特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别特异性MHC/抗原肽复合物的细胞，即抗原特异性CTL 。二、试剂及材料1. 丝裂霉素C（Sigma）：用培养液或PBS配制300μg/ml。2. 含20%的新生牛血清的RPMI 16403. EB病毒转化的B淋巴母细胞株三、操作方法1. 特异性CTL的诱导和制备① 取作者外周血分离PBMC，无血清1640洗两遍，用含20%的新生牛血清的RPMI 1640调成1.5×106 /ml，置于24孔板中，于5% CO2 培养箱中4小时使单核细胞贴壁以去除之，然后收集细胞，计数；② 取EB病毒转化......阅读全文
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
实验概要本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别特异
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定主要应用于（1）免疫细胞功能的测定（2）临床自身免疫性疾病的诊断（3）多克隆次级信号转导分子。实验方法原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
实验试剂丝裂霉素C（Sigma）：用培养液或PBS配制300μg/ml含20%的新生牛血清的RPMI 1640实验材料EB病毒转化的B淋巴母细胞株实验步骤1. 特异性CTL的诱导和制备1) 取作者外周血分离PBMC，无血清1640洗两遍，用含20%的新生牛血清的RPMI 1640调成1.5×
细胞毒性T淋巴细胞的诱导及检测
基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培养基H
T细胞分化抗原测定
【中文名称】T细胞分化抗原测定【概述】T细胞膜表面有100多种特异性抗原，现已制备了多种单克隆抗体，WHO（1986）统称为白细胞分化抗原（cluster differentiation，CD）。例如CD3代表总T细胞，CD4代表T辅助细胞（TH），CD8代表T细胞毒性细胞（TC）等。应用这些细胞的
T细胞分化抗原测定介绍
【中文名称】T细胞分化抗原测定【概述】T细胞膜表面有100多种特异性抗原，现已制备了多种单克隆抗体，WHO（1986）统称为白细胞分化抗原（cluster differentiation，CD）。例如CD3代表总T细胞，CD4代表T辅助细胞（TH），CD8代表T细胞毒性细胞（TC）等。应用这些细胞的
嵌合抗原受体T细胞治疗及其相关毒性
随着CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法）的出现，肿瘤免疫治疗进入了一个新的时代。CAR-T细胞治疗作为一种新兴的肿瘤免疫治疗手段，近年来取得了极大的进展，尤其是在复发/难治性恶性B细胞肿瘤的治疗方面
细胞毒性T细胞的细胞试验
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞（CTL）测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递，以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞，这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠，也用于大型动物模型，但标准的临床
细胞毒性T细胞简介
细胞毒性T淋巴细胞（CTL），是白细胞的亚部，为一种特异T细胞，专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用，与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。 细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞，是机体抗肿瘤机制的重要环节，也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细
超级抗原诱导调节性T细胞研究新进展
超级抗原分子可高效激活T细胞，对肿瘤产生免疫杀伤和免疫监视，是一种理想的免疫抗肿瘤候选药物。但是，T细胞的过渡激活可能诱导具有免疫抑制功能的调节性T细胞（Tregs）的产生，这是免疫抗肿瘤药物开发所需揭示和解决的重要问题。 中国科学院沈阳应用生态研究所微生物资源与生态课题组，依托“沈阳市超级抗
MHC－Tetramer－技术：检测抗原特异性－T－细胞的金标准
MHC 四聚体（MHC Tetramer）是一类免疫学试剂，由四个主要组织相容性复合体（Major Histocompatibility Complex，MHC）与抗原肽结合的单体分子组成，并标记有荧光，用于 T 细胞免疫分析的 MHC 四聚体检测（MHC Tetramer Assay，
细胞毒性T细胞的分类特征
CTL是以克隆为单位的不均质的细胞群，根据其细胞表面标志（表面抗原和表面受体）可分为3类： 1、细胞毒或杀伤性T细胞（Tc）：其表面抗原为CD3+，CD4+，CD8+，TCR有a和β两条多肽链组成。 2、细胞毒性T辅助细胞（CTh）：其细胞表面标志为CD3+，CD4+，CD8+，TCRaβ，
细胞毒性T细胞的作用机制
当细胞毒性T细胞遇到受感染或是不健康的体细胞，细胞毒性T细胞会释放出细胞毒素，如穿孔素、颗粒酶，以及颗粒溶解素。这些酵素会进入目标细胞的细胞质，并使细胞内的丝氨酸蛋白酶诱发胱天蛋白酶的级联反应，这个反应会使一连串的胱胺酸蛋白酶活化，引发细胞凋亡。另外一种诱发细胞凋亡的途径是借由细胞表面受体的结合。细
T细胞抗原受体
