细胞培养实验的污染预防至关重要
不少细胞培养实验者因为污染而烦恼,想要防止过程中发污染情况,首先就要做好预防,只有预防工作做好了才能将发生污染的可能性降到*小程度。那么要怎样做好污染预防工作呢?上海劲马在这里为您整理推荐出了几个方法方面作为参考。从物品、用品消毒灭菌着手所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。从操作者做起1. 操作者责任心要强,要细心稳重,操作技术要熟练。进无菌室前要用肥皂洗手或用5%新洁尔灭浸泡5分钟,按规定穿隔离衣。进入后关好门,坐下来尽量少走动。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。事先要严格检查器材、溶液和培养物,不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内,更不能随便使用,以免造成大批污染。2. 操作者动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话,若打喷嚏或咳嗽应转向背面。3. 操作时要常更换吸管,切勿一根吸......阅读全文
细胞培养的真菌污染?
真菌污染真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种,尤其在梅雨季节进行细胞培养更易污染。
PCR实验室如何预防污染
1、合理的实验室分区2、实验操作流程:(1)样品制备区进行样品处理,核酸提取;(2)配液区配置反应体系:酶混合液和PCR反应液混合,分装至PCR反应管;(3)样品制备区加样:样品核酸和阴阳性对照加至反应液中;(4)PCR扩增区上机扩增检测。务必保持单向操作流程,避免各区实验室污染。3、各个实验区内试
细胞培养的污染及控制
污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。一、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以
细胞培养污染之支原体污染检测
细胞培养 中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等,说起支原体污染,估计细胞培养的同学就开始犯愁了,细胞培养的老手都知道,支原体污染非常不易察觉,怎么才能检测支原体污染呢?1、细菌 、真菌污染的检测(1)肉眼观察 细菌 、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生,而且增生迅速,
如何预防细胞污染
1.实验进行前,超净台用紫外灯照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风机运转5-10min再开始实验操作。2.实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于空气的流通;实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。3.每次操作只处理一种细胞;即使不同
如何预防PCR污染?
进行 PCR 反应时,遵照下列规则有助于防止 PCR 的污染。(1)PCR 的前处理和后处理在不同的房间或不同的隔离工作台上进行。即整个 PCR 操作要在不同的隔离区(标本处理区,PCR 扩增区,产物分析区)进行,特别是阳性对照需在另一个隔离环境中贮存、加入。(2)试剂要分装,每次取完试剂后盖紧
细胞培养污染原因探究
实验设备细胞培养用的超净台、细胞培养箱,最好买比较好的品牌。但是别以为买了大公司的仪器就可以高枕无忧,设备最好要定期检修的,比如超净台的过滤膜要定期更换,有时培养箱上的显示器明明显示二氧化碳浓度为5%,其实际情况却可能已经<5%了。仔细观察细胞培养液的颜色,如果培养液偏紫红,那可能是培养箱中二氧化碳
细胞培养污染如何防止
细胞培养防止污染的操作方法:1、准备工作:准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。2、取材:在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,
关于PCR实验室的污染的预防与控制的介绍
PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐
肠道菌群对预防1型糖尿病至关重要
一个国际科研小组发现,肠道菌群对预防实验鼠患上1型糖尿病至关重要。如果缺乏正常菌群,抑制该疾病的基因就无法正常发挥作用。 人体免疫系统必须准确甄别入侵者和自身细胞,既不能漏过“敌人”,也不能冤枉“自己人”。1型糖尿病是一种常见的自体免疫疾病,患者免疫系统会错误地攻击自身的胰岛细胞,使其无法正常
细胞培养中支原体污染对细胞培养的危害
1. 支原体污染的普遍性支原体污染是细胞培养领域遇到的性问题,据文献报道,综合美国食品药品监督管理局(FDA)、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。该数据未统计中国大陆的数据,但可以确定,大陆地区的支原体污染比例与此相当,或更严
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每
细胞培养中如何预防老化?
防止细胞老化最主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代最完好;换培养液应该根据自己细胞消耗培养基的情况来确定是否该换。如果感觉时间不好把握的话就多培养几瓶细胞,在不同的时间换液,最后再来比较下,看什么时候换液好,得出自己的
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
细胞培养时真菌污染的种类?
污染培养细胞的多为烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。
细胞培养中的常见污染类型
凡是混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都可视为污染。细胞污染可分为三大类:微生物污染、细胞间交互污染和化学污染。微生物污染:包括真菌、细菌、支原体和病毒污染。细胞间交互污染:指的是非同种的其他细胞污染化学污染:指影响细胞生存的非细胞所需的化学成分。一、微生物污染细菌和真菌污染
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起
细胞培养中如何减少污染
污染是细胞培养技术中面临的主要问题。某些污染的发生往往难以察觉检测,而且污染源能长期共存于培养体系中,这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为个生物体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞生物学特性的改变,而实验结果造成潜在的威胁,而且随着污染时间的长而增加。培养环境中的物
细胞培养支原体污染来源
支原体(Mycoplasma)是一种大小介于细菌和病毒之间(0.1 - 0.6μm),没有细胞壁、并独立生活原核生物,形态呈高度多形性,呈圆形、丝状或梨形。由于支原体直径较小,进行除菌过滤是,约1%的支原体可以直接穿过常规的0.22μm的微孔除菌滤膜,造成细胞的支原体污染。支原体污染的来源包括:(1
如何预防霉菌污染?
那么有什么预防霉菌污染的措施呢? 控制食品中的水分和食品储存环境中的温度、湿度是防霉的主要措施。食物的水分要控制在安全水分以下,如玉米在12.5%以下、花生仁在8.0%以下时,霉菌不易繁殖。 另外食品储藏的场所要具有良好的通风条件,且要防水和防雨。食品储存要注意推陈出新,合理储量,储存的
如何预防细菌污染血液?
在现代设备条件下,基本上可以做到血液不受细菌污染,但实际上,由于各种原因,细菌污染仍然或多或少发生,在个别地方,污染率可以更高。己污染并大量生长细菌的全血、血液成分或血浆蛋白成分,输给受血者后将引起致命性败血症。因此,要针对原因,采取相应的预防细菌污染措施,特别要注意消毒、采用密闭法和严格的无菌操作
实验室被噬菌体污染怎么办?怎么预防?
噬菌体是一类侵害细菌的病毒,又称为细菌病毒(bacterialvirus)。英文名称为bacteriaophage,简称phage,来源于希腊文“phagos”,意为“吞噬”。1.噬菌体特征噬菌体具有一般病毒所有的特征:为非细胞生物,其结构主要由蛋白质和核酸(DNA或RNA)组成;它们只能在活细胞内
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
支原体污染细胞培养的检测方法
由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种。1、观察细胞的形态和生长特征支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2、分离培养法大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不
细胞培养过程常见的污染源
细胞培养过程中如果操作不当或者条件控制不合适见容易受到化学或者生物因素的污染,常见的污染源有:1.细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较
细胞培养过程常见的污染源
细胞培养过程中如果操作不当或者条件控制不合适见容易受到化学或者生物因素的污染,常见的污染源有:1.细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较
细胞培养中支原体污染的检测
细胞培养中最令人头疼的问题之一是微生物的污染,而支原体的污染更给人一种看不见摸不着的感觉。长期以来,这个问题一直令细胞培养工作者困惑。在人们日常生活的工作环境中,支原体可以说无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。国内外研究表明造成细胞培
结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验
实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW