固定化酶到聚酯的实验
实验方法原理 聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET,Terylene,Trevira,Diolen)是通过对苯二酸盐和乙烯乙二醇的缩聚形成的,在这两步过程中三氯化锑作为催化剂(图 1)。用过量的乙烯乙二醇,最初形成一个低分子质量的具有末端竣基的聚合物再通过乙烯乙二醇的分裂转变为一个大分子的聚合物。图 1 聚酯是通过对苯二酸盐和乙烯乙二醇的缩聚反应而形成的。两分子的乙烯乙二醇与二甲基苯二酸盐以三氧化锑作为催化剂进行反应形成低分子的多聚物(n),通过乙烯乙二醇的分裂转变为大分子的聚合物(m) 由于聚酯无极性的表面所以它不适合作为酶固定的支持物。聚酯和黏性纤维(Rayon)的共聚物更适合这些纤维素的成分增加了亲水的特性,并且为固定化提供了羟基。这个步骤描述了聚酰胺的固定过程,如 CH-酸原子的烷化或部分水解,这些都适用于聚酯。实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 二氯甲醇己二胺二环己基碳二亚胺磷酸......阅读全文
固定化酶到聚酯的实验
实验方法原理 聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET,Terylene,Trevira,Diolen)是通过对苯二酸盐和乙烯乙二醇的缩聚形成的,在这两步过程中三氯化锑作为催化剂(图 1)。用过量的乙烯乙二醇,最初形成一个低分子质量的具有末端竣基的聚合物再通
固定化酶到聚酯的实验
实验方法原理聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET,Terylene,Trevira,Diolen)是通过对苯二酸盐和乙烯乙二醇的缩聚形成的,在这两步过程中三氯化锑作为催化剂(图 1)。用过量的乙烯乙二醇,最初形成一个低分子质量的具有末端竣基的聚合物再通过乙烯
固定化酶到聚酯的实验
基本方案 实验方法原理 聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET,Terylene,Trevira,Diolen)是通过
聚酰胺部分水解后固定化酶到羧基实验
实验方法原理 自由氨基的封闭是通过在冰浴的 1%(质量浓度)亚硝酸钠的 0.5 mol/L 盐酸溶液中处理后,进一步在 40℃ 的该溶液中孵化 20 min 来实现的。实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 盐酸己二胺二环己基碳二亚胺磷酸钾NaCl实验步骤 1. 自由竣基的活化聚酰胺小片在溶有 10 g/l
聚酰胺部分水解后固定化酶到羧基实验
实验方法原理自由氨基的封闭是通过在冰浴的 1%(质量浓度)亚硝酸钠的 0.5 mol/L 盐酸溶液中处理后,进一步在 40℃ 的该溶液中孵化 20 min 来实现的。实验材料酶溶液试剂、试剂盒盐酸己二胺二环己基碳二亚胺磷酸钾NaCl实验步骤1. 自由竣基的活化聚酰胺小片在溶有 10 g/l 己二胺和
聚酰胺部分水解后固定化酶到氨基实验
实验方法原理聚酰胺的部分水解是酶固定的一种简单的方法,然而,必须注意避免聚酰胺结构的大量分解。固定的反应有 4 步:1. 聚合体材料的蚀刻法用于增加表面区域和亲水性;2. 氨基的部分分裂;3. 自由氨基或羧基的活化;4. 酶结合到有活性的聚合物上。实验材料酶溶液试剂、试剂盒硼酸盐缓冲液甲醇戊二醛Ca
聚酰胺部分水解后固定化酶到羧基实验
实验方法原理自由氨基的封闭是通过在冰浴的 1%(质量浓度)亚硝酸钠的 0.5 mol/L 盐酸溶液中处理后,进一步在 40℃ 的该溶液中孵化 20 min 来实现的。实验材料酶溶液试剂、试剂盒盐酸己二胺二环己基碳二亚胺磷酸钾NaCl实验步骤1. 自由竣基的活化聚酰胺小片在溶有 10 g/l 己二胺和
聚酰胺部分水解后固定化酶到氨基实验
基本方案 实验方法原理 聚酰胺的部分水解是酶固定的一种简单的方法,然而,必须注意避免聚酰胺结构的大量分解。固定的反应有 4 步:1. 聚合体材料的蚀刻法用于增
聚酰胺部分水解后固定化酶到羧基实验
基本方案 实验方法原理 自由氨基的封闭是通过在冰浴的 1%(质量浓度)亚硝酸钠的 0.5 mol/L 盐酸溶液中处理后,进一步在 40℃ 的该溶液中
固定化酶固定化酶与游离酶相比的优点
固定化酶与游离酶相比的优点:①极易将固定化酶与底物、产物分开;②可以在较长时间内进行反复分批反应和装柱连续反应;③在大多数情况下,能够提高酶的稳定性;④酶反应过程能够加以严格控制;⑤产物溶液中没有酶的残留,简化了提纯工艺;⑥较游离酶更适合于多酶反应;⑦可以增加产物的收率,提高产物的质量;⑧酶的使用效
固定化细胞和固定化酶比较
固定化细胞:优点: 固定化细胞内酶的活性基本没有损失。缺点: 固定化细胞只能用于生产细胞外酶。固定化酶:优点:容易与水溶性反应物和产物分离。缺点: 一种酶只催化一种化学反应,而产物形成是通过一系列酶促反应得到的.
