蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
实验方法原理 实验材料 蛋白质二甲亚胺试剂、试剂盒 三乙醇胺盐酸盐中性缓冲液实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」混合二甲亚胺溶液,终浓度为 1~12 mg/ml,蛋白质溶于 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐中,浓度为 0.4~5 mg/ml,室温放置 3 h。用中性缓冲液透析。注意事项 其他 试剂:0.2 mol/L 三乙醇胺盐酸盐,pH 8.5二甲亚胺(二盐酸盐,Mr=273.2,用 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐制备溶液,用前现配,如 3 mg/ml)......阅读全文
磷酸交联AFFIGEL-10-亲和介质实验——肽链交联
本实验描述了将磷酸肽链/非磷酸肽链和磷酸酪氨酸交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。实验方法原理本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步
磷酸交联AFFIGEL-10-亲和介质实验——磷酸酪氨酸交联
实验方法原理磷酸酪氨酸在肽交联时所用的无水条件下是不溶的,因此交联必须在水相条件下进行。按此节的步骤最终能产生 10 ml 柱床体积的亲和树脂;与肽类似,每毫升 Affi-Gel 10上能交联 3 μmol 磷酸酪氨酸。实验材料磷酸酪氨酸Affi-Gel 10试剂、试剂盒NaOH (可选)碳酸氢钠乙
交联聚乙烯的物理交联方法介绍
辐射交联:将聚乙烯制品,如包覆在导线上的聚乙烯护套、薄膜、薄壁管等产品用γ-射线、高能射线进行照射进行交联(引发聚乙烯大分子产生自由基,形成C-C交联链)。交联度受辐射剂量及温度的影响,交联点随辐射剂量的增加而增加,因此通过控制辐射条件,可以获得具有一定交联度的交联聚乙烯制品。 用辐射交联法
关于交联聚乙烯的交联原理介绍
聚乙烯([CH2-CH2]n,n-重复单元数)是含有碳氢两种元素的高分子化合物,具有线型或支链式分子结构大分子链,常温条件下呈固态形式,在固态形式的聚乙烯中呈晶相和无定型相共存形式。聚乙烯的相对分子量在6千-30万之间。 [5] 聚乙烯的电气绝缘性能优良,但因其耐热性能不佳而影响了其用于电缆绝
磷酸交联AFFIGEL-10-亲和介质实验
实验方法原理 本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步骤最终能产生 3 ml 柱床体积的亲和树脂;每毫升Affi-Gel 10上能交联 3 μl 肽。实验材料 寡聚肽
常用交联剂与交联剂选择
什么是交联剂 交联剂是一类小分子化合物,分子量一般在200-600之间,具有2个或者更多的针对特殊基团(氨基、巯基等)的反应性末端,可以和2个或者更多的分子分别偶联从而使这些分子结合在一起。在生命科学研究中,巧妙地运用交联剂可以使很多工作取得突破。交联剂的应用 交联剂已经被广泛地应用于:
交联聚乙烯化学交联法的概述
化学交联则是采用化学交联剂使聚合物产生交联,由线性结构转变为网状结构。 交联剂的选择应视聚合物品种,加工工艺和制品性能而定,理想的交联剂除满足一些具体的要求外,还应具有如下基本要求:交联率高,交联结构稳定;加工安全性大,使用方便,加入树脂后的有效期适中,无过早或过晚交联之弊;不影响制品的加工性
蛋白质与核酸的紫外交联实验
实验方法原理含有胸苷卤代物如溴脱氧尿苷(BrdU)的DNA比非取代的DNA对紫外线诱导的 交联更为敏感。本方案中的紫外交联效率是0.1%〜10%,而且在单一复合物中出现1 次以上交联事件的情况十分罕见。实验材料含有所研究结合位点的M13单链载体试剂、试剂盒17 bp 的 M13 通用引物1×和10×
蛋白质与核酸的紫外交联实验
实验方法原理 含有胸苷卤代物如溴脱氧尿苷(BrdU)的DNA比非取代的DNA对紫外线诱导的 交联更为敏感。本方案中的紫外交联效率是0.1%〜10%,而且在单一复合物中出现1 次以上交联事件的情况十分罕见。实验材料 含有所研究结合位点的M13单链载体试剂、试剂盒 17 bp 的 M13 通用引物1×和
蛋白质与核酸的紫外交联实验
用溴脱氧尿苷(BrdU)取代的探针进行紫外交联 实验方法原理 含有胸苷卤代物如溴脱氧尿苷(BrdU)的DNA比非取代的DNA对紫外线诱导的 交联更为敏感。本方
关于交联聚乙烯化学交联的分类介绍
(1)过氧化物交联及交联剂 过氧化物交联,一般采用有机过氧化物为交联剂,在热的作用下,分解而生成活性的游离基,这些游离基使聚合物碳链上生成活性点,并产生碳一碳交联,形成网状结构。该技术需要高压挤出设备,使交联反应在机筒内进行,然后使用快速加热方式对制品加热,从而产生交联制品。所以采用过氧化物交
DNA交联的概念
中文名称DNA交联英文名称DNA crosslink定 义DNA分子的两条链或同一DNA链的不同区段的侧链间形成的共价相互作用。通过交联能增加DNA分子的刚性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
抗原准备-交联方法
化学合成的多肽抗原是小分子, 本身很难具有好的抗原性,只能诱导动物产生很弱的免疫反应,因而与载体蛋白交联是很重要的。载体蛋白含有很多抗原决定基,能够刺激T-帮助细胞,进而诱导 B-细胞反应。用于与多肽交联的载体蛋白有多种,其中*常用的是keyhole limpet hemacyanin (K
化学交联原理
化学交联是通过形成共价键将两种或多种分子连接在一起的一种化学方法。其中,共价键的形成主要依赖于使用特定的交联试剂,通常情况下,交联试剂分子都含有可与蛋白质或其他分子发生化学反应的活性基团,如氨基,巯基等。目前,交联试剂已经应用于蛋白质-蛋白质相互作用,蛋白质三维结构,及细胞膜分子结合等方面的研究
细胞化学词汇DNA交联
中文名称:DNA损伤定 义:复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变,并导致遗传特征改变的现象
细胞化学词汇DNA交联
中文名称:DNA交联英文名称:DNA crosslink定 义:DNA分子的两条链或同一DNA链的不同区段的侧链间形成的共价相互作用。通过交联能增加DNA分子的刚性。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
什么是交联聚乙烯?
