细菌的接合作用实验
实验方法原理 本实验采用的供体菌是大肠杆菌野生型 Hfr 菌株,对链霉素呈敏感性(Str3),受体菌为大肠杆菌营养块陷型突变体 (Thr-Leu-Thi-),需要苏氨酸,亮氨酸和硫胺素,对链霉索呈抗性 (Str3)。短期接合配对以后,在含有链霉素和硫胺素的基本培养基上只能分离到苏氨酸和亮氨酸的重组子 (Thr+Leu+Thi-),硫胺素标记位于转移染色体的末端,在短期配对过程中因配对中断难以转移到受体细胞, 因此硫胺素是 Thr+Leu+Thi- 重组子的必须生长因子。实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LB 液体培养基链霉素硫胺素基本固体培养基平板仪器、耗材 无菌试管1 ml 无菌吸管盛有 70% 乙醇的烧杯玻璃涂拌振荡混合器实验步骤 1. 分别将供体菌和受体菌接种在 2 支盛有 5 ml LB 液的试管中。37℃ 振荡培养 12 h。2. 分别用不同的 1 m......阅读全文
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
接合在基因重组中的应用
自然中转导现象较普遍,可能是低等生物进化过程中产生新的基因组合的一种基本方式。供体菌和受体菌的完整细胞经直接接触而传递大段DNA遗传信息的现象,称为接合。细菌和放线菌均有接合现象。
接合孢子的分类及特点
根据产生接合孢子菌丝来源或亲和力不同,一般可分为同宗配合和异宗配合两类。例如毛霉目中就存在这两种类型。所谓同宗配合,即每一菌体都是自身可孕的,不靠别的菌体帮助而能独立地进行有性生殖。显然,没有两性异体的霉菌是同宗配合的。如有性根霉单一的孢囊孢子萌发后,所形成的菌丝体,当相邻两菌丝靠近时,经过如前所述
细菌培养实验
实验步骤一、需氧培养法:本法是临床细菌室最常用的培养方法,适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃,这适合于绝大多数致病菌的生长。此外,还有用 4℃ 培养,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长,而其他革兰氏阳性菌则不能,故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
细菌培养实验
一、需氧培养法:本法是临床细菌室最常用的培养方法,适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃,这适合于绝大多数致病菌的生长。此外,还有用 4℃ 培养,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长,而其他革兰氏阳性菌则不能,故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
细菌鉴定实验
实验方法原理 玻片凝集反应(slide agglutirlation)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌,立克次体,钩端螺旋体等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性:如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。此法属定性试验,
细菌素的作用机制介绍
由于一种细菌素并不是对每种菌都有抑制作用,在其对特殊菌株的亲和力实验中发现,菌株磷脂组成的pH影响最低抑菌浓度(MIC)。有研究显示,膜通道的形成与细菌膜表面的“耦合分子基团”有关,耦合分子基团使得细菌素与细胞的相互作用更易于进行,从而提高细菌素的抑菌有效性。这一机制已成功地阐述了Nisin和M
溶菌酶杀灭细菌的作用机理
溶菌酶杀灭细菌的作用机理是:竞争肽聚糖合成中所需的转肽酶。溶菌酶能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖,其水解位点是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子间的β-1.4糖苷键。肽聚糖是细菌细胞壁的主要成分,它是由NAM、NAG和肽“尾”(由4个氨基酸残基)组成,NAM与
简述土壤细菌的作用介绍
随植被群落演替,根际土壤中变形菌门、厚壁菌门和浮霉菌门丰度逐渐增加;非根际土壤中酸杆菌门和疣微菌门丰度随植被演替逐渐减小。土壤细菌的影响因子大小为土壤有机碳、土壤总氮、含水量、电导率等,其中土壤有机碳和土壤总氮有显著性影响。细菌和其他土壤微生物可以一起参与腐殖质的形成和有机质的完全矿质化作用。
细菌克隆的溶解实验
细菌克隆的溶解实验可以用于:(1)从表达特定融合蛋白质的重组噬菌体构建噬菌体溶源菌;(2)从该溶源菌诱导合成并纯化出融合的目的蛋白质。实验方法原理具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体,在感染于寄主细菌细胞时,前者往往在菌体内增殖并将菌体裂解。实验材料大肠杆菌噬菌体试剂
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理 G+菌细胞壁肽聚糖含量多,结构致密,脂质少,乙醇不易渗入脱色;G-菌细胞壁肽聚糖含量少,结构疏松,脂质多,乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G+菌菌体含有大量核糖核酸镁盐,能与结晶紫、碘牢固结合,使乙醇不易将其脱色;G-菌菌体核糖核酸镁盐含量少,容易被乙醇脱色。G+菌等电点比G-菌低,在同样
