免疫球蛋白标记技术

实验方法原理 酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(如辣根过氧化物酶,简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上,宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。实验材料 抗体试剂、试剂盒 戊二醛液萘氏试剂PBSNaIO4碳酸盐缓冲液醋酸钠缓冲液NaBH4仪器、耗材 搅拌器分光光度计离心机透析袋烧杯试管吸管实验步骤 一、酶制剂及其底物凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶,原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求1. 来源方便,易于纯化;2. 比活性高,性质稳定;3.  ......阅读全文

免疫球蛋白标记技术

酶标记抗体 荧光素标记抗体技术 125I标记单克隆抗体技术             实验方法原理 酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量

免疫球蛋白标记技术

实验方法原理 酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前

免疫球蛋白标记技术_酶标记抗体

免疫标记技术是用特定的物质标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。可借助各种仪器观察结果或进行自动化测定,可在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;或应用各种液相和固相免疫分析方法,对液体中的抗原、半抗原或抗体进行定性和定量测定。实验方法原理酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗

免疫球蛋白标记技术_荧光素标记抗体技术

实验方法原理目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200,RB200)。在碱性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧

免疫球蛋白标记技术_125I标记单克隆抗体技术

实验方法原理氯胺桾即对甲苯碘氯胺钠,在水溶液中生成次氯酸,为一种温和氧化剂,当加入到有蛋白质和碘的弱碱水溶液中,可将I2氧化为I+并结合到氨基酸上。如标记条件温和,标记后的McAb仍具有良好的结合活性,通过放射性同位素强度的测定可反映相应抗原的含量。实验材料McAb125I试剂、试剂盒磷酸缓冲液氯胺

AFLP标记技术

实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的

RFLP标记技术

实验概要DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction  Fragment Length  Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶

RAPD标记技术

实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly  amplifiled polymorphic  DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)

免疫标记技术介绍

免疫标记技术是指将抗原抗体反应与标记技术相结合,将已知的抗体或抗原标记上示踪物质,通过检测标记物,间接测定抗原-抗体复合物的一类实验方法。常用的标记物有酶,荧光素,放射性核素,化学发光物质及胶体金等。

亲和标记技术的应用

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

放射免疫标记技术

一、放射免疫标记技术放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合,以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法,由于此项技术具有灵敏度高 (可检测出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物质,特异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少

免疫金标记技术原理

免疫金标记技术原理:胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面,无共价键形成,标记后大分子物质活性不发生改变。金颗粒具有高电子密度的特性。金标蛋白在相应的配体处大量聚集时,在显微镜下可见黑褐色颗粒或肉眼可见红

常用单抗的标记技术

目前动物用单抗,在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用,大多以诊断试剂(盒)的形式提供,其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。1.酶标记(1)辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用

RAPD标记技术的原理

RAPD标记(Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD)是由美国人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技术发展起来的一种DNA多态性标记。它是利用随机引物对目的基因组DNA进行PCR扩增,产物经电泳分离后显色,分析扩增产物DNA片段的多态性,此即反

免疫标记技术及其应用

近二十几年来,免疫学检测的方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使检测的敏感性和特异性都大大提高。继20世纪50年代的免疫荧光(1FA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。 标记免疫技术是将某种可微量测定或超微量

PCR-SSCP标记技术

实验概要日本Orita等研究发现,单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或少地影响其空间构象,使构象发生改变,空间构象有差异的单链DNA分子在聚丙烯酰胺凝胶中受排阻大小不同.因此,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(

免疫荧光标记技术

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

多肽FRET荧光标记技术

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简

关于免疫标记技术的简介

  免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或 电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原 抗体反应。免疫标记技术不仅极大地提高了 抗原抗体反应的敏感性,以便对微量物质进 行定性或定量检测,而且结合以显微镜或电 镜技术,能对待测物进行精确的定位检测。 免疫标记技术有三种基本类型:免疫荧光 法、免疫酶技术

免疫分析法标记技术

  基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。  标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术  放射免疫标记技术(RIA)  基本原理:根据抗原抗体特异性结合

多磷酸化肽标记技术

蛋白质磷酸化是生物界最普遍,也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰,20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中,大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关,如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多

免疫分析法的标记技术

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术 基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测

免疫分析法的标记技术

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术 基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测

免疫分析法的标记技术

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术 基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测

常用的免疫标记技术有哪些

免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或 电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原 抗体反应。免疫标记技术不仅极大地提高了 抗原抗体反应的敏感性,以便对微量物质进 行定性或定量检测,而且结合以显微镜或电 镜技术,能对待测物进行精确的定位检测。 免疫标记技术有三种基本类型:免疫荧光 法、免疫酶技术和放

免疫分析法的标记技术

  基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。  标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术  放射免疫标记技术(RIA)  基本原理:根据抗原抗体特异性结合

免疫荧光标记技术是什么

.原理免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法:将标记

引物介导的原位标记技术实验

            实验材料 中期染色体分裂相 抗地高辛抗体 试剂、试剂盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚

引物介导的原位标记技术实验

实验材料 中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒 三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X SSCTween-20乙醇脱脂奶粉(粉末)10 X dNTP反应终止液洗脱液封闭液仪器、耗材 盖玻片染色缸恒温装置实验步骤 一、标准一步反应PRINS 技术的操作规程有两套,一套