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细胞计数实验

实验方法原理 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内外常用的计菌器有:血细胞计数板。Peteroff-Hauser 计菌器以及比 Hawksley 计菌器等,它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数,基本原理相同。后两种计菌器由于置上盖玻片后,总容积为 0.02 mm,而且盖玻片和载玻片之间的距离只有 0.02 mm,因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。除了用这些计菌器外,还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法。此法一般用于牛乳的细菌学检查。本实验以血球计数板为例进行显微镜直接计数。用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台;中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网......阅读全文

FDA和NIST对细胞治疗中的细胞计数

近年来,由于细胞治疗方法的兴起,人们日益需求能够高质量、稳健、有效进行细胞表征测定的方法。细胞计数,作为细胞疗法中最基础的检测项目,现今需要更高的检测可信度。2017年4月,美国国家标准与技术研究院(NIST)&食品与药物管理局(FDA)共同举办了一场专注于细胞计数的研讨会,聚焦于选择、设计

细胞计数仪的选择

细胞生物学研究中的一些常规操作只是整个项目中微不足道但又非常重要的一步。这些常规操作简单没有技术内涵,却消耗了研究者大量时间与体力,且结果也不能得到保证。其中使用血球计数板在显微镜下进行手动细胞计数首当其冲。 手工计数不仅浪费了研究者大部分的时间,繁冗无聊的计数过程往往让人头晕眼花,影响了研究者的积

血细胞分析仪50年发展历程和未来展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜,1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一

血球分析仪不能用于胸腹水细胞计数

随着先进的科学技术在医学领域的应用,血球分析仪医学检验受益颇丰,尤其是电子血球分析仪在国内的普及使用,大大地减轻了检验工作者的劳动强度,提高了分析的准确度,同时也为临床医师提供了更多的参数指标。我们尝试用血球分析仪进行胸腹水细胞计数以代替传统的显微镜计数,40例胸腹水细胞计数结果表明血球分析仪胸腹水

血细胞分析仪的检测技术及发展

  谈到血细胞计数仪的发展史,不得不提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter,最初是一位广播电台的电器工程师,后来做过X光机的销售员和维修工程师,在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他在芝加哥一家公司工作时,在一间地下

血球计数板细胞计数法

细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。一、步骤1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(

伯乐细胞计数器和赛默飞细胞计数仪区别

  美国伯乐细胞计数仪主要代表型号是 TC10,和TC20.但是TC10已经停产,现在主要是TC20在做活动   基本信息   商品名自动细胞计数仪   品牌名bio-rad|Biorad(OG)   原厂型号TC20 Automated Cell Counter   原厂货号145010

血细胞分析仪50年的发展历史和展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜(图1),1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生

血球计数板细胞计数法

细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。一、步骤1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(

细胞计数仪的选型指导(二)

1.      低端细胞计数仪—明场细胞计数仪 就明场细胞计数仪,Nexcelom公司就有三款仪器可选,从此就可以看出厂家的良苦用心。三款细胞计数仪利用明场成像和模式识别,能够快速准确的计数,并通过台盼蓝排除法进行活死细胞计数。成像、计数、分析30s

Bio-Rad新一代细胞计数仪上市

  一代又一代,转眼iPhone又到了第五代。别以为只有数码产品升级换代快,生命科学仪器照样可以。这不,继TC10之后,Bio-Rad又推出了新一代的TC20全自动细胞计数仪,能在30秒内精确完成活细胞计数。      根据Bio-Rad的介绍,TC20系统的透镜和细胞计数算法让它能够兼

细胞计数仪的选型指导(三)

2)K2型号—双荧光细胞分析仪 K2型号计数仪是即AUTO2000型号之后的另外一款双荧光细胞计数仪。这款型号除了细胞活力分析功能,还可以选配FCS EXPRESS流式软件,进行细胞凋亡、细胞周期、转染后GFP蛋白表达等的检测分析。 特点: a.电脑操控软件; b.双荧光和明场成像:用于AO/PI

Transwell侵袭实验总结 (3)-操作步骤

.步骤2.1 Transwell小室制备2.1.1 无基质胶Transwell小室制备① 包被基底膜:用50mg/LMatrigel 1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面,4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话,可将200ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原(col

做细胞计数实验如何计数?

