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细胞计数实验

实验方法原理细胞悬液制备后,需要计算悬液中所含细胞数量;一般以细胞数/毫升表示。因只有健康的细胞才有活力,接种后能够生长增殖,所以在接种关应先检查一下细胞的活力。实验材料细胞悬液试剂、试剂盒台盘蓝酒精培养液仪器、耗材吸管实验步骤1. 计数板用96%酒精冲洗计数板后,用干净鹿皮擦净,另擦净盖片一张;把盖片覆在计数板上面,使之微微移向一侧,露出计数板台面少许,以便滴加细胞悬液;2. 染色取吸管1 支,伸入培养瓶中,轻轻反复吹打细胞悬液使细胞重悬均匀后,立即吸细胞悬液少许,向另一离心管中滴入细胞悬液9 滴,再滴入台盼蓝染液1 滴,混匀,置2~3 分钟;3. 加悬液把计数板平放在显微镜台上,立即从计数板边缘轻轻滴1~2 滴已染色的细胞悬液,使之充满计数板和盖片间空隙中;4. 镜检镜下观察可见细胞分散各处,健康细胞胞体完整,透明不着色,凡着色细胞均为不健康者。计算四角大方格内的细胞数;压中线......阅读全文

FDA和NIST对细胞治疗中的细胞计数

近年来,由于细胞治疗方法的兴起,人们日益需求能够高质量、稳健、有效进行细胞表征测定的方法。细胞计数,作为细胞疗法中最基础的检测项目,现今需要更高的检测可信度。2017年4月,美国国家标准与技术研究院(NIST)&食品与药物管理局(FDA)共同举办了一场专注于细胞计数的研讨会,聚焦于选择、设计

细胞计数仪的选择

细胞生物学研究中的一些常规操作只是整个项目中微不足道但又非常重要的一步。这些常规操作简单没有技术内涵,却消耗了研究者大量时间与体力,且结果也不能得到保证。其中使用血球计数板在显微镜下进行手动细胞计数首当其冲。 手工计数不仅浪费了研究者大部分的时间,繁冗无聊的计数过程往往让人头晕眼花,影响了研究者的积

Transwell侵袭实验

第一节 概念这里想明确两个概念,一个是Transwell,另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1. Transwell关于Transwell这个词该如何解释,查了很多资料也未见准确的注解,我觉得可以这么理解吧,trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透

动物细胞的基本形态观察和细胞计数

【实验目的】制备不同细胞的临时制片,观察、了解细胞的基本形态;掌握细胞计数方法。【实验用品】一、材料和标本 青蛙或蟾蜍一只二、器材和仪器 显微镜、载片、盖片、吸水纸、手术器材一套、解剖盘一个、血球计数板、小平皿一个、牙签。三、试剂 1%甲苯胺兰、1%甲基兰、Ringer氏液(两栖类用)。【实验内容】

一文了解细胞侵袭实验计数

  实验原理  将细胞小室(Transwell小室)放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、

血细胞分析仪50年发展历程和未来展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜,1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一

血球分析仪不能用于胸腹水细胞计数

随着先进的科学技术在医学领域的应用,血球分析仪医学检验受益颇丰,尤其是电子血球分析仪在国内的普及使用,大大地减轻了检验工作者的劳动强度,提高了分析的准确度,同时也为临床医师提供了更多的参数指标。我们尝试用血球分析仪进行胸腹水细胞计数以代替传统的显微镜计数,40例胸腹水细胞计数结果表明血球分析仪胸腹水

如何根据细胞种类的特性科学铺板培养

  细胞铺板是细胞实验中最常见又必须掌握的一门技术,看似简单,我们却经常遇到:如细胞居中或者中间稀疏等不均匀分布的现象,导致我们只能扔掉,重新铺板。既耽搁时间又浪费了细胞及培养板等资源。历经多次失败后,才发现原来细胞铺板是有规律可循的,今天我们就聊一聊:细胞铺板的技巧。   如下图为:细胞铺板时

Transwell侵袭实验总结 (3)-操作步骤

.步骤2.1 Transwell小室制备2.1.1 无基质胶Transwell小室制备① 包被基底膜:用50mg/LMatrigel 1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面,4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话,可将200ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原(col

血细胞分析仪的检测技术及发展

  谈到血细胞计数仪的发展史,不得不提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter,最初是一位广播电台的电器工程师,后来做过X光机的销售员和维修工程师,在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他在芝加哥一家公司工作时,在一间地下

微核实验在染色体水平检测DN A损伤实验

实验步骤 一、材料 1. 胞质分裂阻滞微核试验 2. 微核的着丝点检测 (1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。 (2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 过氧化物酶

血细胞分析仪50年的发展历史和展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜(图1),1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生

血球计数板计数误差的来源及解决方案—自动化计数

引言血球计数板一直是实验室细胞计数的金牌标准。自从18世纪在法国第一次被用于分析病人的血液样本,血球计数板在过去几百年中已经得到一系列的重大发展,相比以前计数更为精确、使用更为简单,并最终形成了今天我们使用的样子。现在血球计数板计数仍然是所有细胞学研究的一个组成部分,然而其计数存在的问题由于自身固有

