基因的转移与重组(二)
二、转导 以噬菌体为媒介,把供细菌的基因转移到受体菌内,导致后者基因改变的过程称为转导。 当噬菌体在细菌中增殖并裂解细菌时,某些DNA噬菌体(称为普遍性转导噬菌体)可在罕见的情况下(约105~107次包装中发生一次),将细菌的DNA误作为噬菌体本身的DNA包入头部蛋白衣壳内。当裂解细菌后,释放出来的噬菌体通过感染易感细菌则可将供体菌的DNA携带进入受体菌内。如发生重组则受体菌获得了噬菌体媒介转移的供体菌DNA片段。这一过程称为普遍性转导。质粒也有可能被包入衣壳进行转导。不具有转移装置的质粒依赖噬菌体媒介进行转移,转导可转移比转化更大片段的DNA,转移DNA的效率较转化为高。 另一种转导称为局限性转导,指仅为特殊局限的一部分细菌DNA能被转导。只有温和噬菌体可进行局限性转导。当温和噬菌体进入溶原期时,则以前噬菌体形式整合于细菌染色体的一个部位。当其受激活或自发进入裂解期时,如果该噬菌体DNA在脱离细菌染色体时发......阅读全文
基因物质的转移和重组
(1)转化:是受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组,使受体菌的性状发生变异的过程。(2)转导:是以温和噬菌体为媒介,将供体菌的基因转移到受体菌内,导致受体菌基因改变的过程。(3)接合:是受体菌和供体菌直接接触,供体菌通过性菌毛将所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。(4)溶原性
基因的转移与重组(二)
二、转导 以噬菌体为媒介,把供细菌的基因转移到受体菌内,导致后者基因改变的过程称为转导。 当噬菌体在细菌中增殖并裂解细菌时,某些DNA噬菌体(称为普遍性转导噬菌体)可在罕见的情况下(约105~107次包装中发生一次),将细菌的DNA误作为噬菌体本身的DNA包入头部蛋白衣壳内。当裂解细菌后,释
基因的转移与重组(一)
遗传型变异还可通过两个不同性质细菌之间发生遗传物质的转移和重组而实现。在基因转移中,提供DNA的细菌为供体,而接受DNA的细菌是受体。基因转移后获得重组的子代,即具有供体与受体菌二者的主要特性。实现基因转移需要两个基本条件:一是全部或部分供体菌的基因相应进入受体菌;二是在受体菌中形成重组(杂交)
基因物质转移和重组的途径
(1)转化:是受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组,使受体菌的性状发生变异的过程。(2)转导:是以温和噬菌体为媒介,将供体菌的基因转移到受体菌内,导致受体菌基因改变的过程。(3)接合:是受体菌和供体菌直接接触,供体菌通过性菌毛将所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。(4)溶原性
细菌基因物质的转移和重组
1.转化:受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组。2.转导:以噬菌体为媒介 ,将供体菌的基因转移到受体菌内。3.接合:性菌毛 将供体菌所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。主要见于革兰阴性菌。4.溶原性转换:噬菌体的DNA与细菌染色体重组。5.原生质体融合:两种失去细胞壁的原生质
医学资料笔记2-基因的转移和重组
细菌间基因的转移与重组是发生遗传性变异的重要原因之一。DNA可以从一种生物转移至另一生物,整合至染色体,改变其遗传信息的组成,这类基因转移的方式称之为基因水平转移。这类遗传物质的交流可发生在亲缘、远缘,甚至无亲缘关系的生物之间。根据DNA片段的来源及交换方式等不同,将基因转移和重组分为转化、转导
细菌基因转移与重组的方式有哪些?
1.接合作用:当细菌与细菌相互接触时,质粒DNA就可从一个细菌转移到另一个细菌。2.转化作用:由外源性DNA导入宿主细胞,并引起生物类型改变或使宿主细胞获得新的遗传表型的过程,称为转化作用。3.转导作用:当病毒从被感染的细胞释放出来,再次感染另一细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因
微生物基因的转移和重组都有哪些?
