细胞培养实验的污染预防至关重要
不少细胞培养实验者因为污染而烦恼,想要防止过程中发污染情况,首先就要做好预防,只有预防工作做好了才能将发生污染的可能性降到*小程度。那么要怎样做好污染预防工作呢?上海劲马在这里为您整理推荐出了几个方法方面作为参考。从物品、用品消毒灭菌着手所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。从操作者做起1. 操作者责任心要强,要细心稳重,操作技术要熟练。进无菌室前要用肥皂洗手或用5%新洁尔灭浸泡5分钟,按规定穿隔离衣。进入后关好门,坐下来尽量少走动。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。事先要严格检查器材、溶液和培养物,不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内,更不能随便使用,以免造成大批污染。2. 操作者动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话,若打喷嚏或咳嗽应转向背面。3. 操作时要常更换吸管,切勿一根吸......阅读全文
细胞培养实验的污染预防至关重要
不少细胞培养实验者因为污染而烦恼,想要防止过程中发污染情况,首先就要做好预防,只有预防工作做好了才能将发生污染的可能性降到*小程度。那么要怎样做好污染预防工作呢?上海劲马在这里为您整理推荐出了几个方法方面作为参考。从物品、用品消毒灭菌着手所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验
细胞培养污染的预防
体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。 一般预防可从以下几方面着手:1、添加抗生素各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用
如何预防细胞培养的污染问题
1、从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫
如何预防细胞培养的污染问题?
体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:1、从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确
预防支原体污染的细胞培养方法
检查培养基是否污染由于支原体污染的主要来源之一是从实验室外带进来的细胞,建议使用可靠的细胞库提供的细胞。 如果存在应当隔离的支原体污染的细胞,而没有单独的细胞培养箱的情况下,在隔离期内,应使用有盖的塑料细胞培养瓶。不要使用培养板和未密封的培养皿。对怀疑有污染的培养的细胞,应在每天所有其他细胞培养工作
细胞培养中污染的清除和预防
一、污染的清除培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。(一)使用抗生素抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再
细胞培养中污染的清除和预防
一、污染的清除 培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。 (一)使用抗生素 抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。
细胞培养污染拯救及预防方法
概论§ 污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§ 一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型§ 细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质
细胞培养污染拯救及预防方法
(一)污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。1、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。-常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、
细胞培养中预防污染的方法
春暖花开,万物复苏,当我们沉浸在这美好的春意之中,怡然自得时,实验室的细胞培养小能手或许得注意了,那些危害细胞的细菌、真菌、支原体也活跃起来了。在细胞培养的过程中,我们该如何去预防控制呢?小编总结了一些,希望对实验室的伙伴们有帮助!预防为主是细胞培养过程中必要的思路!三月四月不预防,五月六月徒伤悲!
细胞培养污染拯救及预防方法1
概论污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和
细胞培养污染拯救及预防方法2
2、支原体污染的检测(1)相差显微镜观察直接取少许培养液滴在载物片上,再盖上盖片观察,支原体在镜下呈暗色微小颗粒,多位于细胞与细胞之间,有时可见类似于布朗运动的表现。应注意与细胞破碎溢出的内容物如线粒体等相区别。(2)荧光染色法观察用荧光染料Hoechst33258,此染料能与DNA特异地结合,可使
PCR实验如实预防实验污染
进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,zui大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。1.划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本
PCR实验如实预防实验污染
进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本处理区,
细胞培养中污染的清除与预防措施
一、污染的清除 培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。 1、使用抗生素 抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药
细胞培养污染的途径、危害及预防措施(二)
3 生物性污染的来源、危害及预防 外界的微生物如昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物(通常指支原体)和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染。只要在一个开放的环境中进行培养,都难以避免发生污染。发生污染的可能性取决于操作方法、培养室的无菌环境以及实验室的规章制度。生物性污染对细
细胞培养污染的途径、危害及预防措施(一)
污染是细胞培养技术中面临的主要问题。某些污染的发生往往难以察觉检测,而且污染源能长期共存于培养体系中,这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为个生物体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞生物学特性的改变,而实验结果造成潜在的威胁,而且随着污染时间的长而增加。培养环境中的物
PCR实验中的污染预防及处理
一.污染的预防 进行PCR 操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR 污染或杜绝污染的出现。 (一)划分操作区:目前,普通PCR 尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,P
细胞培养实验室对支原体的预防
细胞培养实验室发生支原体污染的风险较高。支原体天然存在于周围空气(气溶胶形式)、人的体表(携带和隐藏)以及未彻底消毒的器物表面,而细胞培养基中由于含有血清,营养丰富,很容易导致支原体的快速繁殖。支原体的污染肉眼不易察觉,直到严重的阶段才会出现培养基变色、细胞异常等情况。支原体可造成细胞代谢改变,基因
细胞实验中如何预防真菌污染?
