质谱法进行高通量蛋白鉴定的主要方法介绍

蛋白质组(Proteome)指由一个基因组或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质全谱分析目的在于鉴定样本中尽可能多的肽和蛋白质混合物的组分。基于质谱技术的全谱鉴定,可为蛋白高通量的定量和修饰分析提供参考信息。传统的方法如蛋白质微量测序、氨基酸组成分析(如Edman降解法)费时费力、通量低,存在不容易实现规模化和自动化,结果灵敏度差等问题。当前主流的基于软电离技术的液相色谱-质谱系统(LC-MS/MS)是实现高通量蛋白鉴定的主要方法。 其基本原理是:首先将纯化后的蛋白质用消化酶(如胰酶)水解成肽段,肽段混合物经过除盐后首先进入液相色谱,实现初步分离,以降低样品复杂度。经液相色谱分离后的肽段先经过质谱的第一级--离子源(ESI,MALDI)使肽段离子化并形成分散的离子。接着选择部分强度较高的肽段母离子进入质谱的第二级系统(碎裂源)做进一步碎裂,使肽段离子被打碎成更小的、有规律的碎片离子。理论上蛋白质序列经过酶解后形成......阅读全文

乳清蛋白的主要成分介绍

  β-乳球蛋白  具备最佳的氨基酸比例,支链氨基酸含量极高,对促进蛋白质合成和减少蛋白质分解起着重要的作用,有助于健身爱好者塑造优美体型。  α-乳白蛋白  是必需氨基酸和支链氨基酸的极好来源,也是唯一能与金属元素和钙元素结合的乳清蛋白成分。最近的研究更发现,它可能具有抗癌功能。此外乳白蛋白在氨基

关于结合珠蛋白的主要特性介绍

  人的结合珠蛋白为一种α2 球蛋白,其结构受遗传控制,每个人的表型可用简单的电泳法加以检验。结合珠蛋白的遗传为常染色体不完全显性遗传,分别由HP1和HP2两个基因控制。因此个体之间可有多种遗传表现型。不同个体间,由遗传获得的特征基因型决定了血浆中HP的性质,这就是所谓基因多形性(polymorph

色谱质谱法检测左旋肉碱的介绍

  方法提要:试样中的左旋肉碱经稀盐酸提取,皂化后使结合态的左旋肉碱游离出来。阳离子交换固相萃取柱净化,供液相色谱-质谱/质谱仪测定。  样品处理  提取:乳粉、液体饮料类(左旋肉碱含量小于等于1000 mg/kg样品):称取1 g(精确到0.01 g)于50 mL容量瓶中,加入50 μL内标液[1

M蛋白的检测与鉴定

 一、M蛋白的基础知识  M蛋白是浆细胞或B淋巴细胞单克隆大量增殖时所产生的一种异常免疫球蛋白,其氨基酸组成及排列顺序十分均一,空间构象、电泳特征也完全相同,本质为免疫球蛋白或其片段(轻链、重链等)。由于它产生于单一克隆,又常出现于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤病人的血或尿中,故称M蛋白。这

Junior进行自动化的高通量小体积粘度测量

  高浓度单克隆抗体(mAb)制剂通常是高度粘性的,使得这些制剂的生产和输送潜在地存在问题。测定生物制剂在其最终浓度下的粘度有助于更全面地表征生物制剂的可开发性。  常规的测定粘度的方法往往需要大量的手工操作和较大的样品量,这限制了在早期制剂开发中进行测试的制剂数量。配备粘度站的Big Kahuna

为什么要进行细胞系鉴定?

首先进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国 ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得来。据估计,15-20%的实验室,实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系,或者与其它细胞系发

菌种保藏中心如何进行细菌鉴定

  传统方法  常规宏观菌落形态学观察,主要观察菌落在其适合的培养基上的生长状况:细菌在固体培养基上的生长形态、大小、颜色是否均匀一致,菌落个体表面及边缘的生长状况;在液体培养基上的浑浊状况、沉淀状况、液面菌膜状况;半固体上穿刺接种后,观察细菌是否沿着接种线生长以及其生长状态是呈毛刷样生长还是均匀生

Solexa高通量测序方法

高通量测序发展的背景基因决定了一个人的相貌、身高甚至疾病,它存在于每个人体细胞的DNA中。而组成DNA的基本物质则是由A、T、G、C表示的4种碱基,一个人的基因组测序就是排列出其DNA上所有碱基的顺序。如果每个人都能拥有一份属于自己的基因组图谱,那么科学家们长期以来期待的“个性化医疗时代”就会可能成

