单B细胞抗体的制备及应用
单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具。它在蛋白质结构与功能、疾病诊断、药效学和临床应用等方面发挥着不可或缺的作用。近年来，随着分子生物学和细胞生物学的发展，单个B细胞抗体的制备技术开始兴起并逐渐得到广泛应用。采用单B细胞抗体技术制备的单克隆抗体具有全人源性、高特异性和均一性的特点。在治疗病原微生物感染、肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等方面显示出独特的优势和良好的应用前景。目前，单B细胞抗体的制备技术已广泛应用于以下几个方面。1、病原微生物感染的治疗其他抗体制备技术，如噬菌体展示和转基因小鼠，只能研究有限种类的B细胞，而单B细胞抗体制备技术可以帮助人们在患者感染或免疫数月甚至数年后快速分离记忆B细胞，制备单克隆抗体。同时，人们可以从基因水平更好地理解和释放人类免疫系统的机制。单B细胞技术已被用于制备针对病原体的高度特异性人类抗体，如HIV抗体、破伤风抗体、乙型肝炎抗体和流感抗体。2、自身免疫性疾病的检测和治疗在肿瘤检测和治疗......阅读全文
单B细胞抗体的制备及应用
单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具。它在蛋白质结构与功能、疾病诊断、药效学和临床应用等方面发挥着不可或缺的作用。近年来，随着分子生物学和细胞生物学的发展，单个B细胞抗体的制备技术开始兴起并逐渐得到广泛应用。采用单B细胞抗体技术制备的单克隆抗体具有全人源性、高特异性和均一性的特点。在治疗病原微
单个B细胞抗体制备技术原理
单个B细胞技术是近年来新发展的一类快速制备单克隆抗体的技术，是根据每一个B细胞只含有一个功能性重链可变区DNA序列和一个轻链可变区DNA序列，以及每一个B细胞只产生一种特异性抗体的特性，从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性B细胞，通过单细胞PCR技术从单个抗体分泌B细胞中扩增IgG重链和轻链可变区
单个B－细胞抗体制备技术过程
1. 鉴定和分离单个B 细胞细胞来源：外周血中分离浆细胞；外周血中分离单个记忆B 细胞；骨髓中分离前B 细胞。在样品丰富的情况下，为提高特异性抗体得率，可以在分离B 细胞之前先通过密度梯度法，或流式细胞分选从外周血中粗分离B淋巴细胞，以ELISPOT 进行抗原特异性细胞丰度的评价，从而选择含抗原特异
OsCCT1b抗体的制备
实验概要 本实验构建了含OsCCTlb的原核表达载体，获阳性克隆。诱导表达纯化后免疫兔子，制备了OsCCT1b抗体。 实验步骤 1. 载体构建 将高保真PCR扩增的OsCRYlb基因的C末端OsCCTlb克隆到pET-21a( )载体中，得到的阳性克隆转化如大肠杆菌E. coli BL21
OsCCT1b抗体的制备
实验概要本实验构建了含OsCCTlb的原核表达载体，获阳性克隆。诱导表达纯化后免疫兔子，制备了OsCCT1b抗体。实验步骤1. 载体构建将高保真PCR扩增的OsCRYlb基因的C末端OsCCTlb克隆到pET-21a( )载体中，得到的阳性克隆转化如大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。2.
技术强则药物强单个B细胞抗体制备技术
如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点，目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。 1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。
B细胞分泌抗体的检测
基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 107 个细
技术强则药物强—单个B细胞抗体制备技术（一）
如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点，目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。 1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。随后的50年，
技术强则药物强—单个B细胞抗体制备技术（二）
3）微雕刻和ISAAC方法分选B细胞微雕刻技术原理[7]是基于软光刻微阵列芯片识别、克隆抗原特异性B细胞的方法。通过刺激多克隆B细胞，并将其逐个分布到芯片孔内进行培养产生抗体，然后将改芯片孔内抗体转印至相应的蛋白芯片，通过与目标抗原反应后，再与荧光抗体反应，最后根据荧光抗体染色结果，通过显微操作将分
单仪细胞转录组制备的技术指标及功能
技术指标 将 C1 应用于单细胞 mRNA 测序，可以从多个细胞个 体平行处理多达 96 个 cDNA 文库，在任何 Illumina 测序仪上对 mRNA表达进行相对定量。此系统的主要特征包括： 高通量 -可对 96 个单细胞进行大规模平行、连贯的制备， 引入条形码序列标记（Barcode
抗红细胞抗体(溶血素)的制备
实验概要抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践，为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后，动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义，而且
抗红细胞抗体(溶血素)的制备
实验概要抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践，为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后，动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义，而且
T－细胞及B－细胞的分离
将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱，B 细胞粘附于尼龙棉上，T细胞则不粘附，先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱，流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞，并用少量的RPMI l640 培基洗脱，此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱（塑料管）的长短和尼龙棉的
抗体的制备
为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能，以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。目前，根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。 一、多克隆抗体 大多数抗原是由大分子蛋白质组成，但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合，称此部位为抗原
人源抗体开发——B细胞永生化－（二）
2.3 遗传修饰以促进抗凋亡因子表达原癌基因BCL-6属于抗细胞凋亡家族，具有转录抑制功能，可促进B细胞增殖，同时抑制B细胞向浆细胞分化，BCL-xL作为BCL-2家族成员蛋白，通过与促凋亡蛋白的拮抗作用从而抑制细胞凋亡。Kwakkenbos等利用逆转录病毒转导系统将BCL-6和BCL-xL基因导入
