动物RNA提取实验
实验方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA 纯化系统)可在1小时内从组织、培养细胞和白细胞中提取纯化完整总RNA，方法简单、快速。该系统以膜为基础，根据组织类型的不同，每次最多可纯化60 mg 组织。系统包含DNase 处理步骤，直接在小离心柱的滤膜上完成，大大降低了会干扰扩增反应的基因组DNA 的污染。纯化中不需使用苯酚: 氯仿抽提及乙醇沉淀，最后RNA 样品中没有DNase 残留。 实验材料 实验鱼试剂、试剂盒 乙醇DEPCSV RNA Lysis BufferSV RNA dilution BufferSV RNA Wash SolutionYellow core BufferMnCl20.09MDNase ⅠSV DNase Stop SolutionNuclease-Free water仪器、耗材 台式离心机恒温水浴锅分析天平移液器一次性......阅读全文
中国科学院动物所团队综述环形RNA药物设计
环形 RNA（circular RNA,circRNA）是一类广泛存在于真核细胞中的内源性非编码 RNA 分子，在生物体发育过程中发挥着重要作用。其独特的环状结构使其免受外切酶降解，因此比线性 RNA 更加稳定。自 2010 年代初以来，circRNA 在 RNA 适配体、 guide RNA 等领
【锐赛小课题】miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳
动物总RNA的提取与电泳 I． 实验目的与要求 A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。 B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。 II． 实验原理和背景知识 A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物
PNAS：RNA测序解开“为什么大多数克隆动物胚胎会失败？”
生物通报道：自从20年前英国科学家成功克隆出克隆羊多莉已经20年了，但是克隆哺乳动物仍然是一个挑战。最近，由美国和法国研究人员进行的一项新研究，阐释了为什么大多数克隆胚胎可能会失败。 多莉羊是利用“体细胞核转移”技术克隆出来的，来自一个成年细胞的细胞核被转移到已经去核的未受精卵子中，然后电击以
研究揭示海洋无脊椎动物RNA病毒的遗传多样性
《中国科学：生命科学》（SCIENCE CHINA Life Sciences）在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所研究员崔杰课题组题为Virome in Marine Ecosystems Reveal Remarkable Invertebrate RNA virus Diversity的研
哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计，实验和分析siRNA效应
转录后基因沉默，也称为RNA干扰，是指双链RNA分子阻断或者降低同源基因的表达的现象。这种现象可能是作为一种抑制病毒感染和转座子跳跃的细胞防御机制(Ketting et. al., 1999; Tabara et. al., 1999; Jensenet. al., 1999; Ratcliff
探索庞大未知的“病毒圈”－脊椎动物RNA病毒研究获重要突破
由中国疾病预防控制中心传染病所研究员、复旦大学附属上海市公共卫生临床中心兼职教授张永振带领的研究团队，在脊椎动物RNA病毒的发现、遗传与进化领域取得重要突破，这项成果4月5日在《自然》杂志上以研究论文形式发表。 目前，人们对脊椎动物RNA病毒多样性及其进化史的认识，很大程度上还局限在哺乳类和鸟
研究团队揭示海洋无脊椎动物RNA病毒的遗传多样性
5月6日，《中国科学：生命科学》（SCIENCE CHINA Life Sciences）在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所研究员崔杰课题组题为Virome in Marine Ecosystems Reveal Remarkable Invertebrate RNA virus Divers
我国首次发现RNA甲基化修饰可调控脊椎动物配子成熟
我国科研人员在国际上首次发现脊椎动物的配子成熟需要甲基转移酶ｍｅｔｔｌ３催化的ｍ６Ａ甲基化修饰，从而揭开了该甲基化修饰可调控脊椎动物配子成熟这一此前尚未为人所知的秘密。（2018（第二届）模式动物与重大疾病动物模型研究与应用研讨会） 记者１３日从中国科学院水生生物研究所了解到，该所科研人员以模