聚乙烯(PE)交联技术是提高其材料性能的重要手段之一。经过交联改性的PE可使其性能得到大幅度的改善,不仅显著提高了PE的力学性能、耐环境应力开裂性能、耐化学药品腐蚀性能、抗蠕变性和电性能等综合性能,而且非常明显地提高了耐温等级,可使PE的耐热温度从70℃提高到100℃以上,从而大大拓宽了PE的应
交联染色质免疫共沉淀(XChIP)实验设计
ChIP是一种强大的确定蛋白或者组蛋白修饰在基因组上定位的实验方法。染色质被分离出来后采用抗体与抗原的结合来判定目的蛋白是否结合在特定的DNA序列上或者判定目的蛋白结合位点在全基因组范围的分布(微阵列或DNA序列)。这种方法具有空间性与时效性。该实验设计为如何在细胞中进行ChIP实验提供了详细的步骤
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验 实验方法原理 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验标签: 胰岛素受体 [125I]胰岛素 蛋白质纯化与鉴定实验指南 第四单元 实验 5本实验介绍关于胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验实验方法原理 试剂、试剂盒
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体纯化的胰岛素受体[125I] 胰岛素猪胰岛素双琥珀酰亚胺酰辛二酸二甲亚砜NH4Cl甘油SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材蛋白质凝胶电泳装置干胶器实验步骤材料与设备纯化的鼠肝细胞质膜(见本单元实验 1)部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层
紫外交联仪的特点
·为使核苷酸固定在杂交膜上,传统的方法是将膜置于80℃真空烘箱中烘2小时在本紫外交联仪上仅需在254nm紫外光下照射几秒钟即可。 ·紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5-10倍。 ·由于紫外交联仪配置了一种紫外能量程序设计系统(Joules/c㎡),即其中的时间积分仪连续检测紫外光的照射。
关于交联聚乙烯的简介
聚乙烯(PE)是五大通用塑料之一,其产量和消费量位居各种合成树脂之首,在工业、农业和日常生活中得到广泛的应用。但是聚乙烯的耐高温性能较差。力学性能及耐化学性能有时也不能满足实际使用的要求。因此对聚乙烯进行改性一直是聚乙烯产品开发应用的关键,聚乙烯交联技术就是提高其材料性能的一种重要技术。经过交联
概述交联聚乙烯的应用
交联聚乙烯由于具有优异的性能,被用作火箭、导弹、电机、变压器等所需要的耐高压、高周波、耐热的绝缘材料和电线电缆包覆物.制造热收缩管、热收缩膜、各种耐热管材、泡沫塑料、耐腐蚀的化学设备衬里、部件及容器,制造阻燃建材等。目前用量最大的领域主要是电线电缆、管材和泡沫塑料等。
什么是蛋白质交联
蛋白质在食品加工和贮藏过程中发生的物理、化学和营养变化: (1)在加热条件下的变化: 有利的方面:1)蛋白质变性,肽链松散,容易受到消化的作用,提高了消化率 和氨基酸的生物有效性;2)钝化蛋白酶、酯酶、多酚氧化酶等,防止食品在保藏期间不发生色泽和风味变化; 3)抑制外源凝集素和消除蛋白酶抑制
紫外交联的基本定义
DNA结合蛋白与DNA结合位点的结合后经紫外照射后可形成共价键。如果DNA预先经过标记,则共价结合的复合物经电泳分离和制作放射自显影图谱,能够快速准确的检测DNA结合蛋白及其分子量。
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 蛋白质 二甲亚胺
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
这种方法在各种交联反应中具有代表性,是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁,也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤,获得空间结构信息,还可获得许多链长不同的同源结合体,用于研究蛋
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
这种方法在各种交联反应中具有代表性,是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁,也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤,获得空间结构信息,还可获得许多链长不同的同源结合体,用于研究蛋
方案7-位点特异性蛋白质DNA-光交联法实验
实验材料DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切酶A 和 B单链 DNA 结合蛋白单链 DNA 模板T4 DNA 连接酶T4 DNA 聚合酶T4 多聚核苷酸激酶T7 DNA 聚合酶上游引物试剂、试剂盒10 X 退火缓冲液ATP对叠氮化苯甲酰甲溴生物素-11-dATP生物素-11-dCTP生物