双重免疫组化实验原理及注意事项
双重免疫组化是科研中的较好的一种免疫组化方法，其原理就是根据阳性表达部位和阳性表达区域不同所建立的一种直观的多色定位的染色方法。其标记的对象是两种或两种以上的细胞部位。主要标记部位如下： 1.膜+浆型 2.膜+核型 3.浆+核型 切不可膜+膜，核+核，以免影响效果和颜色重叠。由于HRP和AEC显色系统的肉眼镜下颜色不同，所以直接抗原定位表达就非常直观了。 双重免疫组化的步骤： 1、切片脱蜡至水 2、阻断内源性过氧化物酶（198毫升甲醇或水+2毫升30% H2O2）室 温20分钟。 3、pH7.2缓冲液洗三次。 4、胰蛋白酶消化37 ℃，30分钟。（或按说明书要求：放入抗原修复液内微波修复20分钟、或电炉加热30分钟、或高压锅加帽出气后3分钟，快速冷却；或不处理） 6、滴加正常血清37 ℃，30分钟。（可不用） 7、擦去多余血清，加一抗3......阅读全文
Westernblot实验步骤及注意事项
Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分*1分钟）维持4℃4. 加入PMSF（每克组织30μ
实验室蒸馏操作实验及注意事项
隔网加热冷管倾，上缘下缘两相平。需加碎瓷防暴沸，热气冷水逆向行。 解释： 1、隔网加热冷管倾："冷管"这冷凝管。意思是说加热蒸馏烧瓶时要隔石棉网（防止蒸馏烧瓶因受热不均匀而破裂），在安装冷凝管时要向下倾斜。 2、上缘下缘两相平：意思是说温度计的水银球的上缘要恰好与蒸馏瓶支管接口的下缘在同一
实验室萃取操作实验及注意事项
萃剂原液互不溶，质溶程度不相同。充分振荡再静置，下放上倒切分明。 解释： 1、萃剂原液互不溶，质溶程度不相同：“萃剂”指萃取剂；“质”指溶质。这两句的意思是说在萃取操作实验中，选萃取剂的原则是：萃取剂和溶液中的溶剂要互不相溶，溶质在萃取剂和原溶剂中的溶解度要不相同（在萃取剂中的溶解度要大于在
实验室过滤操作实验及注意事项
斗架烧杯玻璃棒，滤纸漏斗角一样。过滤之前要静置，三靠两低不要忘。 解释： 1、斗架烧杯玻璃棒，滤纸漏斗角一样："斗"指漏斗；"架"指漏斗架。这两句说明了过滤操作实验所需要的仪器：漏斗、漏斗架、烧杯、玻璃棒、滤纸、并且强调滤纸折叠的角度要与漏斗的角度一样（这样可以是滤纸紧贴在漏斗壁上）。 2
免疫荧光实验原理及操作
免 疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体 分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
主被动回避实验原理及方法
主被动回避实验方法一.实验原理主被动回避实验是利用动物的好暗避光（明暗穿梭）、对厌恶刺激（如足电击）的恐惧和记忆而建立起来的。所以对实验者（而不是对动物）而言，回避实验在技术上与暗示关联条件恐惧相类似。所用的刺激为温和的足电击，发生的反应是动物逃避曾经受到电击刺激的地方。根据动物的逃避方式分为主动回
ELISPOT技术原理及实验方法
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用，使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法（ELISA）检测体液中游离的细胞因子（CK）或抗体，但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切的反映体内的抗体及
免疫组化实验防脱片的处理方法
脱片是免疫组织化学中经常遇到的问题(尤其是脑组织冰冻切片)，一般来说脱片主要有以下几种原因：1. 组织固定、脱水、透明不充分2．组织切片过厚3．组织切片有折叠4．过度的热抗原修复(高压、微波、水煮)处理或抗原修复液的pH偏高5．操作过程中，冲洗方法不正确等在实际操作的过程中，除了要注意以上几点之外，
免疫组化实验中常用的抗体是什么？
免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体，单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
静水天平的注意事项及原理
注意事项 1、天平应保持清洁，谨防灰尘等钻入。不应放在有腐蚀性气体的环境中。 2、电源和计算机外壳有良好接地。 3、如果天平长期不用，应关闭电源。 原理 1、阿基米德浮力原理：F浮=ρ液gV排。 2、准备：密度为1g/cm3的液体（只要是已知的就可以，取“1”便于计算），待测实心物品
紫外灯的原理及注意事项
工作原理 紫外线来源 与可见光和红外线相同，都是由于原子外层电子受到激发而产生的。例如以电能激发汞蒸气中的汞原子，即可发出紫外光。为了增加有效距离，需要使用石英玻璃作为灯管材料。 杀菌诱变原理 当有机污染物经过紫外线照射区域时，紫外线会穿透生物的细胞膜和细胞核，紫外线被DNA或RNA的碱
彗星试验原理及注意事项（二）
彗星试验试剂盒北京汇智泰康针对碱性彗星试验开发彗星试验试剂盒，本试剂盒提供了彗星试验（单细胞凝胶电泳试验）需要的主要试剂盒耗材，省去了细胞裂解液、细胞悬液、碱性电泳液、电溶胶配制等时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期；试剂盒各成分均经过严格的质量检测和多次试验验证，符合碱性彗星试验要求，实验结果准
