吉凯基因Dr.L的私家实验笔记——稳定株
1、什么是瞬时表达和稳定表达？ 课前热身，了解的同学请直接进入题2 瞬时表达：外源片段不能随细胞分裂而一同复制，导致表达时间短暂，且表达量随时间逐渐下降。 稳定表达：是指外源片段整合入细胞基因组中，并能随细胞分裂稳定传递下去，表达量长时间处于稳定水平。 那稳定株，顾名思义当然是属于稳定表达的体系了。 2、我的实验是否需要筛选稳定株？ 能够达到稳定表达的方法不止稳定株一种哦。我们使用慢病毒感染细胞，也一样可以达到稳定表达的效果。什么原理呢？ *慢病毒是整合型的逆转录病毒载体，感染细胞后，携带的外源片段会直接整合入细胞的基因组DNA中，并能够随细胞分裂稳定传代。所以对于大多数实验，包括细胞周期、凋亡、增殖等功能学实验，甚至裸鼠成瘤等长时间的实验，只要细胞感染效率较高（70%～80%以上），感染一次慢病毒就可以达到长时间、高效的基因操作的目的，满足实验要求，无须筛选稳定细胞株。 3、......阅读全文
如何快速的理解一篇高分SCI文章
各位读者大家好，感谢各位对Dr.S之前高分SCI文章解析系列软文的喜爱。近期也有不少读者反馈，有没有更简单粗暴的方法可以快速理解一篇高分SCI文章。Dr.S想说你为什么不早说呢？当然有啦。从今天起Dr.S会开一个新系列，专门服务我们高（TOU）效（LAN）的读者朋友们。 想发一篇10分左右
手把手教你如何发一篇Hepatology
广大临床医生朋友们，是否还在熬夜看文献写标书头疼不已？Dr.S的临床医生如何发表高分SCI文章系列又来了，上期咱们说了肺癌（想看点我），今天咱们继续从肝癌说起，来分析一篇Hepatology（11.7分）的文章，该期刊是消化领域的老牌杂志，权威性和影响力相当的高。废话不多说，我们先解读一下题目：Th
岛津GCMSsolution培训笔记（二）
步骤二：单击实时分析助手栏中的调谐图标，单击调谐中的峰监测图标; 步骤三：在峰监测界面里，监视组选择水空气，单击打开灯丝，检查泄漏，检漏结束后关闭灯丝; 步骤四：单击实时分析助手栏中的调谐图标，单击调谐中的自动调谐条件图标，调谐信息窗口弹出，选默认条件并确定，选择
岛津GCMSsolution培训笔记（一）
近期，笔者参加岛津的培训，过程中有很多的收获，同时也发现有的同学在培训结束后对一些操作流程参数设置等常见问题依然不是非常地明确，因此，把这些问题总结一下，在帮助老学员查漏补缺的同时也方便新手分析人员参考。主要从SCAN方法的创建，检漏调谐、数据采集，数据处理创建定量分析方法，校准曲线的制作与样品分析
岛津GCMSsolution培训笔记（三）
创建组分表流程中参数设置的注意事项： 定量方法根据自己的情况选择内标法或者外标法。校准曲线点数：输入用于创建校准曲线的浓度级别个数。浓度的格式：设置用于表示浓度的有效数字的位数。 向导5/7图中：1设置标准样品的浓度。如果不同化合物浓度不同，在完成向导步骤之后直接在参数表中进行修改。2如果选
结直肠癌研究体内外模型综述（一）
引言：上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年，拥有国内最大的慢病毒文库，同时也是国内最大的疾病关键基因科研服务供应商，在疾病研究领域的实验积累已逾14年！在这里，我们为大家特别整理了10多个研究领域的经验所得，将最实用的精华分享给大家！上一期帮大家总结了胃癌研究中体内外模型的选择，以及病毒工具
南高加索女性基因惊人稳定