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应，在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法...1
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起，以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA 与蛋白质解离，并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有：（1）用氯仿－辛醇混合液剧烈振荡，使蛋白质变性。（2）在冷的2mol/L盐酸胍溶液
科学家发现哺乳动物细胞存在新型长非编码RNA
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所陈玲玲研究组的最新研究，揭示了一类全新内含子来源的长非编码RNA的产生机制，及其参与剪接调控的重要功能。今天，国际学术期刊《分子细胞》以封面故事发表了他们的相关研究论文。 据介绍，几乎所有哺乳动物细胞的基因都由外显子和内含子组成。一般认
RNA在脊椎动物的胚胎和器官中的整体标本原位
小鼠或者鸡的胚胎以及器官中的整体原位杂交 小鼠胚、鸡胚或者器官中RNA杂交的酶学检测 非洲爪蟾的整体原位杂交 实验方法原理
研究人员系统鉴定出哺乳动物生精细胞RNA结合蛋白
南京医科大学教授郑科、郭雪江和副教授林明焰与中南大学教授、中信湘雅生殖与遗传专科医院副院长谭跃球等课题组合作，系统鉴定了哺乳动物生精细胞RNA结合蛋白、RNA结合结构域和非结构域元件，构建其男性不育相关基因突变图谱，并揭示一非结构域元件增强RNA结合和调节精子发生的功能机制。近日，该成果在线发表于S
Lipofectamine™2000转染Stealth™－RNA或者siRNA进入哺乳动物细胞
前言Lipofectamine™ 2000试剂是一项ZL配方，用于高效转染Stealth™ RNA或者短的干扰RNA（siRNA）到哺乳动物细胞，以进行RNAi分析（1，2）。该说明书提供了一般的指导以及使用Lipofectamine™ 2000转染Stealth™ RNA或者siRNAj进入哺乳动
揭示哺乳动物干细胞利用抗病毒Dicer抵御多种RNA病毒入侵
在一项新的研究中，来自英国弗朗西斯-克里克研究所的研究人员发现了一种以前认为随着哺乳动物的进化而消失的重要机制有助于保护哺乳动物的干细胞免受SARS-CoV-2和寨卡病毒等RNA病毒的侵害。他们认为，这一发现有朝一日可能在开发新的抗病毒治疗方法中得到利用。相关研究结果发表在2021年7月9日的S
动物所发现一类高度富集于成熟精子的新型小分子RNA
成熟精子中RNA的发现让科学家意识到精子不仅仅是运输父源DNA的载体。过去的研究已证实，成熟精子所携带的一些miRNA能够影响早期胚胎发育及后代的性状。然而，目前尚不清楚成熟精子中是否还携带除miRNA之外其他种类的小RNA；对各种小RNA的生成及在成熟精子中的富集过程也知之甚少。
挑战生物学以往观点－哺乳动物细胞可将RNA序列写入DNA
美国费城托马斯杰斐逊大学的研究人员首次发现，哺乳动物细胞可以将RNA序列转换回DNA，这在病毒中比真核细胞更常见。这一发现可能会挑战生物学长期以来的观点，并可能对生物学的众多领域产生广泛影响。相关研究发表在6月11日的《科学进展》杂志上。 细胞含有一种机制，它可以将DNA复制成一组新的DNA，
动物组织细胞总RNA的提取（异硫氰酸胍法和TRIzol法）2
（二）TRIzol试剂提取RNA1.取新鲜动物组织0.1～0.2g置于组织匀浆器中，加入预冷的Trizol液 1ml 于玻璃匀浆器中，在冰浴中迅速匀浆15～30s，以充分研碎组织。然后将细胞悬浮液吸入另一1.5ml Ep管中，于室温下静置5min。2.加入200μl氯仿，剧烈振摇15s混匀后，室温静
动物组织细胞总RNA的提取（异硫氰酸胍法和TRIzol法）1
一、实验原理RNA是基因表达的中间产物，存在于细胞质与核中。对RNA进行操作在分子生物学中占有重要地位。获得高纯度和完整的RNA 是很多分子生物学实验所必需的，如Northern杂交、cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上取决于RNA的质量。由于细胞内的大部分RNA是以核蛋白复合体的形
水生动物病害基因组DNA/RNA提取试剂盒使用说明
