细菌生长检测之AlamarBlueTM摄入法
1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。 2、在培养结束前24小时加入Alamar Blue染料,96孔细胞培养板每孔20μl。 3、在培养结束后,直接在酶联检测仪上测定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,用OD570减去OD600即为活细胞还原的Alamar Blue染料,颜色深浅与活细胞数成正比。......阅读全文
细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小
细胞生长检测方法:碱性磷酸酶检测法(AKP法)
1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间,用PBS洗去死亡细胞,洗两次。2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液(0.2mol/L 硼酸,1mmol/L MgCl2 ,1.2mmol/L甲伞基磷酸)。在37℃ 5% CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养3小时。3、在荧光计数仪上测
细胞生长检测7:碱性磷酸酶检测法(AKP法)
碱性磷酸酶检测法(AKP法)1.按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间,用PBS洗去死亡细胞,洗两次。2.向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液(0.2mol/L 硼酸,1mmol/L MgCl2,1.2mmol/L甲伞基磷酸)。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3小
细胞生长检测1:[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数
[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数1.用RPMI-1640培养液洗涤对数生长期(培养3天)的CTLL-2细胞两次,每次250×g离心10分钟,洗去培养液中残存的IL-2。2.用台盼蓝(1% Trypan blue)染色法计数细胞并决定细胞的活力,用10%小牛血清的RPMI-1640培养液悬浮细胞至1×
大鼠生长激素(GH)ELISA检测法
大鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GH 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的GH与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin
常规无损检测法之射线探伤方法(RT)
射线探伤是利用射线的穿透性和直线性来探伤的方法。这些射线虽然不会像可见光那样凭肉眼就能直接察知,但它可使照相底片感光,也可用特殊的接收器来接收。常用于探伤的射线有x光和同位素发出的γ射线,分别称为x光探伤和γ射线探伤。当这些射线穿过(照射)物质时,该物质的密度越大,射线强度减弱得越多,即射线能穿透过
凝血分析仪检测方法之凝固法
凝固法(生物物理法) 凝固法是通过检测血浆在凝血激活剂作用下的一系列物理量(光、电、机械运动等)的变化,再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果,所以也可将其称作生物物理法。 电流法。电流法利用纤维蛋白原无导电性,而纤维蛋白具有导电性的特点,将待测样品作为电路的一部分,根据凝血过程中电路电
ELISA法检测之抗HBc结果的解读
作者:西安交通大学第二附属医院检验科 安哲博士之前详细阐述了临床实验室采用ELISA法检测抗HBc需要对血清进行30倍预稀释的理论依据。在此我就抗HBc检测问题从不同角度做下列进一步解释。第一,基本点。临床实验室采用ELISA法检测抗HBc(30倍预稀释)是以能否检出HBVDNA为其检测灵敏度,而不
细菌内毒素检测实验_鲎试验法
实验方法原理鲎是一种海洋节肢动物,血液中含有一种变形细胞,此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应,即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活,使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。 实验材料鲎试剂试剂、试剂盒生理盐水无菌水内毒素仪器、耗材安瓶习惯水浴箱实验步骤一、材料 1.
细菌生长繁殖的规律
①迟缓期:为细菌进入新环境的适应阶段,约1~4h。此期细菌体积增大,代谢活跃,但不分裂,主要是合成各种酶、辅酶和代谢产物,为今后的增殖准备必要的条件;②对数期:细菌培养至8~18h,则以几何级数恒定快速增殖,在曲线图上,活菌数的对数直线上升至顶峰。此期细菌的大小、形态、染色性、生理活性等都较典型,对
细菌生长繁殖的条件
1.营养物质2.合适的pH:7.2~7.6。3.适宜的温度:37℃。4.必要的气体根据对氧的需要程度,可将细菌分为:(1)需氧菌:必须在有氧(空气)的情况下才能生长。(2)微需氧菌:在5%左右的低氧环境中才能生长。(3)厌氧菌:必须在无氧的环境中才能生长。(4)兼性厌氧菌:在有氧和无氧环境中均能生长
细菌生长繁殖的条件
1.营养物质:细菌所需的营养物应按一定的方式配比提供。充足的营养是细菌进行新陈代谢的物质基础,包括水分、无机盐类、蛋白胨和糖等。对营养要求较高的细菌还需某些生长因子。2.合适的pH:环境的pH对细菌的增殖有很大影响,因营养的吸收、分解及能量的产生,都需要酶参与反应,而酶活性必须在一定pH和温度下才能
光合细菌的生长环境