细胞计数仪的选型指导(二)

1.      低端细胞计数仪—明场细胞计数仪 就明场细胞计数仪,Nexcelom公司就有三款仪器可选,从此就可以看出厂家的良苦用心。三款细胞计数仪利用明场成像和模式识别,能够快速准确的计数,并通过台盼蓝排除法进行活死细胞计数。成像、计数、分析30s

细胞计数仪的选型指导(一)

细胞生物学研究中的一些常规操作只是整个项目中微不足道但又非常重要的一步。这些常规操作简单没有技术内涵,却消耗了研究者大量时间与体力,且结果也不能得到保证。其中使用血球计数板在显微镜下进行手动细胞计数首当其冲。手工计数不仅浪费了研究者大部分的时间,繁冗无聊的计数过程往往让人头晕眼花,影响了研究者的积极

MTT实验心得

MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理:活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。1、培养好细胞点板。养细胞没啥好说的,如果不知道细胞如何养,那就看

MTT实验两年心得

MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理:活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。1、培养好细胞点板。养细胞没啥好说的,如果不知道细胞如何养,那就看

做细胞计数实验如何计数?

实验用品:0.4% 台盼蓝溶液、无水乙醇或 95% 乙醇溶液、脱脂棉、普通显微镜、试管、吸管、毛细吸管、细胞计数板、绸布。实验原理:在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力

有关细胞生长状况指标的检测方法

摘要: 细胞计数这是细胞培养中常用的基本技术之一,所用材料为细胞计数板、巴氏吸管和显微镜,步骤如下. 一、细胞计数 这是细胞培养中常用的基本技术之一.所用材料为细胞计数板.巴氏吸管和显微镜.步骤如下. 取清洁计数板和专用盖玻片,用丝绸布轻轻擦干. 取

兔成骨细胞与骨髓基质干细胞混合培养的实验研究

对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后,

微核实验在染色体水平检测DN A损伤实验(二)

2 用阿糖胞苷微核实验检测人淋巴细胞 (V G 1 期 DNA 剪切修复损伤的方法在对暴露于各种遗传毒物的人 G 。期淋巴细胞的 M N 进行检测后发现,对于主要引起碱基损伤和 DNA 加合物而不是 DNA 链断裂或者纺锤体损伤的化学物质和紫外辐射而言, MN 的形成与细胞毒性相比明显程度较

荧光细胞分析仪特点及免疫治疗领域的应用(一)

背景细胞治疗无疑是引领生物医学未来的希望。在过去的几十年里,细胞治疗取得了飞跃的进步。从收集血液、分离PBMC、细胞修饰、细胞扩增到回输病人,细胞浓度和活率的监测在细胞治疗的整个流程的质量控制中起着关键的作用。我们的目标是为您提供稳定精准,标准化符合GMP法规的智能细胞分析设备。CAR-T生产全程的

流式细胞技术基本原理应用和发展趋势

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成

原代细胞基本实验技术小结

  A 原代细胞分离技术   取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:   一、悬浮细胞的分离方法   1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。   2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS

CD34阳性细胞计数-2

其他研究组也对影响计数结果的因素进行了广泛的检查,如通过提供统一试剂或发行标准分析方案来进行。尽管这些研究减少了一些检测差异,但要进一步地提高实验的精确性需对各个检测中心进行全面的培训并发展标准的计数方案。此项工作由Nordic Myeloma研究组广泛开展,他们组织了两个协作组来制定计数标准方案并

微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(一)

实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

Muse™智能触控细胞分析仪

        随着生命科学研究的深入,科学家们越来越关注细胞水平的研究,如何进行精确的细胞计数,活力评估,如何通过凋亡、周期全面评估细胞的状态,如果快速进行表型分析、磷酸化等细胞分析,已成为大家关注的重点。然而,

培养细胞的形态观察和计数实验

实验方法原理 体外培养的细胞主要有两种状态。一种是能贴附在培养支持物上的细胞,如HeLa 细胞、NIH3T3 等,叫贴壁型细胞,体外培养的细胞大多属于这种细胞。另一种细胞并不贴附在容器的壁上,而是悬浮在培养液中生长,如HL60 细胞,叫做悬浮型细胞,这类细胞主要是血液原性或癌原性细胞。在细胞

细胞计数仪的选择

细胞生物学研究中的一些常规操作只是整个项目中微不足道但又非常重要的一步。这些常规操作简单没有技术内涵,却消耗了研究者大量时间与体力,且结果也不能得到保证。其中使用血球计数板在显微镜下进行手动细胞计数首当其冲。手工计数不仅浪费了研究者大部分的时间,繁冗无聊的计数过程往往让人头晕眼花,影响了研究者的积极

通过细胞计数对疾病模型小鼠进行免疫监测

通过细胞计数对疾病模型小鼠进行免疫监测  摘要生物样本往往是非单一细胞的混合物,如原代分离的细胞样本和许多培养的细胞样本都是由不同种类或不同功能的细胞组成。而对于样本中不同细胞亚群的区分和定量恰恰是很多研究中的关键一环。这些混合在一起的不同细胞通常是使用流式细胞仪和荧光标记的细胞