首个核内DNA感受器hnRNPA2B1

一、基因敲除的设计方案 1.1 基因的基本信息 确认斑马鱼基因的基本信息,包括名称ID号等,一般会在NCBI等查询。 1.2 分析基因结构、氨基酸序列等做生物学信息的分析 1.3分析蛋白质的保守结构功能域 通过综合考虑,设计最佳的KO靶点。 1.4 分析并设计CRISPR,分析其效率及脱靶的情况 一般使用CCTOP,少数物种如没有可找其它专业网站。 二、CRISPR活性验证 2.1 分析并确认基因组序列 设计Genotyping引物,确认实际基因组序列与理论匹配情况,如CRISPR靶点验证与理论序列存在出入,需回到1.4重做。 该步骤还需要确认引物扩增条件,以备后用,如不能正常扩增需要重新设计,并且不能进行下一步操作。 2.2 合成sgRNA 使用Thermo转录试剂盒转录,完成后需测定浓度(不得低于400 ng/μl) 和OD......阅读全文

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体3

在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定3

当多克隆位点有外源DNA片段插入时,破坏此酶的N端阅读框架,产生无α互补功能的N端片段,因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色,见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短,不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框,有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1

载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体2

二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体,大多数具有编码多种蛋白质的基因,能利用宿主细胞的蛋白质合成体系,进行生长和增殖。构建的噬菌体载体,以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA,全部序列已知,共编码50多个基因。其中约一半基因参与

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定2

(1)CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子(如Ca2+、Mg2+等)低渗溶液中时,细菌细胞膨胀成球形,处于感受态;此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面,在丰富培养基中生长数小时后,球状细胞恢复原

首例治疗不孕不育三父母女婴诞生

Nadiya 诊所主任Valery Zukin 抱着女婴。这是用治疗不孕不育症的“三父母”技术诞生的首个婴儿。这名女婴1月5日在乌克兰基辅一家诊所出生。“通过这种技术的帮助,一名15年来遭受不孕症困扰的34岁女性诞生了一名遗传自她本人基因的健康婴儿。”Nadiya诊所的一份声明说。该诊所主任Vale

MRE11在同源重组修复起始过程中受核内GRB2精准时空调控

  DNA双链断裂比一般的碱基损伤或单链断裂更难以修复,极易引起机体突变,因此在癌症的发生和发展过程中具重要作用。在损伤发生早期,断裂DNA链两端的H2AX发生S139位点的磷酸化形成γH2AX,后者作为发起DNA损伤修复的信号和招募修复蛋白的平台,通过MDC1,Rad17等蛋白将以MRE11为中心

锅内结垢和锅内水处理

1.水垢的形成及其危害。锅炉管壁上产生的坚硬附着物,称为水垢。产生水垢的原因是由于凝汽器不严、生水漏入凝结水中或水处理工作异常等,都可能增加锅炉水中的硬度以及其他杂质。这些杂质在锅炉运行条件下,就会附着在管壁上并逐渐形成坚硬的水垢。    水垢比金属的导热能力小几百倍。因此,锅炉产生水垢就会造成热损

张翀组基于FACS-seq技术研究关键感受器tnaC机制获进展

  12月23日,清华大学化工系生物育种技术与装备团队在《自然·化学生物学》(Nature Chemical Biology)发表文章,将流式分选-测序(FACS-seq)方法引入前导肽类调控元件的高通量表征和机制研究中,首次利用该方法采集深度突变扫描数据用于动力学过程的解析,从而发现了细菌吲哚合成

第十三届中国核学会“三核”论坛召开

  11月9日-11日,由中国核学会主办的第十三届中国核学会“核科技、核应用、核经济(三核)”论坛在南京召开,来自全国各省级核学会及核电、辐射技术应用的200多位代表参会。中国工程院院士万元熙表示,聚变能是更为理想的新能源,但发展聚变能也面临巨大挑战——聚变能燃料需加热至极高温度。目前我国在应用磁约

氢核磁各核中常用的内标是什么

TMS: TetraMethylsilane 四甲基硅烷。因为每台核磁仪的磁场强度都不同,而化学位移有时要精确到百万分之几赫兹(ppm)。所以, 用相对于标准物(TMS)的共振频率为零来表示相对化学位移。

核衰变的放射性核衰变的常见类型

科学研究表明,稳定性核素对核子总数有一定限度(一般为A≤209),而且中子数和质子数应保持一定的比例(一般为N/Z=1~1.5,也有个别例外)。任何含有过多核子或N/Z不适当的核素,都是不稳定的。A≥209的核素,即元素周期表中钋(Po)之后的所有元素的核素都具有放射性(钋之前的元素,有的核素也具有

核衰变的放射性核衰变的常见类型

科学研究表明,稳定性核素对核子总数有一定限度(一般为A≤209),而且中子数和质子数应保持一定的比例(一般为N/Z=1~1.5,也有个别例外)。任何含有过多核子或N/Z不适当的核素,都是不稳定的。A≥209的核素,即元素周期表中钋(Po)之后的所有元素的核素都具有放射性(钋之前的元素,有的核素也具有

氢核磁各核中常用的内标是什么

TMS:TetraMethylsilane 四甲基硅烷.因为每台核磁仪的磁场强度都不同,而化学位移有时要精确到百万分之几赫兹(ppm).所以,用相对于标准物(TMS)的共振频率为零来表示相对化学位移.