人源抗体开发——B细胞永生化－（一）
人源单克隆抗体具有免疫原性低、半衰期长等优势，成为了体内应用中不可或缺的生物制剂。人类抗体库为人源单克隆抗体的制备提供了丰富的来源，人B细胞永生化是获得人类抗体库的潜在有效方法，可应用于人源单克隆抗体的制备。由于各平台均有亟待解决的问题，基于人B细胞永生化的抗体制备尚局限在实验室研究阶段，本文以明确
如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原？
多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）：用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆，产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，即多克隆抗体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗
如何选择合适的单、多克隆抗体及抗原
多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）：用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆，产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，即多克隆抗体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体
临床化验单详解抗SSA和SSB抗体介绍
抗SS-A和SS-B抗体介绍: 抗SS-A和抗SS-B抗体的发现和命名1961年,Anderson等人在干燥综合征(SS)病人血清中鉴定出两种免疫学性质不同的抗体,分别称为SjT和SjD抗体。后来Reichlin等在系统性红斑狼疮(SLE)病人血清中亦发现了类似的两种抗体,分别命名为Ro和La抗体。
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合（标记） 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法： ⑴ 透析法：①适用于蛋白质含量低、样品体 积小的抗体溶液的标记 ②标记较均匀，非特异荧光较低 ⑵ 搅
潮霉素B性质及应用
潮霉素B(HygromycinB )是由吸水链霉菌（Streptomyceshygroscopicus）代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死细菌、真菌和高等真核细胞。潮霉素B通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成。目前常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因
抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位
采用合成肽组合库鉴定 B 细 胞 和 T 细胞的表位实验步骤 基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂材 料肽或蛋白质抗原目的抗原的单克隆抗体（M A b )1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS)六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m
抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位
使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白实验步骤基 本 方 案 使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白材 料家兔肽-载体的连接体（单 元 13. 1)P B S , p H 7. 5弗 氏 完 全 佐 剂（F C A ; Pierce Biotechnology)弗氏不完全佐剂1 . 收 集 血 样（
抗A、抗B抗体
和一切抗体一样，血型抗体也是免疫球蛋白，天然抗体主要是IGM，免疫体主要是IGG。但这种区分界限也不十分明确，事实上人的IGM和IGG血型抗体往往同时存在。抗A和抗B可以完全是IGM，也可以是IGN与IGG，甚至是IGM、G、a 混合。总体而言，抗A与抗B主要是IGM，而O型血清中是以IGG为主
抗胰岛细胞抗体临床应用
抗胰岛细胞抗体（APICA）是1型糖尿病（DM1）患者中最常见的自身抗体。新确诊的DM1患者，其APICA的阳性检出率可达90%以上。通常在治疗一年后，该抗体水平下降。APICA在DM1患者体内，可与胰岛素结合形成抗原抗体复合物，使胰岛素的活性明显降低甚至丧失，从而导致患者体内血糖水平异常升高，
抗胰岛细胞抗体临床应用
抗胰岛细胞抗体（APICA）是1型糖尿病（DM1）患者中最常见的自身抗体。新确诊的DM1患者，其APICA的阳性检出率可达90%以上。通常在治疗一年后，该抗体水平下降。APICA在DM1患者体内，可与胰岛素结合形成抗原抗体复合物，使胰岛素的活性明显降低甚至丧失，从而导致患者体内血糖水平异常升高，
关于T－细胞及B－细胞的分离介绍
将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱，B 细胞粘附于尼龙棉上，T细胞则不粘附，先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱，流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞，并用少量的RPMI l640 培基洗脱，此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱（塑料管）的长短和尼龙
抗体的概念动物产生抗体的机理及单克隆抗体的制备方法
抗体的概念 动物机体受到抗原物质的刺激后, 由B淋巴细胞转化为浆细胞产生的, 能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白, 这类免疫球蛋白称为抗体(Antibody,简称 Ab)。 免疫球蛋白 免疫球蛋白(Immunogolobulin, 简称Ig) 是指存在于人和动物血液(
临床化验单详解人白细胞抗原B27(HLA—B27)
人白细胞抗原B27(HLA—B27)介绍: 人白细胞抗原B27(HLA—B27)是类风湿关节炎(RA)的标记性抗体,特异性高,对于早期类风湿关节炎或临床症状不典型的类风湿关节炎具有诊断意义。HLA—B27与强直性脊柱炎(AS)有密切的相关性,90%的AS患者HLA—B27呈阳性反应,而在正常人中的阳
单能干细胞的功能和应用特点
单能干细胞（也称专能、偏能干细胞）：常被用来描述在成体组织、器官中的一类细胞，意思是此类细胞只能向单一方向分化，产生一种类型的细胞。在许多已分化组织中的成体干细胞是典型的单能干细胞，在正常的情况下只能产生一种类型的细胞。如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞又叫卫星细胞。这种组织是处于一种稳定的