烘箱的加热原理及注意事项
加热原理 热风加热 通过电能使加热管加热，并通过电机通过风道送风使烘箱内部温度达到均匀。送风方式又分垂直循环送风和水平循环送风 。通过不同的送风方式使加热更合理，均匀。 油加热 导热油 是将电加热器直接插入有机载体(导热油)中直接加热,并通过高温油泵进行液相循环将加热后的导热油输送到用热
溶血试验的原理及注意事项
溶血试验是国标中规定的一种对细菌进行筛选鉴定的方法。常用于链球菌、弧菌、白喉杆菌等的区分鉴定。基本原理不少细菌都能产生溶血素，可以溶血平板，因此在这些细菌周围会出现溶血环。不同细菌产生的溶血素不同，比如： 溶血素类型 溶血素类型 产气荚膜梭菌
彗星试验原理及注意事项（二）
样本制备：在最后一次用测试化学品后的适当时间，对动物实施安乐死。收集选定的组织,而同时采集同一组织的一部分,放置在甲醛溶液或适当的固定剂可能组织病理学分析。彗星实验的组织被放置在切碎缓冲液中，用冷切碎缓冲液充分冲洗以去除残留的血液，并储存在冰冷的切碎缓冲液中，直到处理完毕。原位灌注也可进行，如肝、肾
钳形表工作原理及注意事项
钳形表工作原理 钳形表是集电流互感器与电流表于一身的仪表，其工作原理与电流互器测电流是一样的。钳形表是由电流互感器和电流表组合而成。电流互感器的铁心在捏紧扳手时可以张开；被测电流所通过的导线可以不必切断就可穿过铁心张开的缺口，当放开扳手后铁心闭合。穿过铁心的被测电路导线就成为电流互感器的一次线
彗星试验原理及注意事项（一）
体内碱性彗星试验原理及注意事项体内碱性彗星试验在化合物遗传毒性评价中的应用日益广泛。ICH S2(R1)已将肝脏彗星试验列为第2个组织/终点的体内试验；体内哺乳动物碱性彗星试验的指导原则（TG489）也已颁布。体内碱性彗星实验能够检测DNA链断裂、碱性不稳定位点、不完整切除修复引起的DNA链的断
溶血试验的原理及注意事项
溶血试验是国标中规定的一种对细菌进行筛选鉴定的方法。常用于链球菌、弧菌、白喉杆菌等的区分鉴定。基本原理:不少细菌都能产生溶血素，可以溶血平板，因此在这些细菌周围会出现溶血环。不同细菌产生的溶血素不同，比如：溶血素类型溶血素类型产气荚膜梭菌卵磷脂酶肺炎球菌肺炎溶素溶血性链球菌链球菌溶血素 O/S葡萄球
自动双重纯水蒸馏器特点及清洗维护
自动双重纯水蒸馏器特点：本仪器的主要材料全部采用玻璃制成蒸馏的水不与任何金属相接触，经过两次蒸馏获得的纯水度高，加热器采用石英玻璃制成，能起到节能、洁净、长寿、辐射率高等优点。 2、自动双重纯水蒸馏器出水量：每小时1600ml，本仪器一次、二次、蒸馏均有继电器保护装置。使用安全可靠，各次蒸馏开关，通
自动双重纯水蒸馏器特点及清洗维护
自动双重纯水蒸馏器特点及清洗维护自动双重纯水蒸馏器特点：本仪器的主要材料全部采用玻璃制成蒸馏的水不与任何金属相接触，经过两次蒸馏获得的纯水度高，加热器采用石英玻璃制成，能起到节能、洁净、长寿、辐射率高等优点。 2、自动双重纯水蒸馏器出水量：每小时1600ml，本仪器一次、二次、蒸馏均有继电器保护装置
关于免疫组化的基本原理的介绍
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
免疫组化方法中关键环节及其原理（二）
二、免疫荧光方法中的重要环节 1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。 2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min,尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和
免疫组化方法中关键环节及其原理（一）
一、酶免疫组化的关键环节 1、标本固定：固定的目的是①防止标本从玻片上脱落；②除去防碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③固定的标本易于保存。 2、脱水、石蜡包埋和制片：脱水用梯度乙醇（由低到高）充分脱水、对组织要完全浸蜡、切片时刀片要干净和锋利。否则，容
免疫组化实验一般需要购买哪些实验器材与试剂
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
实验室氧气的制取实验及注意事项
实验先查气密性，受热均匀试管倾。收集常用排水法，先撤导管后移灯。 解释： 1、实验先查气密性，受热均匀试管倾。"试管倾"的意思是说，安装大试管时，应使试管略微倾斜，即要使试管口低于试管底，这样可以防止加热时药品所含有的少量水分变成水蒸气，到管口处冷凝成水滴而倒流，致使试管破裂。"受热均匀"的
WesternBlot实验方法及注意事项
实验原理：WesternBlot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与经辣根过氧化
Western－blot实验步骤及注意事项
2. 电泳(Electrophoresis)(1) SDS-PAGE凝胶配制SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。(2) 样品处理在收集的蛋白样品中加入适
细胞凋亡实验步骤及注意事项
一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好