实验用品:0.4% 台盼蓝溶液、无水乙醇或 95% 乙醇溶液、脱脂棉、普通显微镜、试管、吸管、毛细吸管、细胞计数板、绸布。实验原理:在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力

细胞计数仪的选型指导(一)

细胞生物学研究中的一些常规操作只是整个项目中微不足道但又非常重要的一步。这些常规操作简单没有技术内涵,却消耗了研究者大量时间与体力,且结果也不能得到保证。其中使用血球计数板在显微镜下进行手动细胞计数首当其冲。手工计数不仅浪费了研究者大部分的时间,繁冗无聊的计数过程往往让人头晕眼花,影响了研究者的积极

细胞生长的检查方法(一)

1.直接计数法是zui简单的检测细胞生长的方法。计数细胞一般利用台盼蓝(锥虫蓝染色,台盼蓝(锥虫蓝)不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色。而死亡细胞的细胞膜通透性增高,可使染料进入细胞内而使细胞着色。因此,镜下未染色细胞认为是活细胞,而染色细胞认为是死亡细胞。经典的细胞计数常用到血细胞计数

如何根据细胞种类的特性科学铺板培养

  细胞铺板是细胞实验中最常见又必须掌握的一门技术,看似简单,我们却经常遇到:如细胞居中或者中间稀疏等不均匀分布的现象,导致我们只能扔掉,重新铺板。既耽搁时间又浪费了细胞及培养板等资源。历经多次失败后,才发现原来细胞铺板是有规律可循的,今天我们就聊一聊:细胞铺板的技巧。   如下图为:细胞铺板时

流式细胞技术基本原理应用和发展趋势

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成

有关细胞生长状况指标的检测方法

摘要: 细胞计数这是细胞培养中常用的基本技术之一,所用材料为细胞计数板、巴氏吸管和显微镜,步骤如下. 一、细胞计数 这是细胞培养中常用的基本技术之一.所用材料为细胞计数板.巴氏吸管和显微镜.步骤如下. 取清洁计数板和专用盖玻片,用丝绸布轻轻擦干. 取

当前临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

以康宁Corning细胞计数仪讲述细胞计数仪的使用特点

  细胞计数仪顾名思义就是计算细胞数量的仪器,分为细胞计数自动和手动。康宁细胞计数仪结合了细胞计数自动和手动的优点,可进行快速准确的细胞计数,既有手动的准确性,又有自动的快捷性,同时细胞计数所需的耗材成本低。   细胞计数仪有一下特点:   快速——在线图像处理系统   精确——基于云计算的机

独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对...

独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对其进行成像分析简介基于细胞成像的分析技术一般需要使用荧光染料进行标记,一些荧光标记可能对活细胞具有毒性或者只能用于固定过的细胞进行染色。无标记细胞分析技术使得研究者既无需耗时耗力的染色流程也无需担心染料对正常细胞活力的影响,就可以计算出细胞数目和细胞汇

Transwell侵袭实验

第一节 概念这里想明确两个概念,一个是Transwell,另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1. Transwell关于Transwell这个词该如何解释,查了很多资料也未见准确的注解,我觉得可以这么理解吧,trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透

血球计数板计数误差的来源及解决方案—自动化计数

引言血球计数板一直是实验室细胞计数的金牌标准。自从18世纪在法国第一次被用于分析病人的血液样本,血球计数板在过去几百年中已经得到一系列的重大发展,相比以前计数更为精确、使用更为简单,并最终形成了今天我们使用的样子。现在血球计数板计数仍然是所有细胞学研究的一个组成部分,然而其计数存在的问题由于自身固有

临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

当前临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

Multisizer 3颗粒/细胞计数及粒度分析仪特点

  Multisizer 3颗粒/细胞计数及粒度分析仪系列是迄今为止功能最全、分辨率最高的颗粒/细胞计数及粒度分析仪。应用库尔特原理的 Multisizer 3 库尔特计数器,通过一次测量,即可同时获得颗粒和细胞准确的计数,体积,质量和表面积大小分布等数据,整体颗粒和细胞测量范围

123亿美元!细胞计数市场规模扩增

  美国知名的市场咨询公司MarketsandMarkets近日发布了细胞计数市场的分析报告。根据这份最新报告,全球细胞计数市场的规模将从2018年的88.4亿美元增长到2023年的123.2亿美元,复合年均增长率达6.8%。  对于细胞计数,过去人们总是依赖于血球计数器,而如今有了更多的选择。根据

常见细胞计数仪性能大比拼

由于传统的血球计数板已不能满足高速发展的细胞研究需要,市场上各种自动细胞计数的设备越来越多。常见的主要分为两类:基于图像的细胞计数仪(Automated vision-based counter)和基于库尔特电阻抗原理的细胞计数仪。两者主要区别在于,前者扫描仪器视野内图像,依靠设定的上下限细

兔成骨细胞与骨髓基质干细胞混合培养的实验研究

对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后,