免疫组化技术规范

欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作,建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会(CCP)免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法,同时,发现和推广标准化的染色程序,改善和提高免疫组化实验的可靠性,使免疫组化技术更具标准化,免疫组化结果更具可靠性和重复性。尽管免疫组化在许多实验室中已常规开展,但它是一个多步骤、多因素决定的一种实验方法,由于各实验室采用的修复方法、染色方法、试剂厂家、抗体克隆号、检测系统等有所不同,染色结果会出现较大差异,相当部分的实验室对免疫组化标准化的认识尚欠足够重视, 致使不良的染色结果对病理诊断引起误导,因此免疫组化染色结果的可靠性受到了极大的关注。 在实际工作当中有许多因素影响着免疫组化的结果,包括技术人员是否熟练掌握整个实验的操作程序、抗体的特异性、方法的敏感性、标本的固定、组织的处理、是否进行抗原修复、修......阅读全文

石蜡切片免疫组化实验

即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于:(1)确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究;(2)诊断异常细胞,指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后,加入

免疫组化的试剂准备

最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗,注意抗体的特异性、效价和交叉反应,最好用单抗。其他常用试剂有:1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS),稀释抗体和洗片子用;2、清洁液、纯水,洗玻片用3、多聚赖氨酸处理载玻片,防止脱片4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;5、15%~30%蔗糖

免疫组化镜检简介

  在镜检前可以通过相关资料查询抗体的表达部位:细胞间质、细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核以及在其中的多个部位表达(如:MPO抗体表达在细胞膜、细胞浆、核膜、细胞核上)和表达组织(如:VWF抗体在血管壁上表达,呈现环形)。  在显微镜下观察时,先在4倍镜下查找组织及其范围,然后查看整个组织确定阳性产物的

免疫组化的操作流程

实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程,主要有:脱蜡和水化,抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位

免疫组化--病理诊断-(一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20个世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一

免疫组化的操作步骤

1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,

石蜡切片免疫组化步骤

实验概要石蜡切片免疫组织化学染色主要试剂染色缸;染色架;保湿盒;晾片盘;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性树胶等实验步骤1.     石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟;2.     脱蜡和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95

免疫组化--病理诊断-(二)

2.6进一步分类不同器官与组织交界处肿瘤由于重叠的特征,在一些组织器官交界处的肿瘤,仅凭组织学基础对肿瘤进行分类很困难。如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是间质起源的胃肠道间质瘤(GIST),还是神经起源的神经鞘瘤;同样发生于组织交界处的肿瘤有睾丸胚胎癌与精原细胞癌,两者较难区别,且治疗与

免疫组化操作规程

(一)、仪器设备   1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;    2)水浴锅(二)、试剂     1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。    2)0.01mo

免疫组化病理诊断(一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一些

脑卒中诊疗技术规范研究通过验收

  7月26日,记者从北京天坛医院获悉,由该院承担的“脑卒中诊疗技术规范研究”通过专家验收。与会专家认为,通过该项目的实施,不仅有助于提高北京脑血管病医疗质量、改善患者生活质量,而且显著提升了北京脑血管病临床研究水平。   据了解,该项目是北京市科委启动首都十大疾病科技攻关工作以来脑血管病领域设立

射频导纳物位计的功能技术规范

  射频导纳物位计的原理确定了它的功能和适用范围。射频导纳物位计应用广泛,几种典型场合如下:化学药品 塑料、薄膜、饲料/谷物、橡胶、药品、液体、 废水、沙子、食品、泥浆、水泥、粉状体、涂料/衣料、煤、颗粒状固体、油、纸浆。  功能技术规范   适用对象:高温、高压、易燃易爆、有毒、腐蚀等工况下,对液

冷媒检漏仪的技术规范

  控制: 电源:on/off,灵敏度;高/低  带电池的重量: 0.54公斤  电源: NIMH条状电池,可连续使用6.5小时  充电条件: 220VAC电源适配器带2米电缆,12V电源 适配器带打火机插头  探头长度: 43厘米  充电器: 内置  工作温度范围: 0℃至50℃  贮存温度范围:

射频导纳物位计的机械技术规范

  机械技术规范   结构材料:探杆:Teflon、刚玉等;   连接螺纹:316SS不锈钢、1Gr18ni9Ti不锈钢等;   探头电气盒:低铜铝合金;   控制器外壳:镀锌钢板烤漆。   探杆种类:棒式、同轴式、缆式、重型缆式等。   流程连接:¾NPT、1NPT锥管螺纹;36×2公制螺纹;法兰

细胞培养无菌操作技术规范

打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。 4.风淋2分钟。 5.0.1%过氧乙酸水泡手,擦干。 6. 点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培

《绿色轮胎技术规范》即将正式出台

  2013年12月27日,中国轮胎企业一直高度关注的《绿色轮胎技术规范》行业自律标准,已由中国橡胶工业协会组织制定并完成征求意见稿,即日起在行业内广泛征求意见,并预计2014年一季度由中国橡胶工业协会正式发布。  减少汽车尾气排放已成为全球高度关注的热点之一,而轮胎与汽车二氧化碳排放息息相关。绿色

石蜡切片免疫组化染色步骤

1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:1.1

免疫组化的具体步骤

一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次

免疫组化的细胞凋亡检测

  细胞凋亡原理:正常凋亡细胞通过检测凋亡细胞DNA片段进行染色,正常的、人为造成凋亡的细胞很少能够被染色。以甲基绿复染,便于从形态学上分辨评估正常细胞和凋亡细胞。  首先确定目标凋亡细胞的组织部位(如眼球组织,由于玻璃体结构内没有细胞核,因此看不到凋亡,在整个组织的最外面有单层视网膜细胞,因此只能

免疫组化结果如何分析?

(1)阳性着色细胞计数法。在40*光镜下,随机选择不重叠的10个视野,人工或机器计数阳性着色细胞,每组3~6张不同动物组织切片,然后进行组间比较即可。 (2)灰密度分析法。通过在不同组别和不同动物组织切片上选择相同区域、相同条件下用image j进行灰密度分析,然后进行统计分析即可。

免疫组化的特点相关介绍

  1)特异性强  免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。  2)敏感性高  在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上

什么叫荧光免疫组化技术

  用荧光标记的二抗 做免疫组化,通过荧光显微镜观察实验结果。就是荧光免疫组化。

免疫组化的具体步骤

免疫组化操作步骤一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗

免疫组化的相关分类介绍

  免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。  这些常用免疫组织化学方法的原理如下:  1. 免疫荧光细胞化学技术  将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的

石蜡切片免疫组化染色方法

1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:1.1

免疫组化SABC法操作流程

1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 ℃温箱中,将多聚赖

免疫组化SABC法操作流程

 1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 oC温箱中,将多

石蜡切片免疫组化实验3

卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法实验材料蜡块切片试剂、试剂盒多聚甲醛蒸馏水蔗糖过氧化氢甲醇PBS酒精KPBS牛血清白蛋白叠氮纳一抗二抗仪器、耗材冰箱显微镜烧杯实验步骤1.  4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01 M KPBS清洗5

免疫组化的基本概念

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术

免疫组化的具体步骤

一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次