植物过氧化物酶同工酶测定
凡能催化同一种化学反应,但其分子结构和带电性质不同的一组酶称同工酶(isoenzyme)。同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的,所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生理生化和遗传问题时,常常要分析同工酶谱的差异。因此,同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。一、原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化剂作用下聚合而成,具有三维网状结构,其网孔大小可由凝胶浓度和交联度加以调节。凝胶电泳兼有电荷效应和分子筛效应。被分离物质由于所载电荷数量、分子大小和形状的差异,因此在电泳时产生不同的泳动速率而相互分离。利用特异性的颜色反应使待测酶着色,这样就可在凝胶中展现出酶谱。过氧化物酶是植物体内常见的氧化酶。植物体内许多生理代谢过程常与它的活性及其同工酶的种类有关。利用过氧化物酶能催化H2O2把联苯胺氧化成蓝色或棕褐色产物的原理,将经过电泳后的凝胶置于有H2O2及联苯胺的溶液染色,出现蓝色或棕褐色部位......阅读全文
同工酶测定的临床意义和注意事项
临床意义1)在AMI后6h LD1开始出现升高,总LD活性升高略为滞后。AMI时LD1较LD2释放多,LD1/LD2>1.0,LD1/LD2比值的峰时约在发病后24~36h,然后开始下降,发病后4~7d恢复正常。2)当AMI病人的LD1/LD2倒置且伴有LD5增高时,预后比仅出现LD1/LD2倒置差
CK及其同工酶测定的临床意义是什么
CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍,所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法,其中后者最常用,为国内外测定CK的参考方法。CK同工酶 多用电泳和免疫抑制法测定,但两法均会受溶血和巨CK的干扰,免疫抑制法还会受
ELISA法测定糖原磷酸化酶同工酶
糖原磷酸化酶( Glycogen phosphorylase,EC2.4.1.1 GP)有三种同工酶;脑型(GPBB)、肌型(GPMM)和肝型(GPLL)。GPBB亦存在于心肌。该酶对心肌缺血缺氧敏感,可作为早期急性心肌梗死(AMI)的辅助诊断指标,对非典型的急性心肌梗死诊断尤为重要。根据实验室
同工酶分析
收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中,电泳 25 min,加入酶反应试剂,孵育 5~20 min 后,冲洗凝胶,
同工酶分析
实验方法原理 收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中
同工酶简介
用电泳方法将LDH同工酶分离,分析其酶谱,发现脊椎动物各组织中有五条酶带。每条酶带的酶蛋白都是由四条肽链组成的四聚体,LDH有两类肽链,A(M)或B(H),各有不同的免疫性质,按排列组合可形成符合于电泳酶带数的五种同工酶。LDH1及LDH5分别由纯粹的4条B链(B4)和4条A链(A4)形成,称为纯聚
同工酶分析
实验方法原理收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中,电泳 25 min,加入酶反应试剂,孵育 5~20 m
同工酶分析
实验方法原理 收集细胞,用 D-PBSA 洗涤,重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液,制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置,取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体,将琼脂糖凝胶置于其中,电泳 25 min,加入酶反应试剂,孵育 5~20
植物中的过氧化物酶体的简介
在植物中过氧化物酶体主要有:①参与光呼吸作用,将光合作用的副产物乙醇酸氧化为乙醛酸和过氧化氢,②在萌发的种子中,进行脂肪的β-氧化,产生乙酰辅酶A,经乙醛酸循环,由异柠檬酸裂解为乙醛酸和琥珀酸,后者离开过氧化物酶体进一步转变成葡萄糖,这一过程称为乙醛酸循环,因此植物细胞的过氧化物酶体又称乙醛酸循
过氧化物酶标记测定细胞凋亡
实验概要本实验用过氧化物酶标记测定了细胞凋亡。本方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。实验原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP
过氧化物酶标记测定细胞凋亡
本实验用过氧化物酶标记测定了细胞凋亡。本方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。实验原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多
植物磷含量测定
我也是刚好做完植物样和土样的磷测定。我用的方法也是硫酸双氧水消煮,但是我的空白值很小,没有出现你所说的问题。可能是你的空白样没有做好吧,或者说是你在样品摆放标号的时候错了错误
植物多参数测定仪对植物成分的测定优势
为了解植物成分,常需要有一种快速简便的多元素定量分析方法。近年来,随着ICP一 AES法的发展,植物样品同时测定多元素的方法已有许多报道。但是,植物的另一重要指标氮元素的测定仍需单独处理,虽然已有植物氮、磷、钾、钙、镁的联合 测定自动化分析方法,但消煮后需分取四份溶液分别用比色法、火焰光度法、原子吸
过氧化物酶的酶体结构
