糖的硅胶G薄层层析实验
实验方法原理 硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的 Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关,经过适当的溶剂展开后,糖在薄层上的移动速度是戊糖>己糖>双糖>三糖。实验材料 糖标准溶液 乙酸乙酯 乙酸 氯仿 甲醇 硫酸 二苯胺 苯胺 磷酸 丙酮试剂、试剂盒 多糖仪器、耗材 层析缸 硅胶 G 板 毛细管 烘箱 电吹风机 试管 试管架实验步骤 溶液配制:1 . 糖标准溶液: 木糖、葡萄糖、果糖和蔗糖10 mg/ml 水溶。 2 . 样品液:多糖的水解液。 3 . 展开剂: ①乙酸乙酯∶乙酸∶水=2∶1∶1;②氯仿∶甲醇=60∶40(V/V)。 4 . 显色剂: ①25%~50%硫酸;②二苯胺1......阅读全文
糖的硅胶G薄层层析实验——薄层层析
实验方法原理硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的 Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关,经过
糖的硅胶G薄层层析实验
实验方法原理 硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的 Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟
糖的硅胶G薄层层析实验
薄层层析 实验方法原理 硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的
可溶性糖的硅胶g薄层层析注意事项
可溶性糖的硅胶g薄层层析注意事项分别如下:1、样品的准备:样品应该充分溶解并过滤,以去除任何杂质和固体颗粒。2、硅胶G的选择:硅胶G的选择应该根据样品的性质和分离要求来确定。3、层析板的准备:层析板应该先在烘箱中烘干,然后在实验室中冷却,以避免吸收水分。4、样品的施加:样品应该均匀地施加在硅胶G层上
可溶性糖的硅胶G薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)
一、实验目的1.了解薄层层析测定可溶性糖的原理。2.掌握硅胶G 薄层层析的操作方法。二、实验原理薄层层析(简称TLC)是一种微量而快速的层析方法,是在吸附剂或支持剂均匀涂布的薄层上进行的,故称薄层层析。为了使所要分析的样品各组分得到分离,必须选择合适的吸附剂。硅胶、氧化铝和聚酰胺是广泛采用的吸附剂,
如何自制薄层层析硅胶板
1.取25g 羧甲基纤维素钠,在搅拌下加入到5000mL 水中,强力摇匀,放置备用。使用时,用300 目丝网过滤,所得滤液即为铺制薄层板的优质CMC 溶液。(由于CMC 在水中溶解速度很慢,放置两周或更长的时间,才可以溶解比较完全。可以采用一次性配制较多的溶液,留待以后多次使用。尽管放置较长时间,C
薄层层析用的硅胶板如何活化
薄层层析用的硅胶板放在105度环境中烘30min即可完成活化。刚打开的塑料封装的可以不活化,打开放置一段时间后再用是需要活化。 活化的目的是除除硅胶中吸附的水分子,增加硅胶板的吸附能力。还有一个非常简单的判别分类的办法就是,不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同,这一点体现在硅胶的粘稠度不同,石膏含量
薄层层析用的硅胶板如何活化
薄层层析用的硅胶板放在105度环境中烘30min即可完成活化。刚打开的塑料封装的可以不活化,打开放置一段时间后再用是需要活化。 活化的目的是除除硅胶中吸附的水分子,增加硅胶板的吸附能力。 还有一个非常简单的判别分类的办法就是,不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同,这一点体现在硅胶的粘稠度不同,
关于薄层层析硅胶的基本信息介绍
薄层层析硅胶是白色粒状粗孔硅胶,不溶于水和有机溶剂。在空气中吸潮。薄层层析硅胶是用于薄层层析的一种化学试剂。薄层层析是一种新型的简易、快速、灵敏的分析方法。这种方法可以用来鉴定物质的纯度,不仅用于定性分析,也可用于定量分析。由于薄层层析方法具有设备和操作都很简单,容易推广,层析展开时间短,分离效
糖的聚酰胺薄层层析
一、实验目的1.熟悉掌握薄层层析的实验操作。2.了解聚酰胺薄层层析法测定糖的原理和方法。二、实验原理用于层析的聚酰胺有两类,一类是锦纶66(尼龙),另一类是锦纶6。在这两类材质中,都含有大量酰胺基团,故统称聚酰胺。聚酰胺以其-CO-或-NH-与极性化合物的-OH 或=O 之间形成氢键,从而发
实验室用薄层层析硅胶板可以通过哪些方法获得?
在做分离分析鉴定时,会使用到薄层层析鉴定技术,而薄层层析硅胶板就是这其中的一个重要工具。通常可通过以下方式获得:1、手工自制板1)玻璃板的要求:用于制备薄层板的玻璃板要求表面光洁、平整,建议使用厚薄1~2mm的优质平板玻璃,普通窗玻璃一般不宜用于制作薄层板,玻璃板需洗净至不挂水,晾干,贮存于干燥洁净
硅胶柱层析
洗脱剂:极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸装柱:将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯
薄层色谱硅胶板
薄层色谱硅胶板手工铺制层析板耗费时间较长,为方便使用,目前可以直接从市场上获取标准的层析板。商用层析板一般会标注G、H、GF、HF;其中G表示凝固剂,H则不含凝固剂,G的价格通常低于H;F则代表 荧光
薄层层析中的硅胶在使用前为什么要活化
活化硅胶有利于提高硅胶的吸附性能,同时排除硅胶内部已吸收的水分及其他气体.通过活化硅胶,主要改变了硅胶内部的微孔结构,使其孔径的大小及微孔结构的排列得到进一步的改善.
