磷酸交联AFFIGEL10亲和介质实验
实验方法原理 本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步骤最终能产生 3 ml 柱床体积的亲和树脂；每毫升Affi-Gel 10上能交联 3 μl 肽。实验材料 寡聚肽链（合成的）Affi-Gel 10试剂、试剂盒 二甲基亚砜（DMSO）N-甲基吗啉乙醇胺乙醇胺·HClPBS／叠氮化物高盐／高 pH 溶液高盐／低 pH 溶液NaClNaSCN仪器、耗材 聚丙烯离心管（带螺口盖）旋转混合仪IEC临床离心机真空吸液器玻璃层析柱实验步骤 1. 用 0. 5～4 倍柱床体积的 DMSO 溶解肽。2. 如下滴定中和肽溶液：每次滴加 1～2 μl 肽合成级的 N-甲基吗啉（原液或以 1:1 至 1:9 稀释于 DMSO 中），然后取出 2～3 μl 稀释于50 μl 水中，滴加到 pH 试纸上。重复上述操作直至......阅读全文
磷酸交联AFFIGEL－10－亲和介质实验
实验方法原理 本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步骤最终能产生 3 ml 柱床体积的亲和树脂；每毫升Affi-Gel 10上能交联 3 μl 肽。实验材料 寡聚肽
磷酸交联AFFIGEL－10－亲和介质实验——肽链交联
本实验描述了将磷酸肽链/非磷酸肽链和磷酸酪氨酸交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。实验方法原理本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步
磷酸交联AFFIGEL－10－亲和介质实验——磷酸酪氨酸交联
实验方法原理磷酸酪氨酸在肽交联时所用的无水条件下是不溶的，因此交联必须在水相条件下进行。按此节的步骤最终能产生 10 ml 柱床体积的亲和树脂；与肽类似，每毫升 Affi-Gel 10上能交联 3 μmol 磷酸酪氨酸。实验材料磷酸酪氨酸Affi-Gel 10试剂、试剂盒NaOH （可选）碳酸氢钠乙
DNA－亲和介质的制备实验
试剂、试剂盒ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶缓冲液乙醇胺-
DNA－亲和介质的制备实验
DNA 亲和介质的制备实验 试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶
DNA－亲和介质的制备实验（一）
试剂、试剂盒 ATP[y-32P]ATPT4多核苷酸激酶乙酸铵乙醇酚 氯仿氯仿 异戊醇NaOAcT4 DNA连接酶酚异丙醇重蒸水Sepharose CL-2B溴化氰NN-二甲基甲酰胺NaOH磷酸钾KClCNBr-活化的Sepharose*.4BHClT4 多核苷酸激酶缓冲液TE接头-激酶
DNA－亲和介质的制备实验（二）
寡核苷酸的连接1) 取 10ul 10X 接头-激酶缓冲液加入 65ul 水中，将 DNA 震荡溶解于此溶液。2) 加 20ul 20 mmol/L ATP(pH7.0) 及 5ulT4 DNA 连接酶（30Weiss 单位)，得最终反应体积为 100ul。3) 在室温下孵育≥2 h。若 AP-1
配体与活化介质的偶联实验
配体与活化介质的偶联实验 试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 Affi-Gel 10 磷
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶 实验步骤 材料与设备 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶（10%) 操作程序 1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取
蛋白质与免疫亲和介质结合实验
材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)操作程序1) 将溶解、稀释的 AMS 沉淀物和洗过的免疫亲和介质混合后，于 0、5、15 和 30 min 各取样 100-ul。2) 立即离心样品，留上清，供 SDS-PAGE 电泳分析，测
配体与活化介质的偶联实验
试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液Affi-Gel 10磷酸钠（50 mmul L）乙醇胺实验步骤材料磷酸盐缓冲液（50 mmol/L;PH7.5~8,0)Affi-Gel 10(Bio-Rad Laboratories)磷酸钠（50 mmul/L），含 NaCl(1mol/L)(PBS)乙醇胺（100 mm
序列特异性DNA结合蛋白亲和层析纯化实验DNA亲和介质制备
实验材料两种带有结合位点的合成寡核苷酸各440μg试剂、试剂盒TE缓冲液 pH 7.810×T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液20 mmol L ATP (钠盐） pH 7.0150 m Ci mL [γ-32P] ATP (6000 Ci mmol)10 U μL T4噬菌体多核苷酸激酶（New Eng
方案3－固定化金属离子亲和介质对磷酸化多肽进行分析
