膜钳片实验
实验材料 细胞组织试剂、试剂盒 硅酮树脂电极液仪器、耗材 膜片微电极滤膜 防震工作台屏蔽罩仪器设备架单色光系统膜片钳放大器刺激器数据采集的设备微操纵器实验步骤 第一步是分两次拉制，第一次拉长7～10mm，直径小于200μm，在此基础上进行第二次拉制，最终使尖端的直径为1～2μm，两步拉制的目的主要是使电极前端的锥度变大，狭窄部长度缩短，因此可降低电极的串联电阻，也可减少全细胞记录时的电极液透析时间。由于膜片微电极最忌沾染灰尘和脏物，更忌触碰尖端附近部位，所以一般要求在使用前制作。 第二步是在电极前端涂以硅酮树脂（sylgard），其目的是为了降低电极与灌流液之间的电容，并形成一个亲水界面。经此处理后，上述电容可由6～8pF减少到1pF以下。硅酮树脂对形成Giga?鄄seals无影响，但可减少本底噪音，对单通道记录很重要。在进行全细胞记录时，不用硅酮树脂也可以得到满意的效果，通常微电极在涂抹硅酮树脂后再进行抛光，但最好是......阅读全文
神经组织块膜片钳全细胞记录实验
实验方法原理通过全细胞膜片技术来检测神经元兴奋性及其放电活动，是电生理实验的基本方法。神经组织块膜片钳技术相对于培养细胞膜片钳技术而言，细胞更接近原始的生理环境，细胞具有更好的生理状态，封接后可维持更长的时间。实验材料细胞试剂、试剂盒人工脑脊液(ACSF)消化酶浓缩液ACSF通混合气尼龙网准备电极内
膜片钳实验系统震动消除和噪声消除
震动的消除方法通过仔细的设计，是可以避免震动的危害，例如在半夜的地下室，各种白天的震动都消失了。但预防震动比仅仅靠小心更重要。需要一个用来补偿微操纵器的复杂的空气隔离实验台和一个稳定良好设计的微操纵器。微操纵器必须是坚固而紧凑的。因此其移动部分(包括从微操纵器Holder、电极尖端、到chamber
膜片钳技术的应用进展（一）
【摘要】 膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”，应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在，并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。 【关键词】 膜片钳技术 离子通道 进展 1976年由德国马普生物物理化学研究所的Neher和Sakamann首次报道了应用膜片钳技术在蛙胸
接地电阻仪单钳和双钳法测量
1、单钳测量 测量多点接地中的每个接地点的接地电阻，而且不能断开接地连接防止发生危险。 适用于：多点接地，不能断开连接，测量每个接地点的电阻。 接线：用电流钳监测被测接地点上的电流。 2、双钳法 条件：多点接地，不打辅助地桩，测量单个接地。 接线：使用厂商指定的电流钳接到相应的插口上
膜片钳及其原理和应用
膜片钳是一种可以直接观察单一的离子通道蛋白质分子对相应离子通透难易程度等特性的一种实验技术。其基本原理是用一个尖端光洁，直径约为0.5~3um 的玻璃微电极同神经或肌细胞的膜接触而不刺入，然后在微电极另一端开口处施加适当的负压，将与电极尖端接触的那一小片膜轻度吸入电极尖端的纤细开口，这样在这一小
鞘膜积液检查实验
仪器、耗材生理盐水实验步骤1. 直接涂片法: 直接涂片检查 2. 离心法: 加适量生理盐水稀释离心，取沉渣镜检其他该方法主要用来检查班氏微丝蚴
鞘膜积液检查实验
仪器、耗材 生理盐水实验步骤 直接涂片法: 直接涂片检查 2. 离心法: 加适量生理盐水稀释离心，取沉渣镜检其他 该方法主要用来检查班氏微丝蚴
细胞膜的制备方法实验——分离顶层膜、基底膜或中间膜
从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜试剂、试剂盒包被缓冲液PAA裂解缓冲液Nyoodenz仪器、耗材阳离子硅胶微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管实验步骤1. 制备下列溶液：(1) 包被缓冲液（CB）20 mmol/L MES135 mmol/L NaCI0.5
持针钳钳头端摆动量测试仪－－－徽涛
持针钳钳头端摆动量测试仪 一，用途采用可编程控制器，触摸屏，压力传感器，加压装置，机载打印机等组成，中英文菜单显示，人机对话设定各项参数自动运行测试。生产单位，批次可任意输入，操作方便。并采用三级密码，信息安全可靠。产品规格、测试压力值设定、保持时间设定，打印设定、测试、加压、减压、时间、标定，
什么是电压钳与膜片钳，有什么区别？
电压钳技术是通过向细胞内注射一定的电流，抵消离子通道开放时所产生的离子流，从而将细胞膜电位固定在某一数值。由于注射电流的大小与离子流的大小相等、方向相反，因此它可以反映离子流的大小和方向。膜片钳技术钳制的是膜片，是指采用尖端经过处理的微电极与细胞膜发生紧密接触，使尖端下的这片细胞膜在电学上与其它
四膜虫的保存实验
实验材料 健康细胞试剂、试剂盒 蛋白酶胨仪器、耗材 培养试管实验步骤 1. 将少许健康细胞无菌转入装有 5 ml 无菌的 0.1 mg/ml 蛋白酶胨的带旋帽的培养试管中。2. 将试管帽旋松，在室温下垂直保存细胞。
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层，分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞)．其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用，该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能；B型细胞的功能是合成输出蛋白且与透明质酸酶的形成密切相关，同时与
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层，分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞)．其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用，该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能；B型
四膜虫的保存实验
