FISH和PRINS技术

一、荧光原位杂交(FISH) 是一种简单、敏感、而容易操作的方法,结果迅速,并能在同一标本上检测多个不同的基因,可应用于细胞培养、染色体分裂像、冰冻切片和石蜡切片。 FISH技术是利用特异的DNA探针,标记了生物素,地高辛、或荧光素,对检测细胞进行DNA-DNA原位杂交,并用荧光法显示。 FISH实验步骤 试剂配制: (1)变性液(70%甲酰胺 + 2×SSC,pH7.0):4 ml 20×SSC;8 ml 蒸馏水;28 ml 甲酰胺。每次新鲜配制。 (2)杂交后洗涤液: 20×SSC 4 ml;蒸馏水16 ml;甲酰胺20 ml。每次新鲜配制。调节pH前升至室温。 1. 用硅化玻片,石蜡切片,60℃烤片过夜。二甲苯脱蜡至酒精,斜置切片,空气中干燥。2. 蛋白酶处理: (1)每个染色缸40 ml 蛋白酶K消化溶液,配制方法如下:2×SSC 40 ml 倒入Facal管,在水浴槽中预热。将消化酶液加入管......阅读全文

FISH和PRINS技术

一、荧光原位杂交(FISH) 是一种简单、敏感、而容易操作的方法,结果迅速,并能在同一标本上检测多个不同的基因,可应用于细胞培养、染色体分裂像、冰冻切片和石蜡切片。 FISH技术是利用特异的DNA探针,标记了生物素,地高辛、或荧光素,对检测细胞进行DNA-DNA原位杂交,并用荧光法显示。 FISH

FISH和PRINS技术比较

一、荧光原位杂交(FISH)是一种简单、敏感、而容易操作的方法,结果迅速,并能在同一标本上检测多个不同的基因,可应用于细胞培养、染色体分裂像、冰冻切片和石蜡切片。FISH技术是利用特异的DNA探针,标记了生物素,地高辛、或荧光素,对检测细胞进行DNA-DNA原位杂交,并用荧光法显示。FISH实验步骤

荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)...

荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程设备    1、 医用微波炉;     2、 水浴锅;     3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜;     4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂    (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存

PRINS步骤

   1、常规脱蜡浸入0.01mol/LPBS;    2、用0.2mol/L盐酸处理5min;    3、蛋白酶K(25μg/m1)消化37℃ 15min;    4、分别用80%,95%和100%酒精脱水,室温干片;    5、加PCR混合液25μL(10mmol/L Tris-HCl,50mm

引物介导的原位标记技术实验

引物介导的原位标记技术(primed in situ labeling,PRINS) 是一种对细胞及组织的特异 DNA 序列染色的杂交技术,它能够得到和 FISH 技术相同类型的结果。实验材料中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X

引物介导的原位标记技术实验

            实验材料 中期染色体分裂相 抗地高辛抗体 试剂、试剂盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚

引物介导的原位标记技术实验

实验材料 中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒 三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X SSCTween-20乙醇脱脂奶粉(粉末)10 X dNTP反应终止液洗脱液封闭液仪器、耗材 盖玻片染色缸恒温装置实验步骤 一、标准一步反应PRINS 技术的操作规程有两套,一套

多彩色荧光原位杂交技术介绍

mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个基因,分辨复杂的染色体易位和微小缺失,区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发

多彩色荧光原位杂交技术的原理与应用

mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个基因,分辨复杂的染色体易位和微小缺失,区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发

多彩色荧光原位杂交技术的特点、分类和应用

mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个基因,分辨复杂的染色体易位和微小缺失,区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发

多彩色荧光原位杂交的技术特点

mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个基因,分辨复杂的染色体易位和微小缺失,区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发

多彩色荧光原位杂交技术介绍

多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FIS

荧光原位杂交染色体分析技术

  FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、

荧光原位杂交染色体分析技术

  FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、

FISH-技术基本实验

实验方法原理试剂、试剂盒70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材水浴锅增湿器玻片实验步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±2℃,在

FISH-技术基本实验

基本方案             实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇 SSC

FISH-技术基本实验

实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材 水浴锅增湿器玻片实验步骤 一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±

细胞遗传学——原位引物启动技术(PRINS)

·         Hiro Hirai's Primed in Situ Synthesis (Schistosoma Genome Network)The PRINS (Primed in situ) technique uses a specific primer, dNTPs wit

​-荧光原位杂交的技术发展

(一)多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次

荧光原位杂交的技术分类

(一)多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定位在一次

概述荧光原位杂交的技术发展

  (一)多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)  mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术,它不仅具有FISH的优点,而且克服了FISH的许多局限,其最大特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的基因定

FISH-protocols-for-Drosophila2

 3. Methods3.1 RNA Probe Preparation1.   Different strategies can be used to prepare template DNA for synthesizing antisense RNA probes by in vitro tr

RNA-FISH-on-cultured-cells-in-interphase

IntroductionFluorescence in situ hybridization (FISH) has become a widely used method in genome and molecular genetic studies. The technique is highly

Basic-Fluorescent-in-situ-Hybridization-(FISH)

实验概要Fluorescence  in situ hybridization method is a kind of physical map drawing method,  use fluorescent element mark probe, to detect probe and spli

FISH-protocols-for-Drosophila1

.1 RNA Probe Preparation (see Note 1)1.   1.5 mL microcentrifuge tubes or standard 96-well V-bottom microplates.2.   RNAse free water.3.   T7, T3 or S

原位杂交(含FISH)

  原位杂交组织化学常用试剂及处理   一、杂交前准备  (一)DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。  DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中,所有液体试剂都应经DEPC处理。方法是:取市售

临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病

FISH-荧光原位杂交实验

实验概要1. 通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和实验技术 2. 掌握原位杂交技术的操作方法及荧光显微镜的使用方法 3. 了解其在生物学、医学领域的应用实验原理荧光原位杂交(Fluorescence  in situ hybridization  FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20

临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病

常用的分子生物学基本技术(二)

PCR-SSCP法 PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构,这种二级结构依赖于其碱基组成,即使一个碱基的不同,也会形成不同的二