PCRSSCP的原理特点、操作方法和应用2

2)电泳取10μlPCR产物,加入10μl变性剂(95%甲酰胺,10mmol/LEDTA,0.02%溴酚蓝)、30μl 石蜡油,煮沸5min,取出立刻放入冰浴中2min以上,然后将水相全部上样,10-15℃下电泳.开始在300V电压下电泳5min,然后在120V电泳8h,取下凝胶,将其浸在含 0.5ug/ml溴化锭的1×TBE缓冲液中染色30--45min,在紫外灯下观察,或进行银染。3)银染法将PAG板用去离子水洗二次,浸入10%乙醇和0.5%冰醋酸溶液固定6min。用去离子水洗 二次,再浸入0.2%AgNO3溶液中10min。用去离子水洗3--5次,然后浸入1.5%NaOH和0.4%甲醛溶液中显色7min.最后,用 0.75%NaCO3终止显色.四、SSCP的应用自从Orita等用SSCP进行人类DNA多态性分析以来,该方法大量地用于检测和肿瘤发生 有关的基因突变,例如检测星形细胞瘤、脑瘤、小细胞肺癌、胃......阅读全文

PCRSSCP的原理特点、操作方法和应用2

2)电泳取10μlPCR产物,加入10μl变性剂(95%甲酰胺,10mmol/LEDTA,0.02%溴酚蓝)、30μl 石蜡油,煮沸5min,取出立刻放入冰浴中2min以上,然后将水相全部上样,10-15℃下电泳.开始在300V电压下电泳5min,然后在120V电泳8h,取下凝胶,将其浸在含

PCRSSCP的原理特点、操作方法和应用1

随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问 世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性 片段长度多态性分析(Res

PCRSSCP原理及应用

随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问 世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性 片段长度多态性分析(Restric

PCRSSCP实验原理和操作步骤

【实验目的】1.了解PCR-SSCP技术的原理。2.了解并熟悉PCR-SSCP技术的步骤。 【实验原理】 PCR-SSCP是1989年日本Orita等创建的筛查突变的新技术。它是一种简单、快速、经济的点突变筛查手段。PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA,

盐析的原理和应用特点

盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。常用的中性盐有氯化钠、

指纹技术的原理和应用特点

中文名称指纹技术英文名称fingerprinting定  义将待检测分子进行部分分解或扩增(如蛋白质的酶解、DNA的聚合酶链反应扩增等),然后进行层析、电泳等分离,获得特征性分离图谱(指纹)的方法。用以辨别样品之间的差异。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

荧光定量PCR技术特点、原理及其应用2

3 应用由于FQ-PCR具有高灵敏性,高特异性和高精确性的特点,目前,该项技术已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变及其多态性的研究等多个领域。3.1 病原体测定由于PCR技术的问世,使得病原体检测能够快速而方便的进行。但由于其高灵敏性,实验操作很容易受到污染而出现假阳性。只要

长周期光栅的原理和应用特点

长周期光栅(longperiodfibergrating,LPFG)与布拉格光纤光栅一样,也是由光纤轴上产生周期性的折射率调制而形成,其周期一般大于100μm。它的耦合机理是:向前传输的纤芯基模被耦合入几个特定波长的向前传输的包层模,包层模很快损失掉,所以LPFG基本上没有后向反射,在其透射谱中有几

空气采样仪器的原理和应用特点

气体采样仪是用于采集大气环境或作业环境中气体样品的常规性仪器,其由两个抽气泵分别组成独立的气路系统。可同时采集两种气体样品或采集平衡样品,采样工作快捷,可靠。可广泛应用于冶金,矿山,化工,建造,铸造,电力及环境监测,卫生防疫等部门,本采样器具有电子定时功能和节奏紧凑,体积小,性能稳定可靠等优点,是目

荧光分析的方法原理和应用特点

荧光分析法是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态,激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的物质

冷热冲击试验箱的正确使用操作方法特点和原理

   冷热冲击试验箱采用单片机控制,电动扬摆、冲击、微机测量、运算、数显结果并可打印等,工作效率高、测试精度高。在冲击试样后可利用剩余能量自动扬摆,做好下次试验准备,操作简便,工作效率高。   1、检查冷热冲击试验箱,使摆锤刀口处于两支承钳口的中心。校正钳口间的距离为。并检查其空打时指针是否从上止点

合成肽疫苗的结构特点和应用原理

合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的,大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒(FMDV)合成肽疫苗,主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位(VPI 环)或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展,但仍未获得一种具有理想

霍尔传感器的原理特点和应用

  霍尔效应是磁电效应的一种,这一现象是霍尔(A.H.Hall,1855—1938)于1879年在研究金属的导电机构时发现的。   后来发现半导体、导电流体等也有这种效应,而半导体的霍尔效应比金属强得多,当电流垂直于外磁场通过导体时,载流子发生偏转,垂直于电流和磁场的方向会产生一附加电场,从而在导

超临界萃取的技术原理、特点和应用

一、超临界萃取的技术原理超临界CO2流体萃取(SFE)分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系,即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下,将超临界流体与待分离的物质接触,使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。当然,对应各压力范围所得

螺旋集污阀的应用原理和特点

  螺旋集污阀主要用于消除地下水和其他水源中的固体颗粒,在给水处理领域用于除砂,减少浊度和固液分离。水系统中的空气容易腐蚀并损坏水泵,锅炉,热交换器,冰箱等设备和部件,使用寿命和效率大大降低。仅在系统点设置排气门是不好的,当压力降低时,溶解在水中的气体会再次形成气泡,尤其是在泵的前面,会分离出大量的