让高通量的蛋白分析成为可能

  抗体药物研发是目前药物研究的热点之一。在疫苗工程,治疗性抗体筛选以及糖基化研究中都会有大量的蛋白样品需要被分析。目前许多实验室仍依赖于SDS- PAGE技术,这一方法耗时耗力不说,且通量有限,而诸如CE和HPLC等方法则无法进行高通量分析,这导致了整个研究进程无法高效运行。   为了推动这

临床化学检查方法介绍Rh血型鉴定介绍

Rh血型鉴定介绍:  Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测,根据病人红细胞是否带有D抗原,分为Rh阳性和Rh阴性。Rh血型鉴定正常值:  Rh血型分为Rh阳性、Rh阴性。Rh血型鉴定临床意义:  (1) 我国汉族人的Rh阴性率为0.34%,绝大多数人为Rh阳性,故由Rh血型不合引起的输血反应相对

主要的仪器分析方法介绍

最主要的仪器分析方法有以下几种:1、光学分析法根据物质的光学性质所建立的分析方法。主要包括:分子光谱法、分光分析法、分子荧光及磷光分析法;原子光谱法,如原子发射光谱法、原子吸收光谱法。2、电化学分析法根据物质的电化学性质所建立的分析方法。主要包括电位分析法、极谱和伏安分析法、电重量和库伦分析法、电导

酶的制备主要方法介绍

酶的制备主要有2种方法,即直接提取法和微生物发酵生产法。早期的酶制剂是以动植物作为原料,从中直接提取的。由于动植物生长周期长,又受地理、气候和季节等因素的影响,因此原料的来源受到了限制,不适于大规模的工业生产。目前生产上应用的酶制剂中,虽然动、植物来源的酶制剂还在发挥着不可忽视的作用,占很少的一部分

蜡状芽孢杆菌的鉴定方法和检测方法介绍

  1、鉴定方法  常规分离鉴定技术中检样处理、增菌及分离培养鉴定按GB/T4789.14一2014的方法进行。  2、检测方法  国内外对于蜡样芽抱杆菌的检测方法有常规的检测方法;基于PCR技术、酶反应、免疫学技术的快速检测方法。  常规检测方法是将分离培养后的可疑菌落做生化试验、溶血试验、协同溶

AB0血型鉴定的鉴定方法

(1)生理盐水凝集法①玻片法操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。玻片法凝集结果判断呈一片或几片凝块,仅有少数单个

亲子鉴定的方法

  鉴定的方法主要有以下几种:  (1)血型鉴定。血型鉴定,就是根据血型的遗传规律对亲生关系的判定。ABO式的血型遗传是受A、B和O三个等位基因控制的。每个人都有其中任何两个基因,这两个基因可以是相同的。在两个染色体配对时,可组合有6种基因,即AA、AO、BB、BO、AB、OO,这6种基因就是决定生

鉴定多糖的方法

1、方法提要食品中相对分子质量>1×104的高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀,与水溶液中单糖和低聚糖分离,用碱性二价铜试剂选择性地从其他高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖,用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量,其显色强度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比,以此计算食品中粗多糖含量。2、主要仪器

显微鉴定的方法

制片 进行显微鉴定,首先根据观察的对象和目的,选择具有代表性的生药,制作不同的显微制片,包括组织制片、表皮制片和粉末制片 。组织制片的方法主要有徒手制片、滑走制片、冰冻制片及石蜡制片等。对植物类中药,如根、根茎、茎藤、皮、叶等类,一般制作横切片观察,必要时制纵切片;果实、种子类须制作横切片及纵切片

质谱法

  质谱法具有如下特点:(1)灵敏度高,通常一次分析仅需几微克的样品。(2)响应时间短,分析速度快。(3)信息量大,能得到大量的结构信息和样品分子的相对分子质量。(4)可测定分子式。  一、质谱法的基本原理  理解并掌握质谱法的基本原理。  二、质谱的表示方法  最强的离子峰为基峰。  三、质谱仪 

双向凝胶电泳的蛋白鉴定和修饰加工的介绍

  蛋白鉴定  一旦通过差异分析或其它方法找到感兴趣的蛋白后.就可以从凝胶中或膜上切取这些目标蛋白质作鉴定。现在绝大多数蛋白质的鉴定是通过质谱分析来完成的。  修饰和加工  蛋白质的翻译后修饰和加工,是指在肽链合成完成后进行的化学反应,如磷酸化、羟基化、糖基化、二硫键形成,以及最近发现的蛋白质自剪接

质子转移反应的质谱法的介绍

  质子转移反应质谱法(英语:Proton-transfer-reaction mass spectrometry,缩写:PTR-MS),是一种使用气相水合氢离子作为离子源试剂的分析化学方法。使用质子转移反应质谱法进行分析的仪器称为质子转移反应质谱仪。  1995年,因斯布鲁克大学粒子物理研究所的科