四膜虫的短期贮存 四膜虫在保存培养基中的长期贮存 四膜虫在大豆培养基中长期贮存 四膜虫的冷冻 冷冻四膜虫的融解 实验材料
人滑膜细胞培养实验
实验方法原理 滑膜细胞是衬于关节内表面的细胞性内膜和内膜下层，分为A型滑膜细胞(滑膜巨噬细胞)和B型滑膜细胞(滑膜成纤维细胞)．其中A型细胞最显著的功能是吞噬作用和胞饮作用，该型细胞具有吞噬坏死细胞碎屑及病理状态下关节腔内其他物质的功能；B型
转膜实验原理与操作步骤
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定，是进行各种后续研究(如 RFLP 分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的： 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理： 1. 转膜的方式： 向上的毛细管
四膜虫的保存实验
四膜虫的短期贮存 四膜虫在保存培养基中的长期贮存 四膜虫在大豆培养基中长期贮存 四膜虫的冷冻 冷冻四膜虫的融解 实验材料
四膜虫的保存实验——四膜虫的冷冻
实验材料细胞试剂、试剂盒Tris仪器、耗材培养基实验步骤1. 在培养基中将细胞培养至对数生长中期。如需要，可使用抗生素和/或杀真菌剂。2. 在 pH 7.4 的 10 mmol/L Tris 中低速离心轻洗细胞 1 次，弃上清，低速离心重悬细胞，弃上清。3. 用 10 mmol/L Tris 重悬细
膜片钳的简介
膜片钳又称单通道电流记录技术，用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又称巨阻封接，被孤立的小膜片面积为μm量级，内中仅有少数离子通道。然后对该膜片实行电压钳位，可测量单个离子通道开放产生的pA（10的负12次方安培）量级的电流，这种通道开放是一种随机过程
膜片钳记录技术
中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定 义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住（钳住）细胞膜片表面，然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
钳位均匀电场电泳
中文名称钳位均匀电场电泳英文名称contour-clamped homogeneous electric field electrophoresis;CHEF electrophoresis定 义琼脂糖凝胶分离长度大于40 kb的线状DNA分子所用的脉冲场电泳中的一种设计。其装置为分压器环路中呈六
膜片钳技术简介
膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术（Conventional patch clamp technique）发展到全自动膜片钳技术（Automated patch clamp technique）。 传统膜片钳技术每次只能记录
液压钳的工作原理
液压钳指的是专门用于电力工程中对电缆和接线端子进行压接的专业液压工具。 液压钳分为分离式/整体式电缆液压钳、机械电缆接线钳、钢芯电缆液压钳、手动液压钳、电动液压钳等几大类。 结构原理：压接钳由油箱、动力机构、换向阀、卸压阀、泵油机构组成，泵油机构由油泵体、高、低压油出油孔、偏心
膜片钳技术原理
可兴奋膜的电学模型 细胞膜由脂类双分子层和和蛋白质构成。脂质层的电导很低，由于双分子层的结构特点，形成了细胞的膜电容，通道蛋白的开闭状况主要决定了膜电导的数值。在细胞膜的电学模型中，膜电容和膜电导构成了一个并联回路。在细胞膜的电兴奋过程中，脂质层膜电容的反应是被动的，其电流电压曲线是线
钳形相位表概述
钳形相位表即SMG2000E数字双钳相位伏安表是专为现场测量电压、电流及相位而设计的一种高精度、低价位、便携手持式、双通道输入测量仪器。用该表可以很方便地在现场测量U-U、I-I及U-I之间的相位，判别感性、容性电路及三相电压的相序，检测变压器的接线组别，测试二次回路和母差保护系统，读出差动保
膜片钳记录和分析技术（一）
细胞是动物和人体的基本组成单元，细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的，离子和离子通道是细胞兴奋的基础，亦即产生生物电信号的基础，生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科—电生理学（electrophysiology），即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小
四膜虫的保存实验——四膜虫的短期贮存
实验材料健康细胞试剂、试剂盒蛋白酶胨仪器、耗材培养试管实验步骤1. 将少许健康细胞无菌转入装有 5 ml 无菌的 0.1 mg/ml 蛋白酶胨的带旋帽的培养试管中。2. 将试管帽旋松，在室温下垂直保存细胞。
四膜虫的保存实验—冷冻四膜虫的融解
实验材料细胞仪器、耗材培养基冷冻管实验步骤1. 将 25~50 ml 培养基预热至 30℃。2. 将冷冻管放入 38~40℃ 的热水浴中搅拌，快速温暖细胞，直接加入一些预热的培养基。3. 一旦沉淀层松动，将其倒入装有预热培养基的培养瓶中。4. 30℃ 过夜孵育，中速振摇。5. 次日检测细胞生存力。
WESTERN－BLOT实验中转膜时滤纸和膜的大小有什么要求
1 滤纸是上下都有的 之所以小一点儿 是怕上下的滤纸边缘直接短路，相连导致电子不能从胶穿过，这样不能达到很好的转移效率2 可以用BSA，具体多大浓度，可以参照脱脂奶粉的3 这个检测没多大用处吧 如果非要探讨这个问题 可以拿转完的胶再去染色（考马斯亮蓝或银染）4 显色系统 基本就是HRP催化的DAB
WESTERN－BLOT实验中转膜时滤纸和膜的大小有什么要求
1 滤纸是上下都有的 之所以小一点儿 是怕上下的滤纸边缘直接短路，相连导致电子不能从胶穿过，这样不能达到很好的转移效率2 可以用BSA，具体多大浓度，可以参照脱脂奶粉的3 这个检测没多大用处吧 如果非要探讨这个问题 可以拿转完的胶再去染色（考马斯亮蓝或银染）4 显色系统 基本就是HRP催化的DAB