南高加索地区毗邻欧洲和近东，是数千年来人类迁移的重要枢纽，有考古证据显示，这里的文化曾出现巨大转变。但令人惊讶的是，近日刊登于《当代生物学》期刊的古老线粒体DNA证据揭示，过去8000年来，这里的基因没有发生巨变的痕迹。 线粒体经由母亲遗传给后代，因此线粒体基因组能让科学家追踪该地区女性的独特
高大上的CarT慢病毒是怎样炼成的
要做行业新标准，看看我们有多狠；为了高大上，搭上精力和成本；搞定绝对又定量，推出质量控制高精准；如何做到高精准？看我大QC如何能！子明曰：“慢病毒质量靠啥控制？”大QC，就是对慢病毒设立一些检测的项目，对每一管慢病毒进行全面体检。通过了这些QC检测项目，质量自然就高大上；通不过的，就地销毁！销毁！销
中药研究中需要做细胞实验吗？
要做行业新标准，看看我们有多狠； 为了高大上，搭上精力和成本； 搞定绝对又定量，推出质量控制高精准； 如何做到高精准？看我大QC如何能！ 子明曰：“慢病毒质量靠啥控制？” 子怒曰：大QC！大QC！大QC！ 大QC，就是对慢病毒设立一些检测的项目，对每一管慢病毒
高大上的CarT慢病毒是怎样炼成的（二）
要做行业新标准，看看我们有多狠； 为了高大上，搭上精力和成本； 搞定绝对又定量，推出质量控制高精准； 如何做到高精准？看我大QC如何能！ 子明曰：“慢病毒质量靠啥控制？” 子怒曰：大QC！大QC！大QC！ 大QC，就是对慢病毒设立一些检测的项目，对每一管慢病毒
微生物实验室设计原则与要求课堂笔记（一）
微生物实验室是所有实验室中最特别的，设计建设存在在一定的原则和要求。以食品微生物检测实验室为例，解析微生物实验室的设计原则和要求。 食品微生物实验室就是采用检测手段，确定单位样品中某种或某类微生物的数量或存在状况的实验室。 核心实验室配置 ◆生物安全实验室 常被称之为：致病菌室、阳性
微生物实验室设计原则与要求课堂笔记（二）
应设洗手池 应配备洗眼装置 若操作刺激或腐蚀性物质，应在30m内设洗眼装置，必要时应设紧急喷淋装置。 避免不适用 如果实验室不具备供水条件，则应设非手动手消毒灭菌装置—手消毒装置。 3.取消下水的措施，设集水桶
中美两国精准医疗发展现状对比与展望
自从2015年奥巴马正式宣布“精准医疗”计划以来，关于什么是精准医疗，如何实现精准医疗，如何在中国的临床实际中实现精准医疗引起了业界的广泛讨论。而对于其中的“精准诊断”，业界目前理解比较狭隘，几乎把精准诊断等同于肿瘤测序这一个领域。 诚然，测序技术的积极意义在于逐渐实现了按照组学的逻辑去诊
血液肿瘤常用体内外模型总结工具病毒使用指南
血液肿瘤主要包括各类白血病、多发性骨髓瘤以及恶性淋巴瘤。急性白血病占常见恶性肿瘤的第八位，淋巴瘤也是在前十位，并且发病率逐年升高，多发性骨髓瘤的整个发病率在血液恶性肿瘤里面占10%。 血液肿瘤发病急，在传统的放疗、化疗、骨髓移植等治疗方式下，治疗周期长、费用高昂、过程痛苦，但治愈率却并不很
陈凯先：抓住“从基因到药物”新机遇
“我们是发展中国家，将长期面对发达国家科技和经济优势的压力。要顺利实现我国医药产业由仿制为主到创新为主的历史性转变，不能简单照搬发达国家的做法，必须坚持从国情出发，制定正确的发展战略，走一条符合我国实际的自主创新道路。” 这是中科院院士、上海中医药大学校长陈凯先在主题为“临床生物信息学的现状和
CHO细胞的稳定转染与基因表达
1、pcDNA3.1＋-gD的线性化: pcDNA3.1＋使用说明书推荐了以下几个酶作为线性化酶(BglⅡ MfeⅡ Bst1107Ⅰ Eam1105Ⅰ PvuⅠ ScaⅠ SspⅠ),通过DNAMAN分析gD序列发现其带有MfeⅡ酶切位点。2、转染前一天,在60mm的dish中接种8×105个细胞
miR285pIL34巨噬细胞反馈回路调节肝癌转移