过氧化物酶体是由一层单位膜包裹的囊泡,直径约为0.5~1.0μm,通常比线粒体小。普遍存在于真核生物的各类细胞中,在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化氢水解。过氧化氢(H2O2)是氧化酶催化的氧化还原反应中产生的细胞毒性物质,氧化酶和过氧化氢酶都存在
髓过氧化物酶酶体的介绍
过氧化物酶体是由一层单位膜包裹的囊泡,直径约为0.5~1.0μm,通常比线粒体小。普遍存在于真核生物的各类细胞中,在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化氢水解。过氧化氢(H2O2)是氧化酶催化的氧化还原反应中产生的细胞毒性物质,氧化酶和过氧化氢酶都
关于过氧化物酶的酶体介绍
过氧化物酶体是由一层单位膜包裹的囊泡,直径约为0.5~1.0μm,通常比线粒体小。普遍存在于真核生物的各类细胞中,在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化氢水解。过氧化氢(H2O2)是氧化酶催化的氧化还原反应中产生的细胞毒性物质,氧化酶和过氧化氢酶都
关于过氧化物酶酶体的介绍
过氧化物酶体是由一层单位膜包裹的囊泡,直径约为0.5~1.0μm,通常比线粒体小。普遍存在于真核生物的各类细胞中,在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化氢水解。过氧化氢(H2O2)是氧化酶催化的氧化还原反应中产生的细胞毒性物质,氧化酶和过氧化氢酶都
超氧化物歧化酶同工酶活性测定
实验材料 人血试剂、试剂盒 PBS聚乙二醇NaN3氯化血红素双蒸水ABEI葡萄糖凝胶G-25明胶氢氧化钠仪器、耗材 透析袋离心机离心管滴定光结合管冰箱发光测试仪培养箱
碱性磷酸酶同工酶测定的临床意义
1.ALP1(来源于肝)阳性:见于肝外阻塞性黄疸、转移性肝癌、肝脓肿、肝充血和胆总管结石等。 2.ALP2增高:见于肝内胆汁淤滞、急性肝炎、原发性肝癌等。 3.ALP3增高: (1)骨骼疾病,如骨肿瘤和肿瘤骨转移、Paget氏病、医学/教育网佝偻病和骨软化症。 (2)其他疾病,如肾性营养
植物呼吸测定仪:测定研究植物呼吸的科学仪器
植物会呼吸吗?人类会呼吸,动物会呼吸,而植物要进行生命活动,当然也呼吸。不过测定植物的呼吸作用,不可能是把手指放在植物的“鼻子”下面来感知,要获 得科学的植物呼吸数据,那么就需要用到测定研究植物呼吸的科学仪器——植物呼吸测定仪。 植物不会像人或动物一样用肺来呼吸,因此测定方法也是完
过氧化物酶的测定实验——供体:ABTS
供体:氢过氧化物 氧化还原酶供体 + H2O2 → 氧化型供体 + 2 H2O从山葵中提取的这种酶是一种相对分子质量为 44000 的糖蛋白。它与过氧化氢酶关系密切,也携带一个原铁血红素作为辅酶。它对受体(H2O2)具有专一性,但是与众多的底物供体反应,这些特点都可以用在酶的实验中,如 5-氨基 2
同工酶的功能
在动、植物中,一种酶的同工酶在各组织、器官中的分布和含量不同,形成各组织特异的同工酶谱,叫做组织的多态性,体现各组织的特异功能。大多数基因性同工酶由于对底物亲和力不同和受不同因素的调节,常表现不同的生理功能,例如动物肝脏的碱性磷酸酯酶和肝脏的排泄功能有关,而肠粘膜的碱性磷酸酯酶却参与脂肪和钙、磷的吸
同工酶的概念
同工酶(isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶(LDH)同工酶。 同工酶的基因先转录成同工酶的信使核糖核酸,后者再
同工酶的分类
基因性或原级由不同基因产生的肽链而衍生的同工酶。这里所指的不同基因可以在不同染色体或在同一染色体的不同位点上,例如LDH中A、B两条肽链的基因分别在第11及第12对染色体上,唾液淀粉酶和胰淀粉酶的基因在第1对染色体的不同位点上。这类同工酶因分子结构差异较大,彼此间无交叉免疫。但同工酶的不同基因也可以
同工酶的应用
在生物学中,同工酶可用于研究物种进化、遗传变异、杂交育种和个体发育、组织分化等。例如最原始的脊椎动物七鳃鳗(Lamprey)只有一种LDH肽链,进化到较高级的鱼类才有A、B两类肽链。又如通过对地理分布不同的物种间某一同工酶谱的普查可以推测物种的地理来源。动、植物的遗传变异可通过子代和亲代同工酶谱的比
什么是同工酶?
同工酶(isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶(LDH)同工酶。 同工酶的基因先转录成同工酶的信使核糖核酸,后
同工酶的分类
基因性或原级由不同基因产生的肽链而衍生的同工酶。这里所指的不同基因可以在不同染色体或在同一染色体的不同位点上,例如LDH中A、B两条肽链的基因分别在第11及第12对染色体上,唾液淀粉酶和胰淀粉酶的基因在第1对染色体的不同位点上。这类同工酶因分子结构差异较大,彼此间无交叉免疫。但同工酶的不同基因也可以
同工酶的分类
基因性或原级由不同基因产生的肽链而衍生的同工酶。这里所指的不同基因可以在不同染色体或在同一染色体的不同位点上,例如LDH中A、B两条肽链的基因分别在第11及第12对染色体上,唾液淀粉酶和胰淀粉酶的基因在第1对染色体的不同位点上。这类同工酶因分子结构差异较大,彼此间无交叉免疫。但同工酶的不同基因也可以
植物水势测定的仪器——植物水势压力室
植物水势是客观表示植物组织水分状况的一个重要指标,也是作为指导合理灌溉的重要生理指标。在现代农业科研和生产指导中,植物水势的测定需求越来越高,为 满足需要,植物水势的测定方式也在不断更新和优化,并最终以仪器的形式展现在了用户的面前,那么植物水势测定的仪器是什么?它就是植物水势压力室。
植物水势压力室对植物水势的测定
植物水势压力室是用于测定植物水势(Ψ)和它的组成成分及压取木质部导管汁液供成分分析用的一种仪器。可用它研究植物的水分关系和植物与环境的关系。植物水势压力室适用于植物生理学、生态学、农学、林学及牧草等研究。据此指导作物及林草的合理用水和抗旱育种工作,是教学和科研工作的重要仪器之一。它操作简便、快速,适