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动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应，在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。除DNA外，脱氧木糖、阿拉伯糖也有同样反应。其他多数糖类，包括核糖在内，一般无此反应。操作方法一、DNA标准曲线的制定取10支试管，分成2组，依次加入0.4、0.8、1.2、1.6和 2.0mLDNA标准溶液。添加蒸馏水，使之都成2mL。另取2支试管，各加2mL蒸馏水作为对照。然后各加入4mL二苯胺试剂，摇匀。于60℃恒温水浴中保温1小时，冷却后于595nm处进行比色测定。取两管平均值，以DNA浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。二、制品的测定取 2支试管，各加2mL待测液（内含 DNA应在标准曲线的可测......阅读全文