蛋白蛋白相互作用技术内容
技术内容 蛋白质并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三维空间结构并与其他蛋白质相互作用，共同执行功能。因此，蛋白质的模块及空间组织与其表达水平具有同样的重要性。为了解析蛋白质组的组织结构单元而开发的基于质谱的蛋白质组学方法通常结合了质谱检测与各种生化试验。其中最经典的技术为1999[1]首次报导的亲和纯化－质谱技术（affinity purification – mass spectrametry，AP-MS）。既可进行大规模的protein interactome 构建[2]，也能针对特定条件下特定蛋白质的互作进行差异分析、时间动态分析等[3]。 图１：AP-MS技术的两种运用。 技术原理 使用亲和标签 (AP-MS) 或特异性抗体 (CoIP-MS)，在native条件下纯化与目标蛋白质相互作用的蛋白，进而使用质谱进行鉴定，通过test\control比对，过滤非特异结合蛋白，定性定量分析与特......阅读全文
蛋白蛋白相互作用技术内容
技术内容 蛋白质并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三维空间结构并与其他蛋白质相互作用，共同执行功能。因此，蛋白质的模块及空间组织与其表达水平具有同样的重要性。为了解析蛋白质组的组织结构单元而开发的基于质谱的蛋白质组学方法通常结合了质谱检测与各种生化试验。其中最经典的技术为1999[1]
蛋白蛋白相互作用技术介绍
技术内容蛋白质并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三维空间结构并与其他蛋白质相互作用，共同执行功能。因此，蛋白质的模块及空间组织与其表达水平具有同样的重要性。为了解析蛋白质组的组织结构单元而开发的基于质谱的蛋白质组学方法通常结合了质谱检测与各种生化试验。其中最经典的技术为1999[1]首次报导的亲和
相互作用蛋白鉴定实验——相互作用蛋白捕获
实验方法原理实验要经过两次连续大量的酵母菌平板筛选过程。酵母菌含有 LexA 融合探针、报道基因和插入PJG4-5（见图19.1.6）的 GAL 启动子控制下的 cDNA 表达文库。最近，已有可供用于这个系统的文库。实验材料携带适当质粒组合的酵母菌试剂、试剂盒完全（CM）缺失成分液体培养基含有如下指
邻位连接技术PLA在蛋白蛋白相互作用，蛋白磷酸化修饰..
邻位连接技术PLA在蛋白-蛋白相互作用，蛋白磷酸化修饰的应用摘要 邻位连接技术（ｐｒｏｘｉｍｉｔｙｌｉｇａｔｉｏｎａｓｓａｙ，ＰＬＡ），是新研发的一项高灵敏度的蛋白质体外分析技术。该方法利用一对邻位探针（ｐｒｏｘｉｍｉｔｙｐｒｏｂｅｓ）对靶分子进行双识别，通过连接反应产生可扩增的检测信号，以实时ＰＣ
表面等离子共振技术在蛋白蛋白相互作用的应用（一）
应用领域结合特异性、抗体选择、抗体质控、疾病机制、药物发明、生物治疗、生物处理、生物标记物、配体垂钓、基因调控、细胞信号传导、亲和层析、结构-功能关系、小分子间相互作用等检测原理表面等离子共振（SPR）是一种光学现象，可被用来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用。这种方法对生物分子无任何损伤，且
表面等离子共振技术在蛋白蛋白相互作用的应用（二）
控制软件SensiQ的控制软件在原始反应曲线生成时，同时并实时获取和展示两个通道内的数据。参照通道内的数据被减除，以补偿热漂移、非特异性结合、总折射指数移相等效应，从而得到清晰高质的实验数据。控制软件在反应曲线上简单加入报告点，用来确定样品注入后产生的结合反应。报告点的添加可在实验中的任何时候由人工
研究蛋白质相互作用的新技术
近期，来自多伦多大学Lunenfeld-Tanenbaum Research Institute (LTRI)和Donnelly中心的一组研究人员，开发出一种新技术，可以将细胞内的DNA条形码拼接在一起，以同时搜寻数百万个蛋白质配对，用以分析蛋白质相互作用。相关研究结果发表在4月22日的《Mol
概述C反应蛋白的内容
C-反应蛋白一般指C反应蛋白（CRP）、C-反应蛋白检验（CRP）。 在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质(1941年发现)，命名为C-反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)。最早采用半定量的沉淀试验，制备优质的抗血清，可以建立高灵敏度、高特异性、重
