免疫组化方法中关键环节及其原理解述
一、酶免疫组化的关键环节 1、标本固定：固定的目的是①防止标本从玻片上脱落；②除去防碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③固定的标本易于保存。 2、脱水、石蜡包埋和制片：脱水用梯度乙醇（由低到高）充分脱水、对组织要完全浸蜡、切片时刀片要干净和锋利。否则，容易裂片和脱片等。 3、脱蜡和水化：这是为了后面的抗体等试剂能够充分与组织中抗原等结合反应。脱蜡可以先60度20min,然后立即二甲苯1-3分别10min,但当天制好的切片可以60度3-4h.水化用梯度乙醇（由高到低）。若脱蜡和水化不全易出现局灶性反应和浸洗不全，而产生非特异性背景着色。 4、抗原修复：由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中，发生了蛋白之间交联及醛基的封闭作用，从而失去抗原性；通过抗原修复，使得细胞内抗原决定族重新暴露，提高抗原检测率。常用的修复方法从强到弱一般分为三种，高压修复、微波修复、胰......阅读全文
双重免疫组化实验原理及注意事项
双重免疫组化是科研中的较好的一种免疫组化方法，其原理就是根据阳性表达部位和阳性表达区域不同所建立的一种直观的多色定位的染色方法。其标记的对象是两种或两种以上的细胞部位。主要标记部位如下： 1.膜+浆型 2.膜+核型 3.浆+核型 切不可膜+膜，核+核，以免影响效果和颜色重
癌症临床决策的6个关键环节
每年的2月4日都是世界癌症日，今年1月份以来，各地已经开展了不少大型活动。2014 年国际抗癌联盟推出的世界癌症日主题为“消除癌症误区”，倡议消除人们对于癌症的一些成见、误解。癌症起病过程隐匿，加之部分患者缺乏保健意识，因而在症状早期往往未能引起足够重视，临床所见者多为癌症晚期。但临床医生如能对癌症
水样中矿化度测定的方法原理
水样经过滤去除漂浮物及沉降性固体物,放在称至恒重的蒸发皿内蒸干,并用过氧化去除有机物,然后在105～110 ℃下烘干至恒重,称得重量减去蒸发皿重量即为矿化度。
免疫组化技术在病理诊断中的应用
由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点，且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起，所以，这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中，免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例，在免疫组化技术出现以前，对肿瘤的诊断和分类还局限于细胞水平，而引入免疫组化技术后
SPA－在免疫组化中的应用——间接法
实验方法原理由于 SPA 能结合 IgG 的 Fc 段，因此就成为天然的抗 IgG，酶标记的 SPA 可代替酶标记的 IgG 抗血清，从而测定和定位组织内的 IgG 或免疫复合物。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒H2O2TBS第一抗体SPA-HRPDAB二甲苯乙醇树胶实验步骤1. 石蜡切片常规脱蜡至水。
SPA－在免疫组化中的应用——PAP－法
SPA 可为多种示踪物（如荧光素、酶、胶体金、铁蛋白）所标记，应用较广泛的为酶标记 SPA 和金标记 SPA 技术。标记 SPA 常用的酶为 HRP，可应用于间接法染色，SPA 在 PAP 法中可代替桥抗体。实验方法原理SPA 除与标记物结合后用于代替第二抗体外，其本身可作为桥抗体用于 PAP 染色
测定蛋白质的定量的方法有哪些及其原理
在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致最大吸收峰由465nm变为595nm，同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA与Bradford试剂混合