基因的突变 ◇基因突变的规律 (1)自发突变和诱导 一般细菌每分裂106~109次即可发生一次。 (2)随机突变和选择 突变是随机和不定向的,细菌染色体上数千个基因中哪个基因发生突变、导致何种性状的改变均不是由外界因素决定。 (3)突变和回复突变 某种细菌在自然环境下大多数所具有的
基因的转移与重组体的筛选和鉴定1
第一节 转化基因片段在体外只是一段核酸分子,是化学物质,无法表现出遗传物质的生命活性。只有当其存在于活细胞后,生命的特征才能充分展示出来。在分子克隆实践中,在体外操作的核酸分子只有进入细胞以后才能达到克隆的目的。一、重组DNA分子转入原核生物细胞1. 重组质粒DNA分子转化大肠杆菌转化(transf
基因的转移与重组体的筛选和鉴定2
二、重组DNA分子转入真核细胞1. 根癌农杆菌Ti质粒介导法农杆菌介导的Ti质粒载体转化法是目前研究最多、机制最清楚、技术方法最成熟的基因转化途径。迄今为止约8096的转基因植株都是利用农杆菌介导转化系统获得的。农杆菌是一类土壤习居菌,革兰氏染色呈阴性,能感染双子叶植物和裸子植物,而对绝大多数单子叶
基因的转移与重组体的筛选和鉴定5
(二)目的克隆的鉴定经过初步筛选获得的阳性克隆,下一步必须对带有目的序列的克隆做进一步筛选和鉴定。鉴定一般有几种常用方法:(1)分子杂交;(2)免疫学检测;(3)DNA测序;(4)蛋白质活性筛选;(5)基因互补实验。1. 分子杂交核酸分子杂交有多种方法:原位杂交、点杂交及Southern杂交等。原理
基因的转移与重组体的筛选和鉴定3
2. 定向克隆使目的基因按一定的方向插入载体的克隆方案称为定向克隆。最常用的定向克隆方案使用两种限制性内切酶切割载体和目的基因,从而在载体和目的基因两端产生非同源互补的两个粘性末端。定向克隆也可以通过在一端造成平端,另一端产生同源粘性末端实现年-平连接。定向克隆有效的限制了自身环化,并且实现了目的基
基因的转移与重组体的筛选和鉴定4
(3)插入表达筛选法与插入失活相反,插入表达法是外源目的基因插入特定载体后,能激活用于筛选操作的标记基因的表达,由此进行转化子的筛选。设计载体时,在筛选标记基因前面连接一段具有抑制作用的负调控序列,插入外源DNA将使该负调控序列失活,其下游的筛选标记基因才能表达。例如质粒pTR262有一个负调控的c
基因重组和DNA重组区别
基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。 在人类的生殖细胞中发现的46条染色体发生在生物体内基因的交换或重新组合。基因重组是生物遗传变异的一种机制,包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。DNA重组指DNA分子内或分子间发生的遗传
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
一、转染方法对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方,这些配方都具有单一的ZL化组分,而且毫无疑问,它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲—- 在使用这些试剂时,对于超出数百毫升规模的瞬时转染,经济上是不可行的。大
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
实验步骤 一、转染方法 对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方,这些配方都具有单一的ZL化组分,而且毫无疑问,它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
报道显 TK,在 过 去 的 1 0 年 ,已经开发出 了多种高效的瞬时转染(transient transfection) 方法 , 它们可 以 满 足 甚 至 超出 了 上 述 需 求 。 目 前 蛋 白 质 的 瞬 转 表 达 主 要 是 在H E K 2 9 3 衍生的细胞系中进行, 而同时
基因转移的转移方法
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。物理方法包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原
基因转移的转移方法
基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。物理方法包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原
基因转移的转移步骤
(1)配制下列溶液①2×HEPES-缓冲盐溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm滤器过滤除菌,分装贮存于4℃。④DNA:将DNA(约20μg/106细胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用浓度为40μg/ml。为使转化效率达到最高,质粒DNA应用CsCl
基因转移的转移步骤
(1)配制下列溶液①2×HEPES-缓冲盐溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm滤器过滤除菌,分装贮存于4℃。④DNA:将DNA(约20μg/106细胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用浓度为40μg/ml。为使转化效率达到最高,质粒DNA应用CsCl
基因转移的转移步骤
(1)配制下列溶液①2×HEPES-缓冲盐溶液(HBS)②2mol/L CaCl2③0.1×TE(pH8.0)用0.22μm滤器过滤除菌,分装贮存于4℃。④DNA:将DNA(约20μg/106细胞)溶于0.1×TE(pH8.0),使用浓度为40μg/ml。为使转化效率达到最高,质粒DNA应用CsCl
关于基因重组的自然重组的介绍
自然界不同物种或个体之间的基因转移和重组是经常发生的,它是基因变异和物种进化的基础。自然界的基因转移的方式有: 接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA就可从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌),这种类型的DNA转移称为接合作用(conjugation )。 转化作用(
基因重组的简述
基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。1974年波兰斯吉巴尔斯基(Waclaw Szybalski)称基因重组为合成生物学,1978年他在《基因》期刊中写道:限制酶将带领我们进入合成生物学的新时代。
基因重组的定义
重组(recombination) 杂交后代的个体中出现了亲代所没有的基因组合的现象。
什么是基因重组
基因重组是造成基因型变化的核酸的交换过程,是生物体内细胞中DNA序列的改变。基因重组是在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。基因重组一般发生在减数分裂过程中,包含两种情况,一种是减一后期同源染色体上的等位基因彼此分离,非同源染色体上的非等位基因彼此结合;另一种情况是联会时期的交叉
基因重组的分类
①基因的自由组合:减数分裂(减1后期)形成配子时,随着非同源染色体的自由组合,位于这些染色体上的非等位基因也自由组合。组合的结果可能产生与亲代基因型不同的个体。②基因的交叉互换:减Ⅰ四分体时期,同源染色体上(非姐妹染色单体)之间等位基因的交换。结果是导致染色单体上基因的重组,组合的结果可能产生与亲代
基因重组的应用——基因诊断
通过使用基因芯片分析人类基因组,可找出致病的遗传基因。癌症、糖尿病等,都是遗传基因缺陷引起的疾病。医学和生物学研究人员将能在数秒钟内鉴定出Z终会导致癌症等的突变基因。借助一小滴测试液,医生们能预测药物对病人的功效,可诊断出药物在ZL过程中的不良反应,还能当场鉴别出病人受到了何种细菌、病毒或其他微生物
基因重组应用——转基因技术
基因重组中转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重组DNA片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技
基因转移技术
基因转移技术分为两类:第一类是将目的基因转导入体外培养的细胞或导入从体内取出的细胞,观察目的基因在细胞中的表达,这项技术称基因转染(gene transfection)技术。通常情况下,该技术转入的目的基因不与细胞染色体发生整合,而是在细胞质呈现暂时性表达,随时间推移而逐渐减弱或消失。第二类是将