复旦大学（附属中山医院）肝癌研究所周俭教授研究团队在2016年5月正式发表《Hepatology》（肝脏病学）杂志的文章"miR-28-5p-IL-34-Macrophage Feedback Loop Modulates Hepatocellular Carcinoma Metastasis"
没有临床相关性分析？这不是测序，这是耍流氓！
以二代基因测序为代表的高通量研究策略涵盖了临床前研究的方方面面，我们可以在短时间内拿到大量样本的检测结果，研究进程大大加快了。但新技术带来了新问题，高通量检测带来的海量数据怎么分析？ 如何让大数据解决大问题？ 新技术的意义并不是为了发文章灌水，而是创造临床价值，一切没有临床相关性研究
位置传感器总结笔记
电机的高性能控制中，往往需要知道电机转子的位置或者是速度信息，最直接的方法就是通过传感器或是后面说的编码器测量转子的位置或是转速。值得一提的是，速度是位置相对时间的变化率，因此一个位置传感器也可以看作一个速度传感器。当然，使用Sensorless的一系列算法，例如利用电机数学模型，或是电机的非理
hCINAP蛋白调控人类细胞18S－rRNA－剪切及肿瘤细胞生长的分子
核糖体是维持细胞生长和个体生存必不可少的细胞器。核糖体的组装是一个极为复杂且高度有序的生物学过程，其中，核糖体RNA 的修饰及剪切是核糖体合成中的重要事件, 核糖体组装相关因子的突变将导致严重的血液系统遗传性疾病并增大恶性肿瘤的发病几率。人类细胞中rRNA 剪切机制的研究尚未完善。 2
抗药性突变株的分离实验——梯度平板法
实验方法原理生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是作为引发突变的诱导物，因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化，进一步进行
哪些类型的实验最适合使用－RefFinder－软件评估内参基因的稳定性？
以下类型的实验可能比较适合使用 RefFinder 软件评估内参基因的稳定性： 1. 涉及多种样本类型的实验，例如同时研究不同组织、细胞系或疾病状态的样本。 2. 大规模的基因表达研究，需要同时评估多个内参基因在大量样本中的稳定性。 3. 复杂实验设计，包含多种处理条件、时间点或不同实验分组的
哪些类型的实验最适合使用－RefFinder－软件评估内参基因的稳定性？
以下类型的实验可能比较适合使用 RefFinder 软件评估内参基因的稳定性：涉及多种样本类型的实验，例如同时研究不同组织、细胞系或疾病状态的样本。大规模的基因表达研究，需要同时评估多个内参基因在大量样本中的稳定性。复杂实验设计，包含多种处理条件、时间点或不同实验分组的研究。跨实验室或多中心的合作研
血液肿瘤常用体内外模型总结工具病毒使用指南（二）
二、细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？稳定性、重复性较好的动物模型可在肿瘤基础性研究和抗肿瘤药物筛选中发挥重要作用。血液肿瘤常用的动物模型主要有：I皮下移植瘤模型；II血液模型。皮下移植瘤模型较容易建立，易于动态观察肿瘤的生长状态。血液模型则一般以生存天数作为观察终点，用活体成像、病理切片、流式细
挪威减排放“大招”－市中心禁私家车
据新华社电 为降低大气污染，欧洲城市可谓是花样百出。挪威首都奥斯陆近日又放“大招”，为减少市中心汽车尾气排放量，计划2019年前实现市中心“零私家车”。 奥斯陆市政议会19日宣布，为了大幅降低温室气体排放量，应对全球气候变化，将于2019年前，全面禁止私家车进入市中心。 “我们希望看到一