超滤法浓缩蛋白质溶液实验
实验方法原理 超滤浓缩蛋白质是通过外力使蛋白质溶液通过滤膜而仍保留目的蛋白质的方法。实验室超滤主要是针对小体积蛋白质溶液（几毫升），用离心力的方法使溶液很容易通过滤膜。我们以 Amicon 系作为超滤的实例进行描述。这个方法不易引起蛋白质变性。微型浓缩器初始容量有 2 ml 以及更小的，2 mg/ml 的牛血清蛋白（BSA）样品 2 ml 离心 30 min 可使体积浓缩至 50 ul 以下，然而浓缩的时间依所用超滤膜的类型、缓冲液的组成以及蛋白质的种类和浓度等因素而定。通过向浓缩的蛋白质溶液中加入新缓冲液及再离心，能很方便地更换蛋白质溶液的缓冲液和脱盐，四种型号浓缩器 Centricon-3、10、30 和 Centricon-100 分別能截留平均分子量为 3，10, 30 和 100 kD 的蛋白质组分。实验材料 蛋白质溶液试剂、试剂盒 仪器、耗材 Amicon Centricon 微型浓缩器磁力搅拌器和搅拌子......阅读全文
超滤（1）
超滤是以压力为推动力的膜分离技术之一。以大分子与小分子分离为目的，膜孔径在20－1000A°之间。中空纤维超滤器（膜）具有单位容器内充填密度高，占地面积小等优点。基本信息概述引在超滤过程中，水溶液在压力推动下，流经膜表面，小于膜孔的溶剂（水）及小分子溶质透水膜，成为净化液（滤清液），比膜孔大的溶质及
超滤技术
超滤技术是一种以压力差为推动力，利用膜的透过性能，达到分离水中离子、分子以及某种微粒为目的的膜分离技术。超滤膜的孔径范围大致在0.005~1微米之间，填补了微滤和纳滤之间空隙。国内外学者提出超滤过程实际上同时存在三方面的情形：①溶质在膜表面以及微孔壁内产生吸附；②溶质的粒径大小与膜孔径相仿，溶质在
超滤（5）
装置超滤装置一般由若干超滤组件构成。通常可分为板框式、管式、螺旋卷式和中空纤维式四种主要类型。由于超滤法处理的液体多数是含有水溶性生物大分子、有机胶体、多糖及微生物等。这些物质极易粘附和沉积于膜表面上，造成严重的浓差极化和堵塞，这是超滤法最关键的问题，要克服浓差极化，通常可加大液体流量，加强湍流和加
超滤（6）
配套设备(1)增压泵超滤膜以力差为推动力进行过滤，当原水的水压不能满足过滤需求时，系统需要增加泵加压，以实现超滤膜分离作用，由于超滤膜的工作压力较低，一般小于O·7MPa，故在系统设计时，一般选用离心泵，选择离心泵的主要依据是扬程、流量、泵体材质，其次是泵的体积大小、外观造型和价格等。①扬程和流量的
超滤（3）
优缺点超滤膜元件采用世界著名膜公司产品，确保了客户得到目前世界上最优质的有机膜元件，从而确保截留性能和膜通量，超滤设备控制系统可根据用户具体使用要求进行个性化设计，结合先进的控制软件，现场在线集中监控重要工艺操作参数，避免人工误操作，多方位确保系统长期稳定运行。由于每根超滤组件在出厂前加入保护液，使
蛋白质转印法
蛋白质经SDS-PAGE后，胶片浸入转印缓冲液，蛋白质可被转印到硝化纤维纸（nitrocellulose） 上，先经尿素洗去SDS，并使蛋白质回復原态抗原性，可使用抗体进行免疫染色 （Towbin et al, 1979）。仪器用具：电泳转印槽 （Hoefer Transphor TE 52）：转印
蛋白质印迹法
值得一提的是，western blot这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Edwin Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术称为Southern blot，后来类似的出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对RNA，一个针对蛋白质，人们分别把这两种技
蛋白质印迹法
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里
蛋白的浓缩方法
丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸铵沉淀法；（低温）有机溶剂沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超滤法；透析法；离子交换层析和冷冻干燥法……1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白质变性。2，免疫沉淀法：得有特异性抗体！3，硫酸铵沉淀法：利用高浓度盐将蛋白质析出（盐析）选择
蛋白浓缩方法
蛋白浓缩方法基本有： 丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸铵沉淀法；（低温）有机溶剂沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超滤法；透析法；离子交换层析和冷冻干燥法…… 1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白质变性。 2，免疫沉淀法：得有特异性抗体！ 3，硫酸铵沉淀法：利用高浓
超滤设备的原理特点和分类及其工艺参数
超滤UF设备。一、 超滤原理。超滤Ultrafiltration技术是一种膜滤法，常温下以一定压力和流量，利用不对称微孔结构和半透膜介质，依靠膜两侧的压力差作为推动力，以错流方式进行过滤，使溶剂及小分子物质通过，大分子物质和微粒子如蛋白质、水溶性高聚物、细菌等被滤膜阻留.二、超滤设备特点1. 超滤过
超滤净水器的缺点介绍
超滤技术的优缺点与传统分离方法相比，超滤技术具有以下特点： 1.过滤过程是在常温下进行，条件温和无成分破坏，因而特别适宜对热敏感的物质，如药物、酶、果汁等的分离、分级、浓缩与富集。 2.过滤过程不发生化学变化，无需加热，能耗低，无需添加化学试剂，无污染，是一种节能环保的分离技术。 3.超滤
滴定分析法的标准溶液
制备要求 滴定分析用标准溶液的制备，一般要求的内容，依据 GB/601-2002 中的12条规定： 1、试剂纯度：分析纯以上： 2、实验用水：至少应符合GB/T6682中三级水的规格； 3、配制标准物质时的温度：是指20℃时的温度； 4、分析天平、滴定管、容量瓶和移液管，均需定期校正；
超滤装置的超滤技术效果如何？