1、在外周淋巴器官中大多数成熟T细胞（95%）的TCR分子，由α链和β链经二硫键连接的异二聚体分子，也称TCR-2.T细胞特异性免疫应答主要是这一类T细胞完成。 2、少数成熟T细胞的TCR分子是由γ链和δ链组成的异二聚体分子，结构与TCRαβ相似，也称TCR-1.它可直接识别抗原（多肽、类脂分
细胞毒性T细胞杀伤靶细胞的过程
CTL杀伤靶细胞是一个连续过程，可分为三个阶段，主要研究内容如下： 1、效应靶细胞结合：CTL是通过其膜上的受体TCR，即Ti-CD3分子与靶细胞结合，此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ，又称细胞内粘附分子相互作用，即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低，为非特异性的，但可
T细胞的抗原受体
成熟T细胞表面具有特异性识别抗原并与之结合的分子结构，称为T细胞抗原受体医学教育|网。TCR是一种双肽链分子，按肽链编码基因不同可分为两类： 1、在外周淋巴器官中大多数成熟T细胞（95%）的TCR分子，由α链和β链经二硫键连接的异二聚体分子，也称TCR-2.T细胞特异性免疫应答主要是这一类T细
关于γδT细胞的细胞毒性的介绍
细胞毒性是γδT细胞的主要生物学效应，也是其发挥抗肿瘤作用的主要方式。TCRγδ能够识别在肿瘤细胞内积聚的异戊烯焦磷酸(IPP)和二甲基烯丙基焦磷酸，进而激活γδT细胞。激活的γδT细胞能够通过多种途径杀伤肿瘤细胞： 1、通过凋亡诱导蛋白配体途径Fas-FasL和相关凋亡诱导配体受体诱导肿瘤
间歇循环刺激法制备抗原特异性T细胞克隆
间歇循环刺激法 是制备抗原特异性T细胞克隆的传统方法，即经抗原间隔刺激多个循环。[材料和试剂]（1）抗原致敏供者的单个核细胞(MNC)和经过3300rad照射的自身MNC（2）抗原（3）含10％人AB型血清的完全RPMI 1640培养液（4）细胞分离及T细胞培养增殖所需的其他试剂和器材。[操作步骤
四聚体——抗原特异性T细胞检测金标准
实验概要 抗原特异性T细胞在细胞免疫应答中发挥着核心作用，因此定量测定抗原特异性T细胞数量在判定机体细胞免疫功能方面提供重要的信息。传统的抗原特异性T细胞功能检测方法有经典的Cr51释放试验、有限稀释法（LDA）、酶联免疫斑点试验（ELISPOT）等，但是这些方法或多或少都存在操作繁琐、
四聚体——抗原特异性T细胞检测金标准
实验概要 抗原特异性T细胞在细胞免疫应答中发挥着核心作用，因此定量测定抗原特异性T细胞数量在判定机体细胞免疫功能方面提供重要的信息。传统的抗原特异性T细胞功能检测方法有经典的Cr51释放试验、有限稀释法（LDA）、酶联免疫斑点试验（ELISPOT）等，但是这些方法或多或少都存在操作繁琐、检测结果误差
抗原特异性T细胞克隆的制备——间歇循环刺激法
实验概要本实验利用间歇循环刺激法制备了抗原特异性T细胞克隆。实验原理间歇循环刺激法是制备抗原特异性T细胞克隆的传统方法，原理是经抗原间隔刺激多个循环。主要试剂1. 含10％人AB型血清的完全RPMI 1640培养液。主要设备1. 24孔培养板；2. CO2 温箱；3. 高速离心机；4. 96孔板；5
细胞毒性T细胞的活化方式介绍
除了一些少数细胞和没有细胞核的细胞（如红血球），宿主的细胞表面几乎都会表现第一类MHC分子。当细胞被病毒感染时（或其他胞内病原体），细胞会降解外来蛋白质，并由第一类MHC分子将蛋白质片段表现于细胞表面，以利于CD8+ T细胞辨识，此动作称为抗原呈现。细胞毒性T细胞的活化取决于T细胞表面的分子和抗原呈
细胞毒性T细胞的发育过程介绍
T细胞会在胸腺成熟，成为成熟胸腺细胞。免疫系统必须有能力辨识数百万种抗原，但身体内却只有30,000对基因，所以不可能一个抗原就花费一组基因来辨识。因此，身体内采用的势必是另一套机制。骨髓中的未成熟白血球DNA会改变，制造出特定的白血球受体，而每一种白血球则可以与不同的抗原结合。但这种方式制造出来的
细胞毒性t细胞活化后的变化
细胞毒性t细胞活化后的变化如下。1、T细胞分化成各种效应T细胞亚群，这些效应T细胞亚群要么控制细胞内病原体，要么激活B细胞以靶向细胞外病原体。2、CD8T细胞成为裂解病毒感染或肿瘤细胞的细胞毒性T细胞。3、CD4T细胞分化成辅助T细胞的各种亚群，激活其他免疫细胞（即Th1细胞激活巨噬细胞，Th2细胞
B细胞对T细胞依赖抗原的应答
一般情况下当大量抗原进入未经免疫的机体后，诱发初次免疫应答时其抗原呈递细胞多由巨噬细胞完成。经Mφ活化TH细胞后再由活化的TH细胞辅助B细胞产生抗体和形成记忆B细胞。但当再次免疫应答发生时，抗原呈递细胞则主要由已扩增的B细胞克隆承担。由于其膜Ig受体亲和力增高故对少量抗原也能摄取，故可取代巨噬细
细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验过程
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞（CTL）测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递，以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞，这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠，也用于大型动物模型，但标准的临床前评
抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要，但由于技术局限，其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上，题为：High-throughput
科学家提出抗原特异性CD8+T细胞的单细胞分析方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要，但由于技术局限，其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上，题为：High-throughput