液压伺服系统工作原理及其电气故障诊断方法
液压伺服系统液压伺服系统是使系统的输出量，如位移、速度或力等，能自动地、快速而准确地跟随输入量的变化而变化，与此同时，输出功率被大幅度地放大。液压伺服控制是复杂的液压控制方式。液压伺服系统是一种闭环液压控制系统。液压伺服系统结构输入元件给出输入信号，加于系统的输入端。反馈测量元件测量系统的输出量，并
漆膜划格仪的工作原理及其操作使用方法
漆膜划格器工作原理和适用范围:1.该仪器以一定规格的工具，将涂层做格阵图形切割并穿透，划格完成的图形按六级分类，评定涂层从底材分离的抗性。漆膜划格器技术指标:1.多刃切割刀间距分别为：1+0.01mmL，2+0.01mm，3+0.01mm。2.多刃切割刀齿顶直线度分别为：≯0.003mm≯0.006
测定蛋白质的定量的方法有哪些及其原理
测定蛋白质的定量的方法：（一）实验原理双缩脲法（Biuret法）和Folin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超
扫描电镜的类型及其使用方法和工作原理
目前，已经成功研制出的扫描电镜包括：典型的扫描电镜、扫描透射电镜（STEM）､场发射扫描电镜（FESEM）、冷冻扫描电镜（Cryo-SEM），低压扫描电镜( LVSEM)、环境扫描电镜( ESEM）、扫描隧道显微镜（STM )、扫描探针显微镜( SPM )，原子力显微镜（AFM）等，以下介绍几种
溶菌酶的制备及其性质测定的原理和操作方法
实验概要本实验介绍了溶菌酶（lysozyme）的制备及其性质测定的原理和操作方法。实验原理溶菌酶（lysozyme）是由弗莱明在1922年发现的，它是一种有效的抗菌剂，全称为 1，4-β-N-溶菌酶，又称作粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶或胞壁质酶。活性中心为天冬氨酸52和谷氨酸35，是一种糖苷水解酶
传感器的三种分类方法及其工作原理
传感器常按工作原理、输人信息和应用范围来分类。 按工作原理分类 传感器按其传感的工作原理不同，大体上可分为物理型、化学型及生物型三大类。物理传感器物理传感器是利用某些变换元件的物理性质，以及某些功能材料的特殊物理性能制成的传感器。如利用金属、半导体材料在被测量作用下引起的电阻值变化的电阻式传
扫描电镜的类型及其使用方法和工作原理
目前，已经成功研制出的扫描电镜包括：典型的扫描电镜、扫描透射电镜（STEM）､场发射扫描电镜（FESEM）、冷冻扫描电镜（Cryo-SEM），低压扫描电镜( LVSEM)、环境扫描电镜( ESEM）、扫描隧道显微镜（STM )、扫描探针显微镜( SPM )，原子力显微镜（AFM）等，以下介绍几种
大气中主要的气态污染物及其测定方法介绍
气态污染物测定大气中的含硫污染物主要有H2S、SO2、SO3、CS2、H2SO4和各种硫酸盐,主要来源于煤和石油燃料的燃烧、含硫矿石的冶炼、硫酸等化工产品生产排放的废气。1.SO2测定作为大气污染的主要指标之一,二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)在各种大气污染物中分布最广、影响最大。因
原子吸收分析中存在的干扰及其消除或抑制方法
原子吸收分析中存在的干扰及其消除或抑制方法 原子吸收分析中常常遇到的干扰有物理干扰和化学干扰。其次是光谱干扰和电离干扰。 1 物理干扰 物理干扰是指试样在转移、蒸发和原子化过程中，由于试样任何物理性质的变化而引起的原子吸收信号强度变化的效应。物理干扰属非选择性干扰。 为消除物理干扰，保证分析
俄歇电子能谱原理介绍及其在元素成像中的应用
海南大学周阳副教授 海南大学周阳副教授发表主题为“俄歇电子能谱（Auger electron spectroscopy）原理介绍及其在元素成像中的应用”的精彩报告。俄歇电子能谱（AES）是一种表面科学和材料科学的分析技术，可用于获得元素种类，含量和分布等信息。其原理是：当原子内层电子被激发
