基体(如铜、铝、锌、锡等)上非导电覆层的厚度(如:珐琅、橡胶、油漆、塑料等)。涂镀层测厚仪2000A具有测量误差小、可靠性高、稳定性好、操作简便等特点,是控制