酶固定化技术固定化方法比较
1 吸附法吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。2 包埋法包埋固定化
固定化酶固定化酶与水溶性酶相比的优缺点
优点:①固定化酶可重复使用,使酶的使用效率提高、使用成本降低。②固定化酶极易与反应体系分离,简化了提纯工艺,而且产品收率高、质量好。③在多数情况下,酶经固定化后稳定性得到提高。④固定化酶的催化反应过程更易控制。⑤固定化酶具有一定的机械强度,可以用搅拌或装柱的方式作用于底物溶液,便于酶催化反应的连续化
固定化酶简介
固定化酶(immobilized enzyme)是20世纪60年代发展起来的一种新技术。所谓固定化酶,是指在一定的空间范围内起催化作用,并能反复和连续使用的酶。通常酶催化反应都是在水溶液中进行的,而固定化酶是将水溶性酶用物理或化学方法处理,使之成为不溶于水的,仍具有酶活性的状态。
固定化酶的简介
酶固定化后一般稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用。便于运输和贮存,有利于自动化生产,但是活性降低,使用范围减小,技术还有发展空间。固定化酶是近十余年发展起来的酶应用技术,在工业生产、化学分析和医药等方面有诱人的应用前景。
酶固定化的定义
中文名称酶固定化英文名称enzyme immobilization定 义通过将酶包埋于凝胶、微囊体内,或通过共价键、离子键或吸附连接至固相载体上,或通过交联剂使酶分子互相交联等方法使酶不溶或局限在一个有限的空间内的过程。可使酶反复使用,便于酶与产物分离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶
固定化酶的缺点
固定化酶的缺点:①许多酶在固定化时,需利用有毒的化学试剂使酶与支持物结合,这些试剂若残留于食品中对人类健康有很大的影响;②连续操作时,反应体系中常滋生一些微生物,后者利用食品的养分进行生长代谢,污染食品;③固定化时,酶活力有损失;④增加了生产的成本,工厂初始投资大;⑤只能用于可溶性底物,而且较适用于
固定化酶的应用
酶工程作为生物工程4个组成部分之一,已广泛应用于工业生产中的食品、医药、纺织等部门,但天然酶稳定性低,对高温、有机溶剂极其敏感,易失活,不能重复使用,反应后混入产品,使产品难以纯化。而通过物理或化学的方法,将酶固定于载体上,所得的酶不仅保留了酶原有的高活性、高选择性,并且克服了天然酶的缺点,还便于反
酶固定化技术固定化方法吸附法
吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。
酶固定化技术固定化方法吸附法
吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。
酶固定化技术固定化方法交联法
交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联,使酶分子和多功能试剂之间形成共价键,得到三向的交联网架结构,除了酶分子之间发生交联外,还存在着一定的分子内交联。多功能试剂制备固定化酶方法可分为:( 1) 单独与酶作用;( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联;( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载
酶固定化技术固定化方法特点对比
各类固定化方法的特点比较:比较项目吸附法结合法交联法包埋法物理化学方法分类物理吸附化学共价键结合物理离子键结合化学键连接物理包埋制备难易易难易较难较难固定化程度弱强中等强强活力回收率较高低高中等高载体再生可能不可能可能不可能不可能费用低高低中等低底物专一性不变可变不变可变不变适用性酶源多较广广泛较广
酶固定化技术固定化方法结合法
酶蛋白分子上与不溶性固相支持物表面上通过离子键结合而使酶固定的方法,叫离子键结合法。其间形成化学共价键结合的固定化方法叫共价键结合法。共价键结合法结合力牢固,使用过程中不易发生酶的脱落,稳定性能好。该法的缺点是载体的活化或固定化操作比较复杂,反应条件也比较强烈,所以往往需要严格控制条件才能获得活力较
酶固定化技术固定化方法包埋法
包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中,而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相接触。这个方法比较简便,酶分子仅仅是被包埋起来,生物活性被破坏的程度低,但此法对大分子底物不适用。1) 网格型将酶或包埋在凝胶细微网格中,制成一定形状的固定化酶,称为网格型包埋法。也称为凝胶包埋法。2)
微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验
实验方法原理 实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 碳酸氢钠癸二酰二氯化合物溶液磷酸钾NaCl实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」相同体积的酶和 1,6-己烷溶液混合,为了尼龙珠子在形成的时候彼此不相互接触,癸二酰二氯化合物溶液用微量注射器缓慢注入混合液中。5 min 后,有机相被轻轻倒出,在有
微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验
实验方法原理实验材料酶溶液试剂、试剂盒碳酸氢钠癸二酰二氯化合物溶液磷酸钾NaCl实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」相同体积的酶和 1,6-己烷溶液混合,为了尼龙珠子在形成的时候彼此不相互接触,癸二酰二氯化合物溶液用微量注射器缓慢注入混合液中。5 min 后,有机相被轻轻倒出,在有机溶液完全挥发后
微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验
微胶囊化尼龙珠法 实验方法原理 实验材料 酶溶液
关于酶固定化技术的新型固定化方法介绍
1、光耦联法 光偶联法是使用光敏性单体聚合物包埋具有光敏基团载体的共价固定化酶或者普通的固定化酶,在温和的条件下实现转化,因此获得的固定化酶往往有着比较高的酶活力。 2、等离子体法 等离子体可以修饰载体材料表面,从而实现活性基团引入,达到固定化的目的。
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
实验方法原理 丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
实验方法原理丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合物网孔尺寸