Nat－Met：新技术可揭示蛋白间相互作用
加拿大多伦多大学研究人员开发出一种研究人体蛋白质的新技术。该技术可追踪膜蛋白与其他蛋白之间的相互作用 据报道，加拿大多伦多大学研究人员开发出一种研究人体蛋白质的新技术。该技术可追踪膜蛋白与其他蛋白之间的相互作用。 膜蛋白占人体所有蛋白的约三分之一，有500多种疾病与其失能相关
相互作用蛋白鉴定实验
鉴定诱饵蛋白（半乳糖苷酶） 鉴定诱饵蛋白（LacZ 的活性分析） 相互作用蛋白捕获 实验方法原理 捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达
相互作用蛋白鉴定实验
实验方法原理 捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达 LexA 与目的蛋白的融合体的质粒。这种质粒转化到包含 LEU2 和lacZ 报道基因的报道酵母株中，并要行一系列的对照实验来鉴定所构建的诱饵蛋白是否适用，是否需要修饰，或是否应改变酵母菌报道条件。这些对照实验实现了诱饵蛋白在酵母菌中作为
蛋白质相互作用
Interaction Trap/Trap Two-Hybrid System· Yeast Two-Hybrid System (Finley Lab)This is one of the most comprehensive and detailed guide to yeast
蛋白与蛋白相互作用分析—免疫共沉淀
实验原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合抗体Fc段的现象而开发出来的方法，是研究蛋白质相互作用的经典方法，主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内是否存在生理性相互作用。其原理是：当
用－GST－融合蛋白检测蛋白质蛋白质相互作用实验
实验材料 结合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白 试剂、试剂盒 碱性缓冲液 封闭缓冲液 相
用－GST－融合蛋白检测蛋白质蛋白质相互作用实验
实验材料 结合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白试剂、试剂盒 碱性缓冲液 封闭缓冲液 相互作用缓冲液PK 缓冲液还原型谷胱甘肽于 Tris-Cl中洗涤缓冲液 1 洗涤缓冲液 2蛋白酶蛋白激酶 A[y-32P]ATP仪器、耗材 与待筛选蛋白结合的膜或滤膜Sephadex G-50 转柱实验步骤 材
用－GST－融合蛋白检测蛋白质蛋白质相互作用实验
GST 融合蛋白作为在细菌中表达的重组蛋白，从它们被介绍以来，已用于成千上万个研究项目中（Smith and johnson 1988)。它们常常被用于制备抗体，这些抗体可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用以及分析生化反应。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W
血影蛋白的基本内容介绍
血影蛋白(spectrin)又称红膜肽，存在于哺乳类动物红细胞膜的内侧，是红细胞膜蛋白的主要成份。改变处理血影的离子强度后进行电泳分析，则血影蛋白和肌动蛋白条带消失，说明这两种蛋白不是内在膜蛋白。约占膜提取蛋白的30%。 血影蛋白属红细胞的膜下蛋白，这种蛋白是一种长的、可伸缩的纤维状蛋白,长约
微管蛋白的基本内容介绍
tubulin组成微管的蛋白质称为微管蛋白。微管蛋白是球形分子，有两种类型：α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin)。这两种亚基有35～40%的氨基酸序列同源，表明编码它们的基因可能是由同一原始祖先演变而来。另外，这两种微管蛋白与细菌中一种叫作FtsZ的GTPase(分
蛋白质组的研究内容
主要有两方面，一是结构蛋白质组学，二是功能蛋白质组学。其研究前沿大致分为三个方面：① 针对有关基因组或转录组数据库的生物体或组织细胞，建立其蛋白质组或亚蛋白质组及其蛋白质组连锁群，即组成性蛋白质组学。② 以重要生命过程或人类重大疾病为对象，进行重要生理病理体系或过程的局部蛋白质组或比较蛋白质组学。③