实验材料牛小肠碱性磷酸酶羧肽酶Y目标磷酸化蛋白TPCK 修饰的膜蛋白酶试剂、试剂盒乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基质镍-次氨基三乙酸（Ni-NTA)树脂柠檬酸钠仪器、耗材致密的反应柱子（CRC)过滤器孵育器MALDI 质谱仪MALDI 靶板微量离心管实验步骤一、固定化金属离子亲和柱
亲和色谱的介质应具备的条件
① 具有多孔网络结构 ② 非特异吸附小，基质化学性质应是惰性，表面电荷尽 可能低； ③ 理化性质稳定，不因共价偶联反应的条件及吸附条件 的变化而发生变化； ④ 基质必须能够活化或功能
亲和色谱的介质应具备的条件
① 具有多孔网络结构 ② 非特异吸附小，基质化学性质应是惰性，表面电荷尽 可能低； ③ 理化性质稳定，不因共价偶联反应的条件及吸附条件 的变化而发生变化； ④ 基质必须能够活化或功能
亲和色谱的介质应具备的条件介绍
① 具有多孔网络结构 ；② 非特异吸附小，基质化学性质应是惰性，表面电荷尽 可能低； ③ 理化性质稳定，不因共价偶联反应的条件及吸附条件 的变化而发生变化； ④ 基质必须能够活化或功能
配体与活化介质的偶联实验
试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液Affi-Gel 10 磷酸钠（50 mmul L）乙醇胺实验步骤 材料磷酸盐缓冲液（50 mmol/L;PH7.5~8,0)Affi-Gel 10(Bio-Rad Laboratories)磷酸钠（50 mmul/L），含 NaCl(1mol/L)(PBS)乙醇胺（100
GE推出新款亲和层析介质CaptoL
用电气医疗集团(GE Healthcare)近日推出了一款新的亲和层析介质Capto L，适用于抗体和抗体片段的捕获。它结合了刚性的高流速琼脂糖基质及与免疫球蛋白结合的重组蛋白L配体，这种配体对于抗体K轻链(Kappa light chain)上的可变区有很强的亲合力。因此，Capto
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
本节介绍一种利用结合细菌蛋白质的基质去除粗制免疫球蛋白中与细菌编码蛋白质发生反应成分的方法（de Wet et al.1984)。该方法也适用于利用培养的细胞或组织抽提物去除交叉反应抗体。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒缓冲液和
亲和层析实验
可溶性抗原或膜结合抗原的分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
亲和层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TrisTSA裂解缓冲液脱氧胆酸钠洗涤缓冲液三乙醇氨缓冲液仪器、耗材 层析柱离心管离心机实验步骤 1. 准备一支活化后被淬灭的Sepharose预柱（5 ml 柱床）和一支Ab-Spharose免疫亲和层析柱，并将它们串联起来。2. 以冰冷TSA溶液重悬50 g 细
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 缓冲液和溶液细胞裂解缓冲液NaOHTris-缓冲盐溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制备用于文库筛选的抗体大肠杆菌培养液仪器、耗材 离心和转子亲和层析柱溴化氢活化的 Sepharose 4B实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的组分请见附录 12将贮
亲和层析法去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 缓冲液和溶液 细胞裂解缓冲液 NaOH Tris-缓冲盐溶液 TBS Triton X-100 溶菌酶
重磅！纳微科技Protein－A－亲和层析介质新品发布
新春伊始，马力全开！纳微科技为您重磅推出Protein A 亲和层析介质新品，让您领略纳微新一代层析介质的超凡魅力！ 纳微科研人员经过多年的积累，利用自主知识产权研发出新一代Protein A 亲和层析介质Uni®Mab系列。该亲和层析介质专为大规模抗体纯化而设计，是由高纯度的Protein
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒免疫亲和介质溴化氰（CNBr)活化的 Sepharose 4BHCl55% 饱和 AMS 沉淀物偶联缓冲液乙醇胺缓冲液 BLAC 洗脱缓冲液二硫苏糖醇硫氰酸钾叠氮钠仪器、耗材Econo-柱SDS-PAGE 电泳装置实验步骤材料与设备免疫亲和介质（带固定化的 MAb NT73; 见下文)溴
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒 免疫亲和介质溴化氰（CNBr) 活化的 Sepharose 4BHCl55% 饱和 AMS 沉淀物偶联缓冲液乙醇胺缓冲液 BLAC 洗脱缓冲液二硫苏糖醇硫氰酸钾叠氮钠仪器、耗材 Econo-柱SDS-PAGE 电泳装置实验步骤 材料与设备免疫亲和介质（带固定化的 MAb NT73; 见
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒 免疫亲和介质 溴化氰（CNBr) 活化的 Sepharose 4B HCl 55% 饱和 AMS 沉淀物 偶联缓冲液