霍乱弧菌的生化鉴定检测方法介绍

  能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、半乳糖等产酸产气,迟缓发酵乳糖。不分解阿拉伯糖、水杨素、卫矛醇、鼠李糖、木糖、侧金盏花醇和肌醇。氧化酶、明胶液化试验阳性。V-P试验大多数EL-Tor生物型阳性,而古典生物型大多为阴性。霍乱弧菌能分解色氨酸产生吲哚,同时能还原硝酸盐为亚硝酸盐。因此当霍乱弧菌培

关于突变方法鉴定突变功能残基的介绍

  突变方法鉴定突变功能残基:定点突变引起的结构变化可以通过在蛋白质中引进另外一种突变来检测。这种多重突变中单一突变是有加和性的,偏离这个规则说明残基问的相互作用引起构象的变化。随机突变、删除分析以及连接片段扫描突变等实验方法可用于鉴定功能残基。随机突变技术分析蛋白质功能的优势在于通过简单的方法就可

黑素细胞的氨银法鉴定方法介绍

  主要用于鉴定黑色素颗粒和嗜银颗粒。黑色素是一种非脂溶性、非血色素性的色素颗粒,呈黑褐色,存在于头发、皮肤、视网膜、虹膜及中枢神经系统的某些部分。嗜银颗粒分布在类癌组织。染色后嗜银颗粒和黑色素均呈黑色,细胞核呈粉红色,细胞浆呈淡红色。

电子分析天平的鉴定方法简要介绍

电子分析天平是一种常用的称量仪器,具有全自动故障检测、外置砝码、自动校准、全部线性四点校准、超载保护等多种应用程序,被广泛用于多个行业中。今天我们主要来介绍一下电子分析天平的鉴定方法,希望可以帮助用户更好的应用产品。一、电子天平以其操作简单、称量准确可靠等优点,迅速在工业生产、科研、贸易等方面得到广

电子分析天平的鉴定方法简要介绍

电子分析天平是一种常用的称量仪器,具有全自动故障检测、外置砝码、自动校准、全部线性四点校准、超载保护等多种应用程序,被广泛用于多个行业中。今天我们主要来介绍一下电子分析天平的鉴定方法,希望可以帮助用户更好的应用产品。一、电子天平以其操作简单、称量准确可靠等优点,迅速在工业生产、科研、贸易等方面得到广

热电离质谱法相关介绍

  热电离质谱法(Thermal ionization mass spec-trometry,TIMS)是基于经分离纯化的试样在Re、Ta等高熔点的金属带表面上,通过高温加热产生热致电离的一门质谱技术。主要应用于地球化学、宇宙化学及地质年代学等领域的高精度同位素比值的测定,也可应用于原子量测定及高精

简介细菌鉴定仪的主要特点

  ◇快速读取结果  鉴定板由读数仪自动读取吸光值,软件将该吸光值与数据库对比,就可在瞬时给出鉴定结果。试验结果可由系统进行自动分析、记录和打印。  ◇强大的数据库  Biolog微生物鉴定数据库容量是目前世界上最大的,可鉴定包括细菌、酵母和丝状真菌在内总计1973种微生物,几乎涵盖了所有的人类、动

椰子死亡类病毒的主要鉴定特征

早期叶片上产生小的、形状异常的亮黄或桔黄色斑点,并随叶令增长而扩大,愈合成大的条纹状斑块,老叶出现黄化和斑驳。晚期叶子变小、减少,嫩叶易碎,最后只有几片直立的叶子,随之整个树冠死亡。病树花期推迟,花序变短呈圆形,花败落,不结果。在叶片上出现症状1年左右,有的坚果比正常小些,但数量增多,果实呈圆形而不

物理图谱进行基因定位的方法介绍

原核生物 DNA分子上缺乏天然的容易识别的标记,可用限制图谱和部分变性图的测定来弥补这一不足。各种限制性核酸内切酶具有各自的识别顺序。这些识别顺序可以作为DNA部位的标记,用不同的限制酶处理同一DNA分子,通过对酶切产生的DNA片段的大小和位置的分析,可以绘制出某一 DNA分子的限制图谱。此外,每一

Aebersold研究组发布用于全蛋白质组的高通量定量方法

  瑞士苏黎世联邦理工学院的研究人员领导的一个研究小组,已制定了一个质谱工作流,用于对整个蛋白质组进行高通量的绝对定量。  据ETH的研究者、该研究的领头人Ruedi Aebersold说,对于多种形态,该技术实现了目标蛋白质组的重现性定量,提供用于