知识分享：AAV在肺部的应用
腺相关病毒（AAV）属于依赖病毒属，细小病毒亚科，是一类自然缺陷的单链DNA病毒。野生型AAV基因组约4.7kb，含有rep和cap基因以及两端的ITR序列。尽管人类对AAV易感，但临床还并未发现与AAV相关的疾病。根据AAV衣壳蛋白基因的变异，可将AAV分为不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同的组织特异性。将兴趣基因取代rep和cap基因构建一个两段带有ITR的载体，并将rep和cap置于一个独立的载体上，加上带有腺病毒辅助基因载体，便可包装出带有兴趣基因的重组腺相关病毒（rAAV）。 目前rAAV已被广泛作为基因转导载体使用，rAAV在人体实验中的安全性也已被证实。早在1996年，科学家们就选择肺作为rAAV的第一个靶向实验器官。下面我们旨在介绍rAAV在肺部实验中的启动子、血清型的选择，及其小鼠肺部的AAV注射方法。 启动子的选择 根据不同的注射方式和实验目的，可选择不同的启动子以提高肺部表达效率。CMV在......阅读全文
知识分享：AAV在肺部的应用
腺相关病毒（AAV）属于依赖病毒属，细小病毒亚科，是一类自然缺陷的单链DNA病毒。野生型AAV基因组约4.7kb，含有rep和cap基因以及两端的ITR序列。尽管人类对AAV易感，但临床还并未发现与AAV相关的疾病。根据AAV衣壳蛋白基因的变异，可将AAV分为不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
AAV在肺部的应用
腺相关病毒（AAV）属于依赖病毒属，细小病毒亚科，是一类自然缺陷的单链DNA病毒。野生型AAV基因组约4.7kb，含有rep和cap基因以及两端的ITR序列。尽管人类对AAV易感，但临床还并未发现与AAV相关的疾病。根据AAV衣壳蛋白基因的变异，可将AAV分为不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
腺相关病毒（AAV）在动物实验中的应用
腺相关病毒属于微小病毒科 (parvovirus)，为无包膜的单链线状 DNA 病毒，基因组大小约 4.7 kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中，具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点，广泛应用于动物体内研究。 腺相关病毒血清型众多(12种)，不同血清型
腺相关病毒（AAV）在动物实验中的应用
腺相关病毒属于微小病毒科 (parvovirus)，为无包膜的单链线状 DNA 病毒，基因组大小约 4.7 kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中，具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点，广泛应用于动物体内研究。 腺相关病毒血清型众多(12种)，不同血清型
腺相关病毒（AAV）在动物实验中的应用（一）
腺相关病毒属于微小病毒科 (parvovirus)，为无包膜的单链线状 DNA 病毒，基因组大小约 4.7 kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中，具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点，广泛应用于动物体内研究。腺相关病毒血清型众多(12种)，不同血清型对不同组织亲
腺相关病毒（AAV）在动物实验中的应用（二）
三、肝脏AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8，其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)（人、灵长类）；1×10^11 GC/只鼠，稀释成 50-10
关于工业内窥镜应用领域知识分享
工业内窥镜随着科学技术的不断发展，在各行业应用的频率越来越高，根据技术及应用范围的不同分为电子工业内窥镜、管道内窥镜、工业电子内窥镜等，下面给大家具体讲一讲工业内窥镜的应用领域。 一、发电厂 用于核电站、风力电厂、水力发电厂、火力电厂以及电力建设单位的设备检测, 如对涡轮机、管道、
知识分享：肿瘤相关基因
癌基因（英语：Oncogene，亦称为致癌基因）是细胞遗传物质的一部分, 它们参与细胞从正常生长状态到肿瘤的过程。它们通过诱导或突变被激活。 致癌基因 原癌基因是参与细胞生长、细胞分裂和细胞分化的正常基因。但当其发生突变后，就会变成致癌基因。它们会在诸如放射性物质，化学物
射频知识分享：调试篇
导语射频产品设计，在经历前期的器件选型，原理图绘制，LAYOUT相关阻抗控制等一系列工作后，当第一版样机出来之后，射频指标的调试，也是整个射频产品开发中比较重要的一个环节。射频指标调试，是基于射频产品开发初期，我们在开发方案射频指标理论值估算的基础上，通过调试让实际测试指标更接近我们理论值，从而实现
知识分享：基因定点突变
实验原理 基因定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法改变目的基因的序列，包括碱基的插入、缺失、点突变等。基因定点突变是基因研究中比较常用的方法，可以短时间内研究目的DNA所表达的目的蛋白的性状及表征。 定点突变需要设计特定的突变引物。引物长度一般为25-45 bp，建议选择3
分享移液器的日常维护保养知识
移液器是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具，除了正确使用移液器，日常维护保养也十分重要： 1.维护 (1)移液器不用时,应在专用支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。
分享移液器的日常维护保养知识
