革兰氏染色配制及染色方法实验

实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2. 碘液:碘:1g,碘化钾:2g蒸馏水:300ml。出碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升水,使其逐渐溶解,然后研磨,继 续加入少量蒸馏水至完全溶解,最后补足水量。也可用少量蒸馏水,先将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。3. 脱色液:95%乙醇。4. 复染液:A.贮存液:沙黄:2.5g,95%乙醇:100ml。B.应用被:A液:10ml,蒸馏水:90ml。菌片制备:染色的第一步是制作涂片。菌液涂片时,用接种环蘸取菌液点在载玻片上,标本可直接在玻片上涂布,菌落涂片时,先取生理盐水1滴,置玻片上,用接种针挑......阅读全文

如何做出漂亮的革兰氏染色

   革兰氏染色是一项经典的细菌鉴别手段,自19世纪80年代丹麦的医师GRAM创立起,至今已经近一个半世纪,仍旧在细菌的检测和鉴定分类上被广泛应用着。在我国,GB 4789系列的国标中很多致病菌的检测也都需要进行革兰氏染色,可见其重要性。甚至可以说没有精准掌握革兰氏染色的微生物检验员,不会是一个合格

革兰氏染色法的相关介绍

  革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。  未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下

如何对细菌进行革兰氏染色观察

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定。2)草酸铵结晶紫染1分钟。3)自来水冲洗。4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。5)水洗,用吸水纸吸去水分。6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。7)蕃红染色液(稀)染2分钟后,自来水冲洗。干燥,

影响革兰氏染色的因素有哪些

革兰氏染色是用来鉴辨细菌的一种方法,细菌细胞壁上的主要成份不同,利用这种染色法,可将细菌分成两大类。这种染色法是由一位丹麦医生汉斯。在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死

革兰氏染色涂片为什么要固定

在革兰氏染色的后续步骤中需要水洗,电风吹吹干,固定就是为了在这些步骤时玻片上的菌体不会被冲走或吹走。要注意的是不宜在火焰上停留太长时间以免造成菌体变形,改变了染色结果,而造成假阴性

革兰氏染色反应的基本内容

  革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。  细菌对于革

革兰氏染色有哪些注意事项?

(1)最好挑选18-24h的菌落进行革兰氏染色,培养时间过久的的革兰氏阳性细菌可能会被染成红色而造成假阴性。(2)挑取适量的菌,不宜过多,均匀涂开。(3乙醇脱色是革兰氏染色是否成功的关键,15-30s为宜,脱色不够可能会造成假阳性,脱色过度可能会造成假阴性。

革兰氏染色需要注意哪些问题

1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响,难以严格规定。 2、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后,应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释而影响染色效果。

细菌的简单染色和革兰氏染色及其注意事项(二)

细菌芽孢染色法(一)原理细菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易着色,若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则:除了用着色力强的染料外,还需要加热,以促进芽胞着色。当染芽胞

革兰氏染色法染色的目的和火焰固定的目的

细菌染色之后才能在显微镜下看到形态,也可用于区分革兰氏阳性菌和阴性菌,G+细菌呈现革兰氏染液的蓝紫色,而G-细菌呈现沙黄或复红的红颜色。火焰固定目的是防止染色后洗涤、复染时细菌脱片。

细菌的简单染色和革兰氏染色及其注意事项(一)

革兰氏染色法(一)原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等)使其着色。酸性染料的离子带负电荷,能

瑞氏(Wright)染色液的配制方法

瑞氏(Wright)染色液   瑞氏染料粉末 0.3g  甘油 3ml  甲醇 97ml  将染料粉末置于干燥的乳缽内研磨,先加甘油,后加甲醇,放玻璃瓶中过夜,过滤即可。

常用HE染色试剂配制方法临检基础

常用HE染色试剂配制方法: 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先

细菌形态学检查实验——革兰氏染色法

实验方法原理细菌经结晶紫初染染成蓝色。革兰氏染色阳性菌(G+)细胞壁肽聚糖层数多,且肽聚糖为空间网状结构,再经乙醇脱水,网状结构更为致密,染料复合物不易从细胞内漏出,仍为蓝色。而革兰氏染色阴性菌(G-)细胞壁脂类含量多,肽聚糖层数少,且肽聚糖为平面片层结构,易被乙醇溶解,使细胞壁通透性增高,结合的染

常见染色液的配制

实验概要常见染色液的配制实验步骤  一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液   A液:美蓝(methylene blue) 0.6g  95%酒精 30ml  B液:KOH 0.01g  蒸馏水 100ml  分别配制A液和B液,配好后混合即可。  二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液  A液:

抗酸染色法的步骤和染色配制简介

  一、抗酸染色一般步骤  1、初染  用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。  2、脱色  3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。  3、复染  用碱性美兰溶液

革兰氏染色检查正常参考值及临床意义

中文名称:革兰氏染色检查 英文名称:Gram stain Examination 临床意义: 胸腹水、分泌物等涂片革兰氏染色检出细菌,可考虑为细菌感染。 对培养基生长细菌进行染色分类,并观察形态。

糖类染色实验——糖原染色

实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水

细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙酮)脱色,再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G+);如被脱色,

细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

实验概要1. 学习细菌的革兰氏染色原理和方法 2. 了解细菌的特殊形态结构: 芽孢、荚膜、鞭毛实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙

细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。近年来由于对细菌细胞壁的结构有了较深入的了解,对革兰染色的机制提出不同的看法。一般认为革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革

细菌形态学检查之革兰氏染色

  革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。步骤    革兰氏染色法一般包

细菌的革兰氏染色和特殊形态观察

实验原理染色方法:革兰染色法是细菌学中zui广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色,加媒染剂(增加染料和 细胞的亲和力)后,用脱色剂(酒精或丙酮)脱色,再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G+);如被脱

抗酸染色实验方法

  结核分枝杆菌简称为结核菌,是引起人和动物结核病的病原菌,本病主要通过呼吸道传染,其次是消化道或皮肤黏膜损伤传染,可引起肺脏或其他脏器病变,随着结核菌的全身播散,可侵犯全身各器官,但以肺部病变最为多见 。结核病至今仍为重要的传染病,也是当前一个重要的公共卫生问题,成为当前农村因病制贫,因病返贫的重

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法配制试剂

配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;2.甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;3.甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;

姐妹染色单体分化染色实验

实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体

姐妹染色单体分化染色实验

实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D

姐妹染色单体分化染色实验

实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister  chromatid  differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处

糖类染色实验——黏液物质染色

实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香

染色质的研究方法及实验依据

1、用温和的方法裂解细胞核,将染色质铺展在电镜铜网上,通过电镜观察,未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝,经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构,串珠的直径为10nm。2、用非特异性微球菌核酸酶消化染色质时,经过蔗糖梯度离心及琼脂糖凝胶电泳分析,发现绝大多数DNA被降解成