PCRSSCP

一.  样品的制备1. 设计引物。用Oliga6.0对目的基因进行分析,设定引物,引物长度18-21个碱基,扩增片段以200-300bp最为合适。2. PCR扩增并检测。根据不同的引物挑选适合的退火温度进行PCR扩增。扩增产物用2-2.5%的琼脂糖胶跑水平电泳检测,上样量3-5ul。PCR产物为10

横截面流量计的原理和应用特点

   横截面流量计由于没有足够的直管段,通过管道横截面上各点的流速不一样,很难找到一个能代表平均流速的一个点。实际风速分布也没有一定规律可遵循。我们将矩型或圆形管道的大小,横截面平均公成若干个面积相同的小单元,测量每个小单元中心点的流速再将所有小单元的流速和平均值,是整个又横截面积的平均流速,即速度

电喷射质谱的原理和应用特点

中文名称电喷射质谱英文名称electrospray mass spectroscopy;ESMS定  义一种使不同质量的粒子在电磁场中运动并按照质荷比进行分离的技术理论。即气体在电子的轰击下会产生带电粒子,带电粒子在电场的作用下获得能量做加速运动,而在磁场的作用下将做圆周运动,具有不同质荷比的离子其

微波辅助提取苍术的原理-设备-特点-和应用

微波辅助提取的原理:微波射线自由透过对微波透明的溶剂,到达植物物料的内部维管束和腺细胞内,细胞内温度突然升高,连续的高温使其内部压力超过细胞壁膨胀的能力,致细胞破裂,细胞内的物质自由流出传递至周围的溶剂中被溶解。不同物质的介电常数、比热、形状及含水量的不同,各物质吸收微波能的能力不同,其产生的热能及

CO2培养箱工作原理和应用

二氧化碳培养箱应用范围:适用于生命科学,免疫学,遗传学,临床医学,农业科学,药物学,医药工业,食品工业,毒理学,基础生物学研究和早期临床医学研究。1.风道结构:采用环形气流设计概念,强制对流模拟空气循环原理,保证了内胆温度,CO2浓度的高度均匀稳定.2.内玻璃门:采用光洁透明玻璃方便观察实物,四角圆

荧光原位杂交技术原理和应用特点

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结

反向聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称反向聚合酶链反应英文名称inverse PCR;iPCR定  义用于扩增已知序列的DNA旁侧未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上没有识别位点的限制内切酶,切出包含已知DNA、而两端带有未知序列的区段,将切出的DNA区段环化,然后再按已知的DNA序列设计一对引物进行扩增。应用学科细胞生物学

体视显微镜的结构原理、特点和应用范围

体视显微镜又可称为:实体显微镜或称操作和解剖显微镜。是一种具有正像立体感的目视仪器。其光学结构原理是由一个共用的初级物镜,对物体成像后的两个光束被两组中间物镜亦称变焦镜分开,并组成一定的角度称为体视角一般为12度--15度,再经各自的目镜成像,它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得,利用双通道

磁性免疫测定法的原理和应用特点

中文名称磁性免疫测定英文名称magnetic immunoassay定  义将抗体或抗原结合在含铁的颗粒(如Fe3O4的纤维素颗粒)上,利用磁铁就很容易将与之结合的抗体抗原复合体从混合物中分离出来的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

核磁共振波谱法的原理和应用特点

核磁共振波谱法(英语:Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy,简称 NMR spectroscopy 或 NMRS ),又称核磁共振波谱,是将核磁共振现象应用于测定分子结构的一种谱学技术。核磁共振波谱的研究主要集中在氢谱和碳谱两类原子核的波谱。人们可以从核磁共

随机聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称随机聚合酶链反应英文名称random PCR定  义采用许多序列不相同的(部分随机或全部随机序列)、短的(约10个核苷酸)引物所进行的聚合酶链反应。由于在模板DNA多个不同位置上扩增,所形成的产物长度各异,电泳图谱独特,可用于识别核酸的多态性、研究基因组的物理图谱及分析生物的进化等。应用学科

实时聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称实时聚合酶链反应英文名称real-time PCR定  义一种定量测定样品中特定DNA序列的聚合酶链反应。即使用标记(最常用是荧光标记)的PCR引物,因而能够通过荧光监测到每一次PCR循环后扩增所得DNA产物的量,从连续监控下获得的反应动力学曲线,可推导得样品中被扩增模板DNA的原初含量。应

发光免疫测定法的原理和应用特点

中文名称发光免疫测定英文名称luminescent immunoassay;LIA定  义以发光物质标记抗原或抗体,免疫反应后引发发光反应,根据发光强度对抗体或抗原进行的测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

体视显微镜的结构原理、特点和应用范围

  体视显微镜又可称为:实体显微镜或称操作和解剖显微镜。是一种具有正像立体感的目视仪器。其光学结构原理是由一个共用的初级物镜,对物体成像后的两个光束被两组中间物镜亦称变焦镜分开,并组成一定的角度称为体视角一般为12度--15度,再经各自的目镜成像,它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得,利用双

SPA提取IgG原理和操作方法

(一) 原理将SPA偶联至Sepharose-4B上后,利用亲和层析来提取人和某些动物的IgG,这样可以省去制备第二抗体。该法特别适用于单克隆抗体的研究。该法提取IgG与利用IgG纯化SPA原理是一致的。(二) 材料与试剂1.Sepharose-4B 琼脂糖2.SPA3.溴化氰4.0.10Mol/L