愤怒的污染君随即列出了一系列罪证:1你若随便穿戴,我便生死相依你进细胞房时不换鞋,不戴口罩,不戴手套,虽然感觉呼吸畅快全身轻松,但其实是进细胞房的最大忌讳!有更严格的细胞房连帽子都要戴上。这么随便的就把我带进去见你的细胞,难怪她会被你气死,换鞋就不说了,你应该也知道有真菌吧。但你根本不能保证你口腔支
细胞培养污染的来源途径、危害及检测预防措施2
2.2.1 水水是唯一一种在凝固时膨胀的化合物。因此在选择冻存细胞的容器时应考虑到这个因素。容器因水的膨胀而发生破裂是引起试剂污染的重要原因。为了避免金属离子、有机分子、细胞内毒素等物质对水的污染,在配制液体,清洗容器时必须使用不含杂质的超纯水。需要注意的是,超纯水放置过久其纯度会下降。在高压蒸气灭
细胞培养污染的来源途径、危害及检测预防措施1
污染是细胞培养技术中面临的主要问题。某些污染的发生往往难以察觉检测,而且污染源能长期共存于培养体系中,这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为个生物体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞生物学特性的改变,而实验结果造成潜在的威胁,而且随着污染时间的长而增加。培养环境中的物
细胞培养污染的来源途径、危害及检测预防措施3
2.3.3 预防及控制污染发生后首先应确定污染物的种类及污染的程度。为了能正确检测细菌或支原体的污染,应先撤去培养液中的抗生素。常规细胞传代培养中应用抗生素会导致:①掩盖了不很严重的污染;②导致了耐药菌的产生。每一种抗生素的抗菌谱都是有限的,而且许多抗生素仅是抑制细菌生长,而非杀菌剂。因为支原体无细
PCR实验中的污染预防及处理(三)
1. 原理:在PCR 产物或引物中用dU 代替dT。这种dU 化的PCR 产物与UNG 一起孵育,因UDG 可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键,可除去dU 而阻止TaqDNA 聚合酶的延伸,从而失去被再扩增的能力。UNG 对不含dU 的模板无任何影响。UNG 可从单或双
PCR实验中的污染预防及处理(一)
一.污染的预防 进行PCR 操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR 污染或杜绝污染的出现。 (一)划分操作区:目前,普通PCR 尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行
PCR实验中的污染预防及处理(二)
(二)环境污染:在排除试剂污染的可能性外,更换试剂后,若不久又发现试剂被污染了,如果预防措施比较严密,则考虑可能为环境污染。 环境污染中常见的污染源主要有: 1. 模板提取时真空抽干装置; 2. 凝胶电泳加样器; 3. 电泳装置;
微自噬机制对预防衰老至关重要
据最新发表在《EMBO报告》上的一项研究报道,日本大阪大学和奈良县立医科大学的研究人员首次证明,受损的溶酶体可通过微自噬机制修复,并确定了这一过程的两个关键调控因素,这对于预防衰老至关重要。 为确定新的溶酶体损伤反应调节因子,研究人员聚焦于一种名为Hippo途径的信号通路,该通路控制着细胞生长
微自噬机制对预防衰老至关重要
溶酶体通过ESCRT驱动的微自噬进行修复,STK38和GABARAP通过将ESCRT募集至溶酶体而成为此过程的关键调节者。这些调节因子对于维持溶酶体完整性和防止衰老至关重要。图片来源:大阪大学 据最新发表在《EMBO报告》上的一项研究报道,日本大阪大学和奈良县立医科大学的研究人员首次证明,受损
如何消除细胞培养实验室中的污染
污染对所有细胞培养实验室都是一个持续风险。尽管预防是减少污染烦扰的关键,但在污染状况发生时,快速彻底且系统地行动在限制污染所造成的后果上是有帮助的。1. 清除为了防止污染在实验室内扩散或是再次发生,发现污染后最紧急的做法是进行彻底清除。除了处理感染的培养器皿,清理感染的培养箱和生物安全柜也非常重要。
细胞培养污染交叉污染的原因?
交叉污染共用试剂、耗材,同时操作不同的样本,都极易造成交叉污染。交叉污染之王应该属于HeLa细胞了,世界上已有很多细胞都受其污染,致使许多实验宣告无效。