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理G+菌细胞壁肽聚糖含量多,结构致密,脂质少,乙醇不易渗入脱色;G-菌细胞壁肽聚糖含量少,结构疏松,脂质多,乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G+菌菌体含有大量核糖核酸镁盐,能与结晶紫、碘牢固结合,使乙醇不易将其脱色;G-菌菌体核糖核酸镁盐含量少,容易被乙醇脱色。G+菌等电点比G-菌低,在同样P
细菌的分布观察实验
仪器、耗材 普通琼脂培养基血平板镊子实验步骤 1. 空气中细菌的分布(1)方法:采用沉降法,暴皿15分钟,常规培养24小时观察结果。(2)结果观察:培养基表面菌落生长情况。2. 皮肤表面细菌的分布(1)方法:采用涂抹法,将手指于酒精消毒前后分别涂抹琼脂平板表面,常规培养24小时观察结果。(2)结果观
细菌克隆的溶解实验
试剂、试剂盒 IPTG溶源菌抽提缓冲液氯化钠溶菌酶LB 琼脂平板仪器、耗材 气体恒溫箱液氮Millipore 滤纸水浴摇床牙签或接种环噬菌体λgt11λgt18-23λZAP 和λZipLox 重组子大肠杆菌 Y1090 hsdR 菌株及 Y1089 菌株实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试
细菌克隆的溶解实验
细菌克隆的溶解实验 实验方法原理 具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体,在感染于寄主细菌细胞时,前者往往在菌体内增殖并将菌体裂
细菌的分布观察实验
仪器、耗材普通琼脂培养基血平板镊子实验步骤1. 空气中细菌的分布(1)方法:采用沉降法,暴皿15分钟,常规培养24小时观察结果。(2)结果观察:培养基表面菌落生长情况。2. 皮肤表面细菌的分布(1)方法:采用涂抹法,将手指于酒精消毒前后分别涂抹琼脂平板表面,常规培养24小时观察结果。(2)结果观察:
接合菌病的临床表现
1.毛霉目感染 临床特点是很快出现发热、组织坏死。不同的临床类型常与患者的基础疾病有关。该病的预后与基础疾病、感染类型及是否得到早期诊断和治疗有关。多见于糖尿病、饥饿、重度烧伤、静脉注射毒品和其他疾病,如白血病、淋巴瘤、使用细胞毒药物或皮质类固醇激素等免疫抑制性治疗、使用去铁胺(一种铁螯合剂用
接合孢子的分裂方式和特点
接合孢子是由菌丝生出的结构基本相似,形态相同或略有不同的两个配子囊接合而成。首先,两个菌体各自向对方伸出极短的特殊菌丝,称为接合子梗 (zygophore)。性质协调的两个接合子梗成对地相互吸引,并在它们的顶部融合形成融合膜。两个接合子梗的顶端膨大,形成原配子囊。而后,在靠近每个配子囊的顶端形成一个
接合菌病的临床表现
接合菌病对人体和动物有毒性。一般情况下本菌无毒力,感染多发生在患有严重基础疾病的患者。接合菌病好侵袭血管,易在腔内形成血栓,引起局部组织坏死。
细菌简单染色实验
实验方法原理常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别,
细菌简单染色实验
实验方法原理 常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别
细菌芽孢染色实验
实验方法原理 用着色力强的染色剂孔雀缘或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内卡进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。实验材料 蜡样芽孢杆菌(约2d
细菌糖发酵实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 试管标记 取分别装有不同糖类(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等)发酵培
细菌RNA制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.
细菌糖发酵实验
实验材料 大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材 超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤 1. 试管标记 取分别装有不同糖类(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等
细菌RNA制备实验
革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取 实验材料 RNA 试
细菌疫苗载体的概念和作用
中文名称细菌疫苗载体英文名称bacterial vaccine vector定 义作为疫苗载体的细菌性疫苗株。如卡介苗菌。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫预防(三级学科)
简述细菌脂多糖的生理作用
在自然界中,LPS除了来源于肠道细菌以外还附着在食用植物、中药中。有报告显示,通过口服、注射等自然摄取的LPS是没有毒性的,反而有助于免疫系统的成熟和调节。例如,在婴幼儿时期自然摄入LPS的话可预防成为过敏体质,通过诱导生物体内抗菌物质可防止抗生素耐药细菌的繁殖。在皮肤方面,LPS信号转导对于皮
简述细菌素的重要作用
细菌素是细菌用于调控菌群结构的一种有力武器。细菌素作为细菌生活中的一种竞争利器,既有利于细菌素生产菌侵入一个原本稳定的微生物区系,也可以作为细菌素生产菌的一种防御武器,防止自身建立的稳定区系受到其他细菌的侵犯。研究结果表明,在接种量不足的情况下,产细菌素的细菌通常很难侵入生活在液体培养这样生长有
噬菌体侵染细菌的实验
噬菌体是寄生在细菌细胞中的病毒.一个典型的噬菌体的生活周期,可以分为3个阶段感染阶段,增殖阶段和成熟阶段.有关的主要内容在课本上已经介绍过了,这里再稍加详述如下.感染阶段 噬菌体侵染寄主细胞的第一步是"吸附",即噬菌体的尾部附着在细菌的细胞壁上,然后进行"侵入.先通过溶菌酶的作用在细菌的细胞壁上