在水产养殖中,能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等有毒物质,实现充当饵料、净化水质、预防疾病、作为饲料添加剂等功能。光合细菌适应性强,能忍耐高浓度的有机废水,对酚、氰等毒物有一定忍受和分解能力,具有较强的分解转化能力。它的诸多特性,使其在无公害水产养殖中具有巨大的应用价值。
失重使细菌茁壮生长
在未来,宇航员可能需要应对新的敌人:太空细菌。科学家已经发现,绿脓杆菌在失重环境下比在地球上更易繁殖,即使在缺乏营养物的条件下也是如此。这是一种常见的医疗器械污染物和尿路感染的罪魁祸首。 2011年7月,研究人员在地球实验室和亚特兰蒂斯号航天飞机上的模拟尿液中培养该细菌。在一些样本中,研
新型生物传感装置可检测细菌生长及药敏性
(图片来源:密歇根大学)美国密歇根大学的研究人员近日发明出一种新型生物传感装置,利用该装置,无需显微镜即可测量出细菌的生长过程及药敏特征。研究结果发表在1月15日的《生物传感器与生物电子学》期刊上。 科学家将这种装置称为“异步磁珠转动(AMBR)传感器”,它采用了一种可以在磁场中异步旋转的磁性小
大鼠生长抑素(Somatostatin)ELISA检测法
大鼠生长抑素(Somatostatin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Somatostatin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Somatostatin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Somato
细胞生长的ATP检测[荧光素酶法]
1.ATP反应液(Bio-Orbit)是粉末状混合物,含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在-20℃长期保存。2
细胞生长的ATP检测[荧光素酶法]
1、ATP反应液(Bio-Orbit)是粉末状混合物,含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在-20℃长期
大鼠神经生长因子(NGF)ELISA检测法
大鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 NGF 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NGF与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠NGF,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Stre
如何选择荧光定量检测法之SYBR-Green-I
总的说来,荧光检测技术可大致分为两大类:通用型的荧光染料检测法和高特异性的荧光探针法。前者主要是利用荧光染料(如SYBR Green I)与双链DNA分子结合发光的特性来指示扩增产物的增加,优点是:无需另外设计荧光探针,无需特别优化条件,简便易行,成本较低,能适用于任何一款定量PCR仪,缺点
常规无损检测法之磁粉探伤方法(MT)
磁粉探伤是建立在漏磁原理基础上的一种磁力探伤方法。当磁力线穿过铁磁材料及其制品时,在其(磁性)不连续处将产生漏磁场,形成磁极。此时撒上干磁粉或浇上磁悬液,磁极就会吸附磁粉,产生用肉眼能直接观察的明显磁痕。因此,可借助于该磁痕来显示铁磁材而是埋藏在表面下几毫米的近表面缺陷。用这种方法虽然也能探查气孔、
农药检测仪器之酶免疫法分析
农药检测仪器的使用,方便我们掌握农产品的农药残留超标情况,在目前农害虫对农产品影响的情况下,农药是我们进行农业发展必不可少的手段,对防治病虫害方面有重要的作用。但是农药本身对人体是有危害的,加上农户为了自身的利益,对农产品喷洒大量的农药,导致农药残留超标。免疫分析法是以抗原和抗体特异性结合反应为基础
细菌内毒素定量检测法应用与发展
一 细菌内毒素定量检测法应用与发展近10年,人们对疾病病因、病理的认识不断深化,发现了许多疾病与内毒素的关系。由于很小剂量的内毒素即能引起极广泛的生物作用及病理作用,因而加强内毒素的检测研究便成为临床、公卫及药检等领域的重要课题。 细菌内毒素检查法又称鲎试验法,它是1964年由美国学者Levih和
细菌群体生长繁殖的分期
(1)迟缓期:适应阶段。(2)对数期:细菌的形态、染色性、生理活性都较典型。(3)稳定期:细菌繁殖数与死亡数大致平衡。(4)衰亡期:细菌死亡逐渐增多,死菌数超过活菌数。
细菌生长及形态观察实验
实验方法原理 观察细菌菌落:观察方法一般可用肉眼进行观察,将平皿培养物放在自然光或白炽灯光的面前,从不同的角度进行观察菌落,若菌落太小,可用放大镜观察。实验步骤 1、观察菌落:了解菌落的各种特征,以便确定对该菌落如何进一步鉴别。菌落的各种特征及其描述如下:大小:直径以毫米(mm)计算。形状;点滴状、
细菌生长及形态观察实验
实验方法原理观察细菌菌落:观察方法一般可用肉眼进行观察,将平皿培养物放在自然光或白炽灯光的面前,从不同的角度进行观察菌落,若菌落太小,可用放大镜观察。实验步骤1、观察菌落:了解菌落的各种特征,以便确定对该菌落如何进一步鉴别。菌落的各种特征及其描述如下:大小:直径以毫米(mm)计算。形状;点滴状、圆形
细菌接种技术及生长表现
由于细菌 感染而致病的各种标本及带菌者所需检查的各种标本,往往并非单一的细菌,而混有其它非致病菌(人体正常菌群)。因此当对此标本须作出细菌鉴定时,就必须从标本中分离出致病菌,称为细菌分离培养技术。另外,对已得到可疑病菌进行细菌鉴定及菌种保存等培养,称为纯培养接种技术。 (一)平板划线接种法
细菌的营养和生长繁殖
(一)细菌的营养 1.营养类型:根据细菌对营养物质需要的不同,将细菌分为两大营养类型。 (1)自营菌:能以简单的无机碳化物、氮化物作为碳源、氮源,合成菌体所需的大分子,其能量来自无机化合物的氧化(化学能),也可通过光合作用而获得(光能),如固氮菌。 (2)异营菌:不能以无机碳化合物作为唯一的碳