PEI沉淀法分级分离可溶性提取物实验

试剂、试剂盒 提取液硫酸铵聚乙烯亚胺 缓冲液 A二硫苏糖醇仪器、耗材 Tissuc-TearorTM 匀浆器实验步骤 材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-55)硫酸铵 (AMS)试剂聚乙烯亚胺 (PEI)(10% 储液,pH7.9)缓冲液 A缓冲液 A+0.3mol/LNaCl缓冲液 A+0,9mol/LNaCl二硫苏糖醇 (DTT)(0.1moVL)(配方,见“试剤的配制” PP.I84~189)操作程序1) 将 0.75 ml10%PEI 液加入体积约为 24 ml 的可溶性提取物 (0.2%DOC 上清) 中, 使 PEI 终浓度为 0.3%。混合后,4°C 下静置 15 min。方案补充实验:加 PEI 前,取 6x50ul 的 0.2%DC 上清,用以确定沉淀σ32 和 R......阅读全文

PEI-沉淀法分级分离可溶性提取物实验

材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-55)硫酸铵 (AMS)试剂聚乙烯亚胺 (PEI)(10% 储液,pH7

PEI-沉淀法分级分离可溶性提取物实验

试剂、试剂盒 提取液硫酸铵聚乙烯亚胺 缓冲液 A二硫苏糖醇仪器、耗材 Tissuc-TearorTM 匀浆器实验步骤 材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-5

PEI-沉淀法分级分离可溶性提取物实验

试剂、试剂盒提取液硫酸铵聚乙烯亚胺缓冲液 A二硫苏糖醇仪器、耗材Tissuc-TearorTM 匀浆器实验步骤材料与设备提取液〔0.2% 脱氧胆酸钠 (DOC) 上清,见实验 1,P.146~147〕Tissuc-TearorTM 匀浆器(Fisher Scientific 15-338-55)硫酸

Transfection-with-PEI

实验概要Use PEI (Linear 25 kDa Reagent) to transfect in HEK293T cells.主要试剂PEI is polyethyleimine, a 25 kDa linear from Polysciences Inc. Make up solutio

PEI-转染法

材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI (聚乙烯亚胺)1×HBS (pH7.4)配方:PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。1×HBS (pH7.4): 将8.76 g NaCl 溶解

PEI转染手册

使用方法1. 接种细胞:用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板,以便在转染时,贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注:培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1)转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面,以转染 24

PEI-转染法

材料: 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI (聚乙烯亚胺) 1×HBS (pH7.4) 配方: PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。 1×HBS (pH7.4): 将8.76 g

pei瞬时转染原理

pei瞬时转染技师的原理瞬时转染是指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内(主要指HEK293细胞),该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。

为什么要将pei加到质粒里

这是程序就这么设计的。无论是转染还是转化,其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上,人们往往也通称转染为广义的转化。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。pei原理:外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、

PEI亚纳米多孔分离膜研究获进展

近期,中国科学院近代物理研究所材料研究中心与中山大学、河北大学等,利用重离子束辐照技术制备出具有优异离子分离性能的聚醚酰亚胺(PEI)亚纳米多孔分离膜。相关研究成果以Efficient ion sieving and ion transport properties in sub-nanoporou

pei配制转染需要培养基无血清吗

需要,因为血清组分复杂,会影响转染复合物的形成。

沉淀法的原理

从液相中产生一个可分离的固相的过程,或是从过饱和溶液中析出的难溶物质。沉淀作用表示一个新的凝结相的形成过程,或由于加入沉淀剂使某些离子成为难溶化合物而沉积的过程。产生沉淀的化学反应称为沉淀反应。物质的沉淀和溶解是一个平衡过程,通常用溶度积常数Ksp来判断难溶盐是沉淀还是溶解。溶度积常数是指在一定温度

分步沉淀法工艺

浸铜后渣经过硫酸化焙烧后,将酸化渣浆化后cu、Ni、Fe、Ag均以硫酸盐的形式存在于溶液中,要将这些硫酸盐分离比较困难。浸铜后渣硫酸盐分离沉淀过程是按银、铜、镍的先后顺序进行析出的。因此要实现其分离,简单可行的方法是将这些金属离子转化成钠盐或碳酸盐的沉淀。因此本体系中所选择的药剂是碳酸钠。而经酸化焙

化学沉淀法简介

  向废水中投加某些化学物质,使它和废水中欲去除的污染物发生直接的化学反应,生成难溶于水的沉淀物而使污染物分离除去的方法。但由于化学法普遍要加入大量的化学药剂,并成为沉淀物的形式沉淀出来。这就决定了化学法处理后会存在大量的二次污染,如大量废渣的产生,而这些废渣的处理目前尚无较好的处理处置方法,所以对

粪便检测沉淀法

实验方法原理适用于大多数蠕虫卵及部分原虫包囊的检测。可分为自然沉淀法、离心沉淀法及汞碘醛离心沉淀法。实验步骤1. 自然沉淀法(1)以玻棒挑取粪便20~30g,通过40~60目铜筛调匀滤入盛满清水的锥形玻璃量杯中,静置25分钟;(2)倾去上层粪液,仅留沉淀物,再加满清水,按每隔20分钟换水1次,反复3