关于组蛋白的内容简介
组蛋白（histone）是指所有真核生物的细胞核中，与DNA结合存在的碱性蛋白质的总称。其分子量约10000～20000Kda。 真核生物体细胞染色质中的碱性蛋白质，含精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸特别多，二者加起来约为所有氨基酸残基的1/4。组蛋白与带负电荷的双螺旋DNA结合成DNA-组蛋白复合
蛋白质组的研究内容
主要有两方面，一是结构蛋白质组学，二是功能蛋白质组学。其研究前沿大致分为三个方面：① 针对有关基因组或转录组数据库的生物体或组织细胞，建立其蛋白质组或亚蛋白质组及其蛋白质组连锁群，即组成性蛋白质组学。② 以重要生命过程或人类重大疾病为对象，进行重要生理病理体系或过程的局部蛋白质组或比较蛋白质组学。③
γ微管蛋白的相关内容
γ-微管蛋白，微管蛋白家族的另一成员，在微管的成核和极性取向中是重要的。它主要存在于中心体和纺锤极体中，因为它们是最丰富的微管成核区域。在这些细胞器中，在称为γ-微管蛋白环复合物（γ-TuRCs）的复合物中发现了几种γ-微管蛋白和其他蛋白质分子，其在化学上模拟微管的（+）末端，从而允许微管结合。
关于酪蛋白胶粒的内容介绍
牛乳中蛋白质含量为3.0%-3.7%，其中约80%为酪蛋白（casein），20%为乳清蛋白。酪蛋白胶束是几种含磷蛋白质交联形成的复合体，酪蛋白含有4种蛋白组分：αs1-酪蛋白（αs1-casein）、αs2-酪蛋白（αs2-casein）、β-酪蛋白（β-casein）、κ-酪蛋白（κ-cas
关于人血白蛋白的内容介绍
成份：本品主要成份为人血白蛋白，辅料为辛酸钠、氯化钠、灭菌注射用水。 性状：本品为略粘稠、黄色或绿色至棕色澄明液体，不应出现浑浊。 适应症： 1.失血创伤、烧伤引起的休克。 2.脑水肿及损伤引起的颅压升高。 3.肝硬化及肾病引起的水肿或腹水。 4.低蛋白血症的防治。 5.新生儿高胆
简述本周氏蛋白的物质内容
尿中出现此蛋白反映恶性浆细胞产生大量克隆性免疫球蛋白的轻链部分。 尿本周氏蛋白（BJP）正常值 定性：阴性。新生儿可弱阳性。 尿本周氏蛋白（BJP）临床意义 阳性：多发性骨髓瘤病人产生大量本周蛋白，阳性率可达35%～65%。本周蛋白量反映了产生本周蛋白的单克隆细胞数，对观察骨髓瘤病程和判
关于β乳球蛋白的内容介绍
在实验过程中人们发现牛的β-乳球蛋白（BLG）基因非常稳定，并能在乳腺中特异性表达。Hyttinen等[3]将含有5'端2.8kb和3'端1.9kb的牛BLG基因片段构建成载体，转入小鼠胚胎细胞，可在转基因小鼠的乳腺中特异表达高水平的BLG，此外，还发现CpG位点的甲基化程度与B
组织蛋白L的基本内容
组织蛋白酶L( cathepsin L，CTSL) 是溶酶体半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员，具有非常独特的合成和转运方式。溶酶体CTSL，含有信号肽，并且是从ORF 第1个AUG 起始位点开始翻译。 首先，信号肽牵引合成的CTSL 前体酶原到内质网上。 然后，在内质网上信号肽与前体肽间的肽键发生断
酵母蛋白的基本内容介绍
早在公元前3000年，古埃及人就开始利用酵母来制作面包。另据《左传?宣公十二年》记载，公元前597年，已知道麦曲（酵母）可以治疗腹疾。在现代生活中，酵母的应用更加广泛，比如做馒头、面包我们用它来发面，我们喝的啤酒是用酵母发酵的，也可以做成酵母片用来治疗消化不良。多年来对酵母的细胞学、遗传学、生态
蛋白定量技术
（一）双缩脲测定法1．原理 蛋白质中的肽键有双缩脲反应，在碱性溶液中与二价铜离子形成蓝紫色的络合物，在一定的范围内，颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。此法特异性强，游离的氨基酸、小肽和核酸均不产生这种反应，但此法不够敏感，仅能测出毫克水平。 2．试剂配制 硫酸铜（CuSO4·5H2O）
相互作用蛋白的捕获实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 CM培养基乙酸锂PEGTEDMSO甘油氨苄青霉素仪器、耗材 离心机分光光度计摇床培养箱实验步骤 1. 为了转化文库，将约20 ml 含pSH18-34和pBait 的酵母菌EGY48培养液接种到Glc/CM-Ura-His 省却成分液体培养基中，于30℃培养过夜。2.