超滤装置的超滤技术效果如何？极佳的微乳化合成脂乳化液，采用化学法进行油水分离更加困难。微生物法。此法的局限性较大。由于废乳化液的BOD 值很低，而COD 值相对来说又极高，相差十至几十倍，属于难生物降解的废水，因此不宜直接采用微生物法处理。物理法。其主要工艺包括沉淀、加热油水分离、过滤、最后采用高分
超滤装置设备之超滤膜元件
超滤装置设备之超滤膜元件超滤膜，是一种孔径规格一致，额定孔径范围为0.01微米以下的微孔过滤膜。在膜的一侧施以适当压力，就能筛出小于孔径的溶质分子，以分离分子量大于500道尔顿(原子质量单位）、粒径大于10纳米的颗粒。超滤膜是最早开发的高分子分离膜之一，在60年代超滤装置就实现了工业化。1、超滤膜的
原子吸收火焰法需配置镧溶液，为何溶液会出现浑浊不清
子吸收火焰法需配置镧溶液，为什么溶液会出现浑浊不是澄清的 以1mol/L乙酸钱为土壤交换剂，用原子吸收分光光度计法测定土壤交换性钙、镁时，所用的钙、镁标准溶液中应加人同量的1 mol/L乙酸钱溶液，以消除基体效应。此外，在土壤浸出液中，还应加人释放剂锶(Sr)，以消除铝、磷和硅对钙测定的干扰。我看
生物大分子浓缩、干燥及保存
一、样品的浓缩 生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的： 1、减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。
蛋白质浓缩、干燥及贮存
一、样品的浓缩生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的： 减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。 空气流动蒸发浓缩 空
蛋白质提取与纯化技术（三）
一、样品的浓缩生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的：1、减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。2、空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体
生物大分子的浓缩、干燥和保存方法
一、样品的浓缩 生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的：1、减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。2、空气流动蒸发浓缩 空气的流动
蛋白质提取与纯化技术3
1、减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。 2、空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液，表面不断通过空气流；或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室，用电扇对准吹风
蛋白质提取与纯化技术（二）
2、等电点沉淀法 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。3、低温有机溶剂沉淀法 用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分辨
超滤原理和优缺点
超滤原理 超滤（Ultrafiltration）技术是一种膜滤法，也有错流过滤（Cross Filtration）之称。它能从周围含有微粒的介质中分离出10～100A的微粒，这个尺寸范围内的微粒，通常是指液体内的溶质。其基本原理是在常温下以一定压力和流量，利用不对称微孔结构和半透膜介质，依靠
最好分离效果：新型超滤分离法“降伏”核废料镅
近日，苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室王殳凹教授团队联合中外科研团队，研发了一种新型超滤分离方法，有望用于乏燃料后处理、放射性污染控制、放射性同位素分离纯化、放射化学诊断分析等重要任务。相关研究成果4月20日发表在《自然》期刊上。 核电是人类应对能源短缺以及碳排放问题的重要途径。但是，
超滤原理和优缺点
超滤(Ultrafiltration)技术是一种膜滤法，也有错流过滤(Cross Filtration)之称。它能从周围含有微粒的介质中分离出10～100A的微粒，这个尺寸范围内的微粒，通常是指液体内的溶质。其基本原理是在常温下以一定压力和流量，利用不对称微孔结构和半透膜介质，依靠膜两侧的压力差
如何利用透析法进行脱盐浓缩蛋白
二、蛋白质的分离纯化蛋白质的分离纯化方法很多，主要有：（一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶液中
生物样品蛋白质的常用分离技术
(1)加热法当待测组分热稳定性好时,可采用加热的方法将一些热变性蛋白质沉淀。加热温度视待测组分的热稳定性而定,通常可加热到90℃。蛋白质沉淀后可用离心或过滤除去,这种方法最简单,但只能除去热变性蛋白质。(2)盐析法利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。在低盐浓度下,蛋
圆二色是研究溶液中蛋白质构象
圆二色是研究溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法,远紫外CD 数据能快速地计算出溶液中蛋白质的二级结构;近紫外CD 光谱可灵敏地反映出芳香氨基酸残基、二硫键的微环境变化,蕴含着丰富的蛋白质三级结构信息。随着现代分析仪器的飞速发展,高压液相色谱、停流技术、电化学及荧光等附加装置与CD 光谱仪
从稀释水溶液中萃取和浓缩蛋白质
《从稀释水溶液中萃取和浓缩蛋白质》(Extraction and Concentration of Protein from Dilute Aqueous Solution) 应用领域：生物/生物科技 目标分析物：牛血清白蛋白BSA 样品基质：水 萃取柱：BAKERBOND s
硫酸铜溶液可以用来检验蛋白质
硫酸铜属于重金属盐，在硫酸铜的作用下蛋白质的分子结构发生被破坏，从而性质改变，失去溶解性及生理活性而凝固。所以是化学变化。在高温中也会出现上述现象。所以会凝固·热、酸、碱、重金属盐（钡、铜、银等）以及紫外线、甲醛、乙醇的作用下蛋白质的分子结构发生被破坏，从而性质改变，失去溶解性及生理活性而凝固。所以