粪便检测沉淀法

实验方法原理 适用于大多数蠕虫卵及部分原虫包囊的检测。可分为自然沉淀法、离心沉淀法及汞碘醛离心沉淀法。实验步骤 1. 自然沉淀法(1)以玻棒挑取粪便20~30g,通过40~60目铜筛调匀滤入盛满清水的锥形玻璃量杯中,静置25分钟;(2)倾去上层粪液,仅留沉淀物,再加满清水,按每隔20分钟换水1次,反

从-PEI-沉淀洗脱σ32-和-RNA-聚合酶实验

            试剂、试剂盒 缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A 仪器、耗材

从-PEI-沉淀洗脱σ32-和-RNA-聚合酶实验

试剂、试剂盒缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)试剂缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNa

从-PEI-沉淀洗脱σ32-和-RNA-聚合酶实验

试剂、试剂盒 缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)试剂缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol

用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——丙酮沉淀法

实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒丙酮(或其他有机溶剂如乙醇或甲醇)仪器、耗材Eppendorf 管(小塑料离心管)Eppendorf 管离心机(小型台式离心机)混旋器实验步骤1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 样品溶液,混匀。2. -20℃: 放置 10 min。3. 小型台式离

TCA沉淀法定量DNA

1. Dilute radioactive sample to a 100 ml volume2. Spot 5 ml of the sample onto the center of a 2.4 cm Whatman GF/C glass-fiber disc.3. Mix 5 ml of the

什么是化学沉淀法

1、概念化学沉淀法是指向废水中投加某些化学药剂(沉淀剂),使之与废水中溶解态的污染物直接发生化学反应,形成难溶的固体生成物,然后进行固液分离,从而除去水中污染物的一种处理方法。2、去除对象废水中的重金属离子(如汞、镉、铅、锌、镍、铬、铁、铜等)、碱土金属(如钙和镁)及某些非金属(如砷、氟、硫、硼)均

絮凝沉淀法的概述

  即选用无机絮凝剂和有机阴离子配制成水溶液加入废水中,便会产生压缩双电层,使废水中的悬浮微粒失去稳定性,胶粒物相互凝聚使微粒增大,形成絮凝体、矾花。絮凝体长大到一定体积后即在重力作用下脱离水相沉淀,从而去除废水中的大量悬浮物,从而达到水处理的效果。为提高分离效果,可适时、适量加入助凝剂。

分步沉淀法除铁

铁无论在镍系统还是在铜系统都是一种不易除去的杂质,铁量越高,则电效越低,还影响镍和铜的化学品级率,因此将金属回收工段作为铜和镍系统的主要排杂工序。然而要想用中和承解法将含铁30g/L的浆化浸出液中的铁除去,不但不好过滤,且镍、铜损失较大。因此冶炼厂采用的除铁工艺是黄钠铁矾除铁法工艺。(1)温度:从黄

简述分步沉淀法工艺

  浸铜后渣经过硫酸化焙烧后,将酸化渣浆化后cu、Ni、Fe、Ag均以硫酸盐的形式存在于溶液中,要将这些硫酸盐分离比较困难。  浸铜后渣硫酸盐分离沉淀过程是按银、铜、镍的先后顺序进行析出的。因此要实现其分离,简单可行的方法是将这些金属离子转化成钠盐或碳酸盐的沉淀。因此本体系中所选择的药剂是碳酸钠。而

分步沉淀法工艺介绍

浸铜后渣经过硫酸化焙烧后,将酸化渣浆化后cu、Ni、Fe、Ag均以硫酸盐的形式存在于溶液中,要将这些硫酸盐分离比较困难。浸铜后渣硫酸盐分离沉淀过程是按银、铜、镍的先后顺序进行析出的。因此要实现其分离,简单可行的方法是将这些金属离子转化成钠盐或碳酸盐的沉淀。因此本体系中所选择的药剂是碳酸钠。而经酸化焙

用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——三氯醋酸沉淀法

实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒100%三氯醋酸(TCA)0.1N NaOH(400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸馏水)实验步骤1. 在 1ml 样品中至少要含有 5mg 蛋白质。加 100 ul 100% 的三氯醋酸(TCA),混匀;2. 将蛋白质在冰浴中沉淀 30 min (或在冷冻

有机溶剂沉淀法浓缩蛋白质实验——有机溶剂沉淀法

实验方法原理将有机溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白质溶液时,和高浓度盐类似产生沉淀,这是因为它们能够降低蛋白质的溶解度。在温度为 10 ℃ 左右时蛋白质在有机溶剂中容易变性,所以在沉淀时必须特别注意冷却溶液和离心转头(0 ℃~4 ℃ 为佳),建议离子强度为 0.05~0.2 mol/L。有机溶剂的浓度按体

关于试剂沉淀法的介绍

  例如在生物碱盐的溶液中,加入某些生物碱沉淀试剂(见生物碱性质下),则生物碱生成不溶性复盐而析出。水溶性生物碱难以用萃取法提取分出,常加入雷氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉淀析出。又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、甘草皂甙均易溶于碱性溶液,当加入酸后可使之沉淀析出。某些蛋白质溶液,可以变更溶液的值利用其在等电点

絮凝沉淀法的相关介绍

  絮凝沉淀是颗粒物在水中作絮凝沉淀的过程。在水中投加混凝剂后,其中悬浮物的胶体及分散颗粒在分子力的相互作用下生成絮状体且在沉降过程中它们互相碰撞凝聚,其尺寸和质量不断变大,沉速不断增加。悬浮物的去除率不但取决于沉淀速度,而且与沉淀深度有关。地面水中投加混凝剂后形成的矾花,生活污水中的有机悬浮物,活