RFLP技术和RAPD技术1
第一节 概 述DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶切位点碱基发生突变,或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失,导致酶切片段大小发生了变化,这种变化可以通过特定探针杂交进行检测,从而可比较不同品种(个体)的DNA水平的差异(即多态性),多个探针的比较可以确立生物的进化和分类关系。所用的探针为来源于同种或不同种基因组 DNA的克隆,位于染色体的不同位点,从而可以作为一种分子标记(Mark),构建分子图谱。当某个性状(基因)与某个(些)分子标记协同分离时,表明这个性状(基因)与分子标记连锁。分子标记与性状之间交换值的大小,即表示目标基因与分子标记之间的距离,从而可将基因定位于分......阅读全文
电泳技术:生物化学实验常用技术1
带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。如带正电荷的粒子向负极移动,带负电荷的粒子向正极移动。电泳技术是生物化学与分子生物学中的重要研究方法之一,利用电泳技术可分离许多生物物质,包括氨基酸、多肽、蛋白质、脂类、核苷、核苷酸及核酸等,并可用于分析物质的纯度和分子量的测定等。电泳的
聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用1
第一节 概述 聚合酶链反应或多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR),又称无细胞克隆技术(“free bacteria”cloning technique),是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。该方法一改传统分子克隆技术的模式,不通过活细胞,操作
水份测定仪KF1A技术参数和原理
水份测定仪KF-1A技术参数和原理 KF-1A型水份测定仪(卡尔费休法)原理: 溶液中同时存在I及I时反应在两个电极上进行,即在一个电极上被还原,在另一个电极上I被氧化,因此在两个电极之间有电流通过。如果溶液中只有I而无I则电极间无电流通过。当滴定终点时溶液中有微量卡尔·费休试剂存在
核酸、蛋白技术参数资料和分子量标准1
核酸及蛋白质常用数据 1.核苷三磷酸的物理常数 化合物 分子量 λmax(pH7.0)
层析技术(色谱法,Chromatography)概念、分类和操作(1)
层析技术概述引言层析法又称色层分析法或色谱法(Chromatography),它是在 1903~1906年由俄国植物学家M. Tswett首先提出来的。他将叶绿素的石油醚溶液通过CaCO3管柱,并继续以石油醚淋洗,由于CaCO3对叶绿素中各种色素的吸附能力不同,色素被逐渐分离,在管柱中出现了不同
RAPD(randomly-amplifiled-polymorphic-DNA,随机扩增的多态性DNA
一、 原理运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体
再生医学与NMT非损伤微测技术(1)技术解读
标签:克隆猴, 再生医学, NMT, 非损伤微测技术, 关键因子作者:许越 旭月 原创再生医学与NMT非损伤微测技术(1)技术解读1)再生医学(Regenerative medicine),是转化医学的一个分支,是指以修复或重建具有正常(生理)功能为目的,进行人体细胞、组织或器官的替换、工程制备或再
细说台式三用紫外分析仪的原理、使用以及特点
台式三用紫外分析仪是开展RFLP研究,RAPD产物分析的理想仪器。本机无需在暗室操作,便可对电泳凝胶进行紫外观察和照相,也可配备蛋白检测仪对蛋白进行观察和照相。紫外强而均匀。可接反射灯等。 仪器的工作原理: 采用不同波长的紫外光对DNA、RNA电泳凝胶样品进行观察拍照、检测蛋白质、核甘酸等,
荧光抗体技术的原理和技术特点
荧光抗体技术,用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面,滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗,干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与
颗粒制造技术的技术特点和应用
固体溶质在超临界流体中的溶解度由操作温度和压力调节。溶解在高密度超临界流体中的溶质通过喷嘴快速降压后,固体溶质能够以较细颗粒结晶析出并提供了一项超细颗粒的制造技术。该技术包含两种实现方式,既快速膨胀法及抗溶剂法。研究者们在色素、药物的超细颗粒制造做了大量的工作,且制备了尺寸可控,性能优异的超细颗粒。
速流技术的技术特点和应用
中文名称速流技术英文名称rapid flow technique定 义一类快速进样和描记的技术体系,可以大大改善时间和信号的分辨率,时间分辨达到微秒或更短。在原子吸收光谱、拉曼光谱和电子自旋共振和酶动力学等分析上均有广泛的应用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
基因敲入技术介绍和技术分类
基因敲入(gene knock in)是利用基因同源重组,将外源有功能基因(基因组原先不存在、或已失活的基因),转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组,插入到基因组中,在细胞内获得表达的技术。基因敲入有两种,一种是原位敲入,即在原基因敲除的位点插入新基因,它是基因敲除的逆过程;另一种是定点敲入,即
荧光抗体技术的技术特点和缺陷
该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。
细胞冻存与复苏应用方向、发展历史和冷冻技术1
概述细胞培养技术自1907年开创以来,历经一个世纪现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。在细胞培养技术广泛用于科学研究领域的令天,细胞株的冷冻保存和解冻复苏这一基础技术日益得到重视。低温保存是活体组织保存最常用的方法之一。冷冻保存一般是指在0~196℃进行保存,就是将体外培养物悬浮在加有或不加
DWY1电场原油脱水试验仪技术指标和参数
DWY-1电场原油脱水试验仪技术指标和参数 ●电源电压:AC220Ⅵ±10%·整机功率:1500W ●电场调节范围:0-1500∨/cm●时间设定范围:1秒~99小时 ●控温范围:室温~180°C 控温精度:±1°C(控制稳定后 ●工作罐容积:1L(处理量0.2~1
实时定量PCR技术综述(原理、荧光标记、TaqMan-Probes和...1
一.实时定量PCR基本原理1.PCR反应动力学右图为PCR反应曲线(横坐标为循环数,纵坐标表征产物量),不同的曲线代表初始模板量不同的 PCR反应。PCR反应的动力学公式为:Cn=C0(1+E)n其中C0和Cn分别为初始模板和n循环的拷贝数,n为循环数,E为扩增效率(0≤E≤1),理想状态下(即每个
KSV-Minitrough1技术指标
KSV Minitrough2膜分析仪是计算机控制的精密LB膜分析仪,可在控温条件下分析液体表面上单分子膜的性能,并能在固体基片上沉积多层单分子膜。仪器采用高精度高分辨率的膜天平、直流伺服电机无步阶沉积装置和单分子膜的对称压缩确保精确的膜压测量和控制以及沉积过程中高度均匀一致的分子取向。 操作软件是
PCR技术的原理与方法(1)
PCR定义PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术,能快速特异地在体外扩增任何目的DNA
电泳技术(electrophoretic-techniques)简介1
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类在电场中,推动带电质点运
免疫荧光技术(immunofluorescence-technique)1
免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是一种以荧光物作为标记物的免疫分析技术,荧光物质分子在特定条件下吸收激发光的能量后,分子呈激发态而极不稳定,其迅速回到基态时,可以电磁辐射形式释放出所有的光能,发射出波长较照射光长的荧光。用荧光素与已知的抗体(或抗原,较少用
动物实验的基本操作技术1
实验动物实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。一、常用实验动物的种类和特点(一)狗(do
RNAi技术专有名词(1)
1.RNAi:(RNA interference)RNA干扰 一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi,也译作RNA干预或者干涉)。它也是体内抵御外在感染的一种重要保护机
沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)(1)
一、 概述可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素(pre
三用紫外分析仪
三用紫外分析仪适用于核酸电泳、荧光的分析、检测, PCR 产物检测, DNA 指纹图谱分析,是开展 RFLP 研究, RAPD 产物分析的理想仪器。本机无需在暗室操作,便可对电泳凝胶进行紫外观察和照相,也可配备蛋白检测仪对蛋白进行观察和照相。紫外强而均匀。可接反射灯等。
分子标记
内容:一、遗传标记 二、DNA分子标记 三、染色体原位杂交 四、DNA分子标记的应用 长期以来,植物育种中选择都是基于植株的表型性状进行的,当性状的遗传基础较为简单或即使较为复杂但表现加性基因遗传效应时,表型选择是有效的。但水稻的许多重要农艺性状为数量性状,如产量等;或多基因控制的质量性状,如抗性等
你知道三用紫外分析仪的用途有哪些么
三用紫外分析仪适用于核酸电泳、荧光的分析、检测, PCR 产物检测, DNA 指纹图谱分析,是开展 RFLP 研究, RAPD 产物分析的理想仪器。本机无需在暗室操作,便可对电泳凝胶进行紫外观察和照相,也可配备蛋白检测仪对蛋白进行观察和照相。紫外强而均匀。可接反射灯等。 据了解,三用紫外分析
特异引物的PCR标记的相关介绍
特异引物的PCR标记所用引物是针对已知序列的 DNA 区段而设计的,具有特定核苷酸序列(通常为 18—24 bp),可在常规PCR复性温度下进行扩增,对基因组 DNA 的特定区域进行多态性分析。 ①序列标志位点 (Sequence Tagged Sites,STS) STS是对以特定对引物
FISH和PRINS技术
一、荧光原位杂交(FISH) 是一种简单、敏感、而容易操作的方法,结果迅速,并能在同一标本上检测多个不同的基因,可应用于细胞培养、染色体分裂像、冰冻切片和石蜡切片。 FISH技术是利用特异的DNA探针,标记了生物素,地高辛、或荧光素,对检测细胞进行DNA-DNA原位杂交,并用荧光法显示。 FISH
三用紫外线分析仪简介
三用紫外分析仪适用于核酸电泳、荧光的分析、检测, PCR 产物检测, DNA 指纹图谱分析,是开展 RFLP 研究, RAPD 产物分析的理想仪器。本机无需在暗室操作,便可对电泳凝胶进行紫外观察和照相,也可配备蛋白检测仪对蛋白进行观察和照相。紫外强而均匀。可接反射灯等。此产品多次出口。
TRFLP的优缺点
该技术在应用的过程中,肯定需要在实验条件上不断进行改进,而这种改进的好坏自然而然需要实验结果的验证。。V. Grüntzig在2002年做了该工作的一部分,结果认为,在限制性酶切时,很有必要去除其中影响DNA的酶切过程,并且实验证明了具体的酶切时间。具有说服力的结果如下: 1,T-RFLP出数据的