1.维护 (1)移液器不用时,应在支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。 (3)如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。 (4)根据使用频率,所有的移液器应定期用肥皂水清洗,或用60%的异丙醇消毒,
知识分享：细胞传代、培养的方法
实验原理： 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时 也将细胞数量扩大，就
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的精确性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数；
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数； g.定标板的光
知识分享：稳转株的制备
实验原理： 利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因
知识分享：mRNA的分离和纯化
实验原理 从细胞或组织中得到RNA是一种混合物，其中包括tRNA，rRNA和mRNA，其中RNA为75％～ 85％，tRNA占10％～16％，而mRNA仅占1%～5％，并且mRNA基因序列不同，分子量大小不均一，各基因的表达丰度也不一样。每克细胞可分离出5-10mg RNA。 真核生
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡
变频串联谐振设备知识分享
串联谐振变压器优点1、所需电源容量大大减小。串联谐振电源是利用谐振电抗器和被试品电容谐振产生高电压和大电流的，在整个系统中，电源只需要提供系统中有功消耗的部分，因此，试验所需的电源功率只有试验容量的1/Q.2、设备的重量和体积大大减少。串联谐振电源中，不但省去了笨重的大功率调压装置和普通的大功率工频
知识分享：质粒提取实验步骤
实验原理 现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法，前两种方法较为剧烈，适用于较小的质粒（＜15Kb），而去污剂裂解法则比较温合，一般用于分子量较大的质粒（＞15Kb）。 碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为：染色体DNA远大于质粒DNA，且
消化炉知识经验点分享
很多人只知道凯氏定氮仪，对消化炉却没有太多的了解，最终出现测定结果不准确、误差等一系列问题。因此在利用专业仪器开展试验前，我们必须熟知仪器本身及配套设备的构造原理及操作注意事项。消化炉也不例外，它是为加速样品消化煮解时间，提高蛋白质测定速度的理想仪器。它还能将消化管内溢出的有害气体，经过抽气
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡培
单晶培养科研实验知识分享
好多同学/老师一直培养不出单晶，或者周期太长了，希望这个分享能得到一些帮助。单晶培养的方法多种多样，如升华法、共结晶法等。最简单的最实用常用的有1.溶剂缓慢挥发法；2.液相扩散法；3.气相扩散法。99％的单晶是用以上三种方法培养出来的。一、单晶培养要点 1、一般以10--25mg 为佳，如果你只有2
AAV基因治疗的应用研究
所谓基因治疗，就是把一个具有治疗作用的基因放到病人的细胞中，借此替换缺失和功能异常的基因，最终达到治疗某种疾病的方法。尽管早在1990年美国就批准了基因治疗的方案，但是基因治疗真正在临床获批却少之又少。不过近期的一则新闻，无疑是为致力于医学转化的我们打了一针强心剂。5月27日，全球制药巨头葛兰素
类器官技术在药物研发领域的应用分享
类器官技术在药物研发领域有广泛的应用，以下是一些利用类器官技术开展的药物研发项目：新冠治疗药物筛选：2020年，上海交通大学联合威尔康奈尔医学院、西奈山伊坎医学院的研究团队利用人类多能干细胞生成的肺和结肠类器官系统，对美国食品药品管理局（FDA）批准的药物进行筛选，鉴定出了三种显示对新冠病毒（SAR
酶制剂在焙烤食品中的应用分享
面粉中的最重要的酶有淀粉酶和蛋白酶，但在焙烤加工中仪靠面粉中所含的酶是远远不够的，否则会造成面包等焙烤食品出炉后不久就变得粗糙、发硬、掉渣，影响制品的口感和质量。因此在生产上常需要补充加入酶，以改善面包外观色泽及焙烤风味，降低全麦粉制品粗糙口感。常用于焙烤食品中酶 一淀粉酶、B一淀粉酶、葡萄糖氧化酶
腺相关病毒AAV简介及应用
一、腺相关病毒简介腺相关病毒（Adreno-Associated Virus, AAV）是微小病毒科（Parvoviridae）家族的成员之一。这一家族成员是一类微小、无被膜及具有二十面体结构的病毒。病毒颗粒的直径在20～26nm之间，含有大小在4.7~6kb之间的线状单链DNA基因组。它的复制和增
AAV基因治疗的应用研究（二）
中国科学家在CRISPR/Cas9 与AAV的联合应用方面也不甘人后。比如，2016年3月，华东师范大学生命科学院院长刘明耀教授和李大力教授首次证明了通过Cas9基因编辑技术修复F9基因突变治疗B型血友病的可行性。刘教授的团队发现了B型血友病FIX基因的新型突变Y371D，同时找到小鼠上对应的氨
AAV基因治疗的应用研究（一）
GSK获批，基因治疗曙光来临所谓基因治疗，就是把一个具有治疗作用的基因放到病人的细胞中，借此替换缺失和功能异常的基因，最终达到治疗某种疾病的方法。尽管早在1990年美国就批准了基因治疗的方案，但是基因治疗真正在临床获批却少之又少。不过近期的一则新闻，无疑是为致力于医学转化的我们打了一针强心剂。5月2
德国Fevik菲维科分享冻干机知识
真空冷冻干燥是将含水物质先冻结成固态，然后使其中的水份从固态升华成气态，从而除去水份而保存物质的方法。 一、冻干机系统 1. 控制系统 控制系统有可编程程序控制器、触摸屏、外围继电器、传感器等组成。 2. 制冷系统 制冷系统由制冷压缩机及辅助设施构成，为干燥箱和冷阱