关于细胞转染技术的那些事
转染 ,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。跟着基因与蛋白功用研讨的深化,转染目前已成为实验室工作中常常涉及的基本办法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。 电穿孔法、显微注射和基因枪属于经过物理办法将基因导入细胞的范例;化学介导办法许多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染办法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导办法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种介导的转染技术。抱负细胞转染办法,应该具有转染功率高、细胞du性小等优点。 需求指出的一点,不管采用哪种转染技术,要获得优的转染成果,可能都需求对转染条件进行优化。影响转染功率的因素许多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状况,到转染办法的操作细节,都需求考虑。 &n......阅读全文
关于细胞转染技术的那些事
转染 ,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。跟着基因与蛋白功用研讨的深化,转染目前已成为实验室工作中常常涉及的基本办法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。 电穿孔法、显微注射和基因枪属于经过物理办法将基因导入细胞的范例;化学介导办法许多,如经典的磷酸钙共沉
关于PCR技术那些事
什么是PCR?聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)是一种分子生物学技术,用于体外扩增特定的DNA片段。PCR技术发展简史PCR之父 Kary MullisPCR反应基本原理和反应过程基本原理:反应过程:变性——将被复制的DNA片段在高于其Tm的条件下(94~9
关于怀孕那些事
怀孕是大部分女性人生中的大事。从刚得知怀孕的欣喜,到经历几个月的漫长等待,到最后分娩时的痛苦,都对给妈妈们留下深刻的回忆。对于准备当妈妈的人来说,如何备孕是首先应当考虑的问题;对于孕妇来说,如何保护自己与胎儿的健康是则是另外一项十分重要的问题;分娩的方式以及孩子日后的健康生长则需要更加长久的考虑
关于睡眠的那些事
睡眠是维持身体健康的中要因素,睡眠不足会导致各种精神相关疾病以及其它疾病的发生风险的上升,而睡眠过多也会带来一些负面的健康风险。针对近期与睡眠相关的研究进展,进行了简要盘点,希望读者朋友们能够喜欢。 1. 睡眠不足,你意想不到的危害 DOI: 10.1002/ana.25023 青壮年每天
【技术】基因测序那些事
最早的时候,基因测序只能应用于科研之上,是遗传学及分子生物学一个重要的科研工具。随着测序技术的发展,测序价格大大降低及测序仪的能力越来越高,测序技术应该不仅仅局限于科研市场,越来越多的人想要将测序这种分子生物学技术应用到面向大众的普通消费市场,特别是医疗市场和临床市场,一旦测序技术在这些市场进行
关于新药研发中-宿主细胞蛋白-那些事
宿主细胞是生产诸如重组蛋白、抗体和疫苗类药物的上游材料,不同用途的药物会采用不同的宿主细胞,重组蛋白类药物常用的细胞有中国仓鼠卵巢细胞(CHO),新型疫苗常采用非洲绿猴肾细胞(Vero)、犬肾细胞 (MDCK)、昆虫细胞、人二倍体细胞,传统疫苗还会采用大肠杆菌、鸡胚等作为宿主细胞。宿主细胞蛋白如果残
关于洗板机的那些事
应用广泛:可洗ELISA板、细胞板、蛋白芯片、真空,还可真空抽滤和用于磁珠分离(如Luminx的磁珠)等; 真正的“二合一":无需更换任何部件,即可完成柔和的细胞洗涤和剧烈的ELISA洗涤; 多点吸液:每孔采用多点吸液模式,以保证低的残余量;4)液面探测:根据液面高度随时调节加液位置,保
关于细胞转染的技术介绍
国际上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术,以其适用宿主范围广,操作简便,对细胞毒性小,转染效率高受到研究者们的青睐。其中树枝状聚合物(Dendrimers)和聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的转染性能最佳,但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性,且其合成工艺复杂。聚乙烯亚胺是