水生动物病害基因组DNA/RNA提取试剂盒一、简介水生动物病害基因组DNA/RNA提取试剂盒适合于快速从水生动物组织匀浆液中提取高纯度的病害基因组核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，获得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern杂
研究揭示RNA甲基化修饰调控哺乳动物细胞微环境维持机制
近期，中国科学院西北生态环境资源研究院西北高原生物研究所研究员杨其恩课题组以小鼠为模型，揭示RNA甲基化修饰调控哺乳动物精原干细胞微环境维持的新机制。 成体干细胞命运决定受到特殊微环境调控，在大多数组织中，微环境的形成和维持机制并不明确。精原干细胞是一类经典的成体干细胞，是哺乳动物精子发生的基
动物所在DNA:RNA杂合G四链体结构功能研究中获系列进展
除了传统的DNA双螺旋，富含鸟嘌呤的核酸分子可以形成四股链的G-四链体结构。能够形成G-四链体的序列在基因组DNA中广泛存在并在启动子附近聚集。这一现象提示G-四链体具有重要生物学功能。G-四链体在细胞中的存在也在约两年前得到证实。由于鉴定G-四链体结构的物理化学技术难以用于双链DNA及细胞内，
动物所等发现一类新型血清小RNA参与机体活动性感染
近年来，非编码小RNA(miRNAs)在血清中的发现及其在不同疾病中的变化为癌症、代谢性疾病的诊断开创了一种革命性的无创检测方法。然而，除miRNAs之外，血清中是否还存在其他形式的小RNA尚未知晓。 中国科学院动物研究所段恩奎研究团队曾于2012年在哺乳动物成熟精子中发现了一类来源于tR
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技术可用在研究与胚胎发育相关基因的功能上，但是由于细胞分裂造成 dsRNA 的稀释，使得这种方法在研究成体的基因功能时有一定的局限性。为弥补早期 RNAi 技术的不足，Tavernarakis 等将 RNAi 技术做了一些改进及更动，将目的基因之标的序列以反向重复的方式，由
RNA提取时RNA降解原因
1 ) 新鲜细胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鲜组织： 某些含有内源性核酸酶的样品，很难避免RNA酶的降解，建议采用的方法为在液氮条件下将组织研碎，并且，匀浆时采用更多的裂解液。 3 ) 冷冻样品： 样品取材后应该迅速置于液氮中冷冻存放，然后转移到-70℃冰箱存
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物体内特定基因由于种种原因不表达的遗传现象。一方面，基因沉默是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物（genetically modified organisms）的障碍，另一方面，它又是植物抵抗外来核酸入侵（如病毒）的一种反应，为植物抗病毒的遗传育
RNA干扰技术(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫（C. elegans）中的par-1基因时，发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达，而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA（sense RNA）以期观察到基因表达的增强。但得到的结果
RNA提取心得（组织RNA提取和培养细胞的RNA提取）
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后
RNA在脊椎动物胚胎和器官中整体标本原位杂交检测实验2
小鼠胚、鸡胚或者器官中RNA杂交的酶学检测实验材料杂交溶液A中杂交过的小鼠胚或鸡的胚胎或器官样本试剂、试剂盒预杂交溶液A 70℃2×SSCpH 4.570℃ 0.1% (V V) CHAPS3- [ (3-胆胺丙基）二甲铵]-I-丙烷磺酸盐） (3- [ (3- cholamidopropyl) d
RNA在脊椎动物胚胎和器官中整体标本原位杂交检测实验3
非洲爪蟾的整体原位实验材料非洲白化爪蟾的胚胎试剂、试剂盒2% (m V)半胱氨酸 pH 7.8MEMPFA缓冲液PBS50%75%甲醇 灭菌水100%甲醇25% 甲醇 PBTPBT ： PBS 中加 0.1% (V V) Tween-20 pH 7.8 PBT中加0.1 mol L三乙醇胺（TEA)