薄层层析中的硅胶在使用前为什么要活化
活化硅胶有利于提高硅胶的吸附性能,同时排除硅胶内部已吸收的水分及其他气体。通过活化硅胶,主要改变了硅胶内部的微孔结构,使其孔径的大小及微孔结构的排列得到进一步的改善。
薄层层析的薄层层析的分析程序
将样品溶液用毛细管点在薄层板的一端,置密闭槽中,加入适宜溶剂为流动相。由于毛细管原理,溶剂被吸上,沿板移动,并带动样品中各组分向前移动,这个过程称为展开。由于各组分性质不同,移动距离不同,展开一定距离后,即得互相分离的组分斑点。可用适当方法使各组分在板上显示其位置,如组分本身有颜色,即可直接观察,否
薄层层析(TLC)实验操作步骤
薄层色谱(TLC )是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用
糖的薄层层析应注意哪些关键技术
与其他物质的层析技术一样1、为了使所要分析的样品各组分得到分离,必须选择合适的吸附剂。2、为了使所要分析的样品各组分得到分离,必须选择合适的吸附剂。例如糖在硅胶G薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关,经过适当的溶剂展开后,糖在薄板上的移动速度是戊糖>己糖>双糖>三糖。若用硼酸溶液市制硅胶G可改进
薄层层析
Reaction volume 100 ul5 ul NADPH (100 mM)x ul cell extract so you get 50 % conversion0.2 uM C14-Testosteroneadd Tris-Citrate Buffer pH 6 to an endvolu
硅胶柱层析原理
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离,一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。[编辑本段]硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系
柱层析硅胶原理
硅胶层析法分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 极性较大的物质与硅胶作用强,保留时间长,极性弱的物质与硅胶作用弱,保留时间短,物质在固定相与流动相间通过反复的吸附、解吸过程,得以分离。
硅胶柱层析的操作技术
硅胶柱层析的原理利用吸附原理,即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异,而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。硅胶柱层析的操作方法及注意事项 :装柱 操作要点:装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。 有干法装柱和湿法装柱两种方法(1)干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流
硅胶层析的注意事项
先根据TLC方法筛选好洗脱剂,使两相邻物质Rf值之差最大化 将柱子必须装平整、均匀 考虑有限柱填料的吸附量 可考虑用剃度法分开并洗脱 柱层析分离的实验方法和技巧1B= vrGq常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几
氨基酸的薄层层析实验原理
聚酰胺薄膜层析是60年代以后发展起来的一种新的层析方法,特别适用于氨基酸及其衍生物的分析。具有灵敏度高、分辨率强、操作方便快捷等特点。 聚酰胺是一类化学纤维素原料,即锦纶(尼龙)。由乙二酸和乙二胺聚合而成的,称锦纶66。 由于分子中含有大量的酰胺基团,故称聚酰胺。聚酰胺薄膜是在涤纶片基上涂上
细菌细胞壁糖的薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)(1)
一、实验目的1.熟悉薄层层析的操作步骤。2.掌握薄层层析法分析细菌细胞壁糖的原理和方法。二、实验原理簿层层析是一种微量而快速的层析方法。该方法是把吸附剂或支持剂(例如硅胶或硅藻土)涂在玻璃板上成为一簿层,将要分析的样品滴加到薄层上,然后用合适的溶剂进行展开,使样品中各个成分分离,最后进行定性鉴定和定
细菌细胞壁糖的薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)(2)
四、操作步骤(一)菌体培养及样品的准备1.菌体培养:以枯草芽孢杆菌为例。培养基成分为:1%蛋白胨,0.5%氯化纳,1%牛肉汁,调pH 至7.2。将培养基装入500mL 三角瓶内,每瓶100mL,灭菌,5.52×10Pa,30分钟。灭菌后的培养基冷至约30℃,用接种环取菌株一环,接种于培养基内。摇床培
薄层层析和纸层析的异同
一、性质不同1、纸层析:用纸作为载体的一种色谱法。2、薄层层析:色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术。二、用途不同1、纸层析用途:常用于叶绿素色素、氨基酸的鉴定和测定、桔皮精油成分的测定和一些特定细胞的筛选实验。2、薄层层析用途:适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用
薄层层析和纸层析的异同
一、性质不同1、纸层析:用纸作为载体的一种色谱法。2、薄层层析:色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术。二、用途不同1、纸层析用途:常用于叶绿素色素、氨基酸的鉴定和测定、桔皮精油成分的测定和一些特定细胞的筛选实验。2、薄层层析用途:适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用
简述硅胶柱层析惯用方法
1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。 2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是
TLC柱层析中硅胶的使用
硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了,有时还会有大量的硅胶剩余,浪费硅胶,这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是 100-200 目,100 毫升硅胶的质量在47 克左右,如果装一个直径是 2.8 厘米的柱子,可以装 18 厘高。为了避免浪费硅胶和溶剂,最初学习装