流式细胞分选的那些事
将感兴趣的目的细胞分离纯化出来,一直是细胞生物学中的一个重要研究手段。无论是体外刺激研究细胞因子的表达谱,还是细胞共培养检测细胞功能,均对细胞的纯度具有很高的要求。目前分离纯化细胞的手段主要有两种:MACS(magnetic-activated cell sorting),原理就是用结合了磁
关于过敏反应的那些事
本期为大家带来的是过敏反应相关的研究与临床治疗的最新进展,希望读者朋友们能够喜欢。 1. Lancet:抗过敏药物能够缓解多发性硬化患者的认知损伤 最近,来自UCSF的研究者们成功地在II期临床实验中证明FDA批准的抗组胺药物能够恢复多发性硬化患者大脑的神经系统功能。此前实验室水平的研究发现
关于塑料硬度测试的那些事
塑料制品硬度是指其表面抵抗机械压力的能力。这个能力大小与被测塑料的拉伸强度和弹性模量有关。常用检测方法,按检测压头的形状不同,可分为邵氏硬度、布氏硬度和洛氏硬度。 (1)邵氏硬度检测试验方法 邵氏硬度检测试验采用邵氏硬度计,此仪器采用标准弹簧压力,压头为圆锥形,压头平面为Φ0. 8mm。
关于“肺癌筛查”的那些事
导读:肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位,女性发病率占第二位,死亡率占第二位。长期大量吸烟与肺癌的发生有非常密切的关系,吸烟不仅直接影响本人的身体健康,还对周围人群的健康产生不良影响,导致被动吸烟者肺癌患病率明显增加。
血尿那些事
血尿,顾名思义就是尿中带血。尿液离心取沉渣做显微镜检查,如果沉渣中红细胞数≥3 个/HP(高倍视野)就是血尿。1、血尿分镜下血尿和肉眼血尿。轻度的血尿,尿中红细胞虽然增多,但肉眼观察正常,仅在显微镜下才能看到,称镜下血尿;严重的血尿,尿中大量红细胞,尿的颜色变成洗肉水样或者酱油色,甚至鲜红色并有血凝
浅谈原代细胞培养那些事(二)
四、原代细胞培养流程(例:乳鼠肺组织)1.取材:将1-3天新生乳鼠尾巴提起,整个身体浸入装有75%酒精的烧杯中3秒左右(默数5下),取出放置到灭菌的培养皿中,移入工作台内。小鼠仰位固定在泡沫塑料板上,大头针分别固定头、尾和四肢。用碘酒、75%酒精消毒胸廓部位皮肤。在胸廓正中线中位处,用两把眼科弯镊夹
浅谈原代细胞培养的那些事(一)
一、何谓原代培养?原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,即组织直接从机体获取后,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在*传代前的培养可认为是原代培养。原代培养的过程指动物的组织或器官从机体取出后,经机械法或各种酶类(常用胰蛋白酶)和螯合剂(常用
骨髓穿刺的那些事
很多病人一听要做骨髓穿刺,就吓得不得了,紧张得寝食不安,下面给大家简单介绍一下骨髓穿刺的一些事情。 骨髓穿刺是血液科、甚至是内科最常用的操作之一,以下情况需要进行骨髓检查: 1.怀疑白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、浆细胞病、骨髓增生异常综合征等,不明原因的白细胞增多或减少,不明原因的贫血或红细胞增
精液检查的那些事
精液外观1.正常 精液一般为微混浊的灰白色,自行液化后为半透明的乳白色。2.异常 (1)红色:前列腺和精囊腺炎症、结核、肿瘤或结石等。 (2)黄色:前列腺炎、精囊炎等。精液量 正常 一次排精量为2~6ml,平均3.5mL。 异常 精液量少于1ml或大于8ml,为异常,不利于生育。精液液
降钙素原的那些事
降钙素原(PCT)是一种由116个氨基酸组成的蛋白质,是降钙素的肽前体,是由甲状旁腺C细胞合成并参与钙稳态的激素。降钙素原来自内肽酶切割的前降钙素原。 PCT也可以由肺和肠的神经内分泌细胞产生,并作为急性期反应物释放,以响应炎性刺激,特别是来自于细菌的炎症刺激。炎症期间PCT水平升高与细菌内毒素和炎
凝血途径的那些事
内源凝血途径:是指由FⅫ被激活到FⅨa-Ⅷa-Ca2+-PF3复合物形成的过程。外源凝血途径:是指从TF释放到TF-FⅦa-Ca2+复合物形成的过程。共同凝血途径:是指由FⅩ的激活到纤维蛋白形成的过程,它是内外源系统的共同凝血阶段。听不懂?搞不明白?不要紧,下面这个凝血途径表达方式是不是就简单多啦!