误差及其表示方法
误差——分析结果与真实值之间的差值 ( > 真实值为正，< 真实值为负) 一. 误差的分类 1. 系统误差（systermatic error ）——可定误差（determinate error） （1）方法误差：拟定的分析方法本身不十分完善所造成； 如：反应不能定量完
试剂及其取用方法
根据化学试剂的纯度，按杂质含量的多少，国内将化学试剂分为四级：一级试剂（优级纯试剂）通常用G.R表示。二级试剂（分析纯试剂）通常用A.R表示。三级试剂（化学纯）通常用C.P表示。四级试剂（实验或工业试剂）通常用L.R表示。此外，根据特殊的工作目的，还有一些特殊的纯度标准。例如光谱纯、萤光纯、半导体
涂镀层测厚仪介绍及其原理
超声测厚仪按工作原理分：有共振法、干涉法及脉冲反射法等。几种，由于脉冲反射法并不涉及共振机理，与被测物表面的光洁度关系不密切，所以超声波脉冲法测厚仪是zui受用户欢迎的一种仪表。1 测厚仪工作原理超声波测厚仪主要有主机和探头两部分组成。主机电路包括发射电路、接收电路、计数显示电路三部分，由发射电路产
涂层测厚仪的原理及其应用
涂层测厚仪的原理及其应用 一、涂层测厚仪原理 磁性测厚原理：当测头与覆层接触时，测头和磁性金属基体构成一闭合磁路，由于非磁性覆盖层的存在，使磁路磁阻变化，通过测量其变化可计算覆盖层的厚度。 涡流测厚原理：利用高频交电流在线圈中产生一个电磁场，当测头与覆盖层接触时，金属基体上产生电涡流，并对测
激光粒度仪及其原理介绍
激光粒度分析仪仪是根据光的散射原理测量粉颗粒大小的，是一种比较通用的粒度仪。其特点是测量的动态范围宽、测量速度快、操作方便，尤其适合测量粒度分布范围宽的粉体和液体雾滴。对粒度均匀的粉体，比如磨料微粉，要慎重选用。激光粒度仪集成了激光技术、现代光电技术、电子技术、精密机械和计算机技术，具有测量速度快、
传感器原理及其应用
传感器原理 传感器是一种检测装置，能感受到被测量的信息，并能将感受到的信息，按一定规律变换成为电信号或其他所需形式的信息输出，以满足信息的传输、处理、存储、显示、记录和控制等要求。 按被测物理量划分的传感器，常见的有：温度传感器、湿度传感器、压力传感器、位移传感器、流量传感器
球磨机卸料的方式及其原理
球磨机是物料被破碎之后，再进行粉碎的关键设备。它广泛应用于水泥，硅酸盐制品，新型建筑材料、耐火材料、化肥、黑与有色金属选矿以及玻璃陶瓷等生产行业，对各种矿石和其它可磨性物料进行干式或湿式粉磨。 球磨机适用于粉磨各种矿石及其它物料，被广泛用于选矿，建材及化工等行业，可分为干式和湿式两种磨矿方式。根据
基于免疫原理的POCT技术及其原理
基于免疫反应原理的POCT测试装置依据流动相的流动方式可粗略地被分为两大类：一类为免疫渗滤技术，利用多孔基质形成反应池，在非均相免疫测试(渗滤)中作为固相；另一类为免疫层析技术，沿着多孔材料(横流)进行分离。用于POCT检测装置抗体的标记物常见的有3类：胶体金标记、彩色乳胶标记、酶标记，其中
免疫组化方法免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶
免疫组化方法的具体实验流程步骤
实验流程简介一、SP三步法1）石蜡切片，常规脱蜡至水。2)0.3%或3%H2O2去离子水（无色液体）孵育10-30分钟，以灭活内源性过氧化物酶活性。3）蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟4）候选步骤：采用抗原修复：微波（建议30分钟内4次中火）、高压、酶修复方法。自然冷却，再用3分钟×3次.5）血清封闭：
关于免疫组化的基本原理的介绍
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好