关于贫血时判读血沉结果的那些事
血沉,全称是红细胞沉降率(ESR),指在一定条件下,把抗凝血放在特定血沉管中,红细胞在规定时间内在血浆中自然下降的距离,以魏氏法作为测定的标准方法,作为急性时相反应的检测指标,对某些疾病的协助诊断和疗效观察具有重要的辅助价值,尽管对诊断疾病缺乏特异性,但在临床上还是应用较多的常规性检验项目。
细胞瞬时转染技术
原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。应用:观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。一般流程:1)细胞接种:转染实
浅谈IND申请的那些事
新药研发,是一个涵盖多学科共同努力、富集多部门共同协作,而“梦想”完成的系统工程。但由于研发过程的高风险特征,故纵使每个环节都倾注其所有,最终亦未必能开花结果。在这里,如果将立项比作“撒种子”,那IND过程则犹如“开花”,NDA过程就类似于“结果”。项目在立项之初,撒下千万颗种子,最终能长出果实的,
移液枪的那些事
一、移液枪使用诀窍 移液枪是实验操作上不可缺少的工具,对于顶尖高手而言,重要的就是实验的误差最小,重复再现性好,那就要注意正确移液枪使用。 1. 影响移液枪精度因素 (1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差 (2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之
沙门菌分类的那些事
一、沙门菌(Salmonella)问:Salmonella有多少个种?上百个?上千个?Salmonella:我又不是蜂王,又不是蚁后,哪有那么多种,人家目前就2个啦!沙门菌(Salmonella)是人体肠道的一种常病原菌,隶属于肠杆菌科。最初的沙门菌分类,是kauffmann的血清学分类法,其根据沙
关于标准溶液那些必须知道的事
标准溶液是分析的重要依据,因此在配置及标定过程中的一些要求规范你可一定要知道呦~ 标准溶液的取得有两种方法,一种是用基准物质直接配制,一种是用基准物质或已知准确浓度的标准溶液进行标定来取得。 用于配制或标定标准溶液浓度的最高纯度化学试剂称为基准试剂或基准物质,用基准试剂或基准物质
说说“纯水储存”那些事
纯水储存是实验室纯水系统的一个重要环节,不仅需要满足实验室的纯水用水需要,还需为超纯水系统提供符合要求的进水。水质的变化会影响使用,并且会缩短超纯水器的寿命!所以选择合适的纯水储存箱很重要!所以,这一讲就让我们来告诉大家如何来正确地存储纯水吧!储存在水箱里的纯水相对“静止”,容易受到污染,水质下降
说说紧急避孕那些事
一说到紧急避孕,大多数人首先想到的不是避孕成功了,可以避免一次意外妊娠带来的人工流产或者药物流产以及因此带来的对身体以及钱包的损害,而是思前想后、上下五千年的去想紧急避孕药的副作用影响、会不会导致月经不调、不孕不育,万一怀上了孩子能不能要等等。再在网上搜一下,各种不知道谁说的说法又能吓死个人
野生动物保护:那些技术做不到的事
“二稿存在严重倒退!”《中华人民共和国野生动物保护法(修订草案第二次审议稿)》公开征求意见期已经结束。5月23日,环保组织“自然之友”通过微信刊文,指出“二次审议稿”并未回应公众诉求,甚至相较之前出台的修订草案,也开了倒车。 二次审议稿在总则部分,删除了之前被认为是该法一大亮点的“保护野
关于标准溶液——那些你必须知道的事
标准溶液的取得有两种方法,一种是用基准物质直接配制,一种是用基准物质或已知准确浓度的标准溶液进行标定来取得。 用于配制或标定标准溶液浓度的最高纯度化学试剂称为基准试剂或基准物质,用基准试剂或基准物质配制成已知准确浓度的溶液称为标准溶液。 标准溶液的浓度准确与否直接关系检测结果的精密度、准确度。因
关于氮气发生器内置空压机的那些事
任何仪器的每个组成部件都十分重要,缺少任何一部分都会影响整体的工作,任何一部分的损坏也会使仪器整体无法工作,氮气发生器也是如此。因此我们不仅要对设备整体有了解,好要对其各个零部件有一定的了解。下面我们就来仔细说说其内置空压机。 氮气发生器内置空压机的组成结构: 1、水路循环系统 冷