英国发布核研究路线图-重振核产业

英国欲大力发展核能研究   就在英国和其他国家开始建造更多的核电站以减少碳排放的时候,英国政府于3月26日发布了一份产业战略书,旨在帮助核能产业实现最大的预期增长。   这项战略承认,一个蓬勃发展的核能产业还需要政府在研究和开发(R&D)上给予扶持,并因此对英国目前的核能R&D状态进行了评估——

原核生物和真核生物冈崎片段的差异

冈崎片段存在于原核生物和真核生物中。真核生物的DNA分子不同于原核生物的环状分子,因为它们更大,通常有多个复制起点。这意味着每个真核细胞的染色体都是由许多具有多个复制起点的DNA复制单元组成的。相比之下,原核DNA只有一个复制起点。原核生物和真核生物冈崎片段的长度也不同。原核生物的冈崎片段比真核生物

原核生物和真核生物冈崎片段的差异

冈崎片段存在于原核生物和真核生物中。真核生物的DNA分子不同于原核生物的环状分子,因为它们更大,通常有多个复制起点。这意味着每个真核细胞的染色体都是由许多具有多个复制起点的DNA复制单元组成的。相比之下,原核DNA只有一个复制起点。原核生物和真核生物冈崎片段的长度也不同。原核生物的冈崎片段比真核生物

《核安全法》已有初稿-将为核安全顶层法律

  记者独家获悉,《核安全法》目前已经形成初稿,本周相关部门将就该稿进行讨论,一位参与该法拟定的人士表示,按照目前的进度,争取五年内出台。核电安全问题备受关注,而作为核安全顶层法律的《核安全法》的出台更是各方关心的焦点。  “我们一直在研究《核安全法》的制订工作,去年8月份正式列入十二届全国人大立法

原核和真核生物mRNA有不同点

原核和真核生物mRNA有不同的特点:①原核生物mRNA常以多顺反子(见)的形式存在,即一条mRNA链编码几种功能相关联的蛋白质。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在,即一种mRNA只编码一种蛋白质。②原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的,即转录尚未完毕,蛋白质的转译合成就已开始。真核生物转录

外周血单个核细胞淋巴细胞和单个核细胞

  1、淋巴细胞  淋巴细胞来源于造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)。造血干细胞可分化成多能前体细胞( multipotent progenitor cell,MPC),继而分化为淋巴样干细胞和髓样干细胞。淋巴样干细胞可继续发育为成熟的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等

原核生物和真核生物mRNA的特点对比

原核生物mRNA常以多顺反子的形式存在。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在。原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的,真核生物转录的mRNA前体则需经转录后加工,加工为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作。原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟 ,最长只有数小时(RNA噬菌体中的

欧核中心首获最重反物质超核证据

据欧洲核子研究中心(CERN,简称“欧核中心”)官网近日报道,该机构大型离子对撞机实验(ALICE)合作组科学家宣布,在大型强子对撞机(LHC)上探测到了超氦-4的反物质反超氦-4的首个证据。这也是LHC迄今探测到的最重反物质超核的首个证据。该成果为科学家进一步揭示宇宙中正反物质不对称之谜提供了新线

原核和真核生物mRNA有不同的特点

①原核生物mRNA常以多顺反子(见)的形式存在,即一条mRNA链编码几种功能相关联的蛋白质。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在,即一种mRNA只编码一种蛋白质。②原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的,即转录尚未完毕,蛋白质的转译合成就已开始。真核生物转录的mRNA前体则需经后加工,加工为成

原核生物和真核生物冈崎片段的差异

  冈崎片段存在于原核生物和真核生物中。真核生物的DNA分子不同于原核生物的环状分子,因为它们更大,通常有多个复制起点。这意味着每个真核细胞的染色体都是由许多具有多个复制起点的DNA复制单元组成的。相比之下,原核DNA只有一个复制起点。  原核生物和真核生物冈崎片段的长度也不同。原核生物的冈崎片段比

DNA合成(DNA-synthesis-)技术介绍

蛋白质概念提出:DNA多肽合成(DNA synthesis ):按照预定核苷酸的顺序,将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法,即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸,可自动化操作。)目前,oligo DNA合成一般都采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,此方法具有高效

DNA-指纹的概念高变区DNA与DNA指纹

人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段(10bp 左右)多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后,用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ,然后将样品进行

一种国际一流基因编辑技术

近日,由河北科技大学生物科学与工程学院韩春雨副教授作为通讯作者的研究论文《DNA-guided genome editing using the Natronobacterium gregoryi Argonaute》在国际顶级期刊《自然生物技术》(Nature Biotechnolo

DNA的限制性内切酶酶切反应的基本原理与实验技术

[实验目的]通过本实验学习DNA的限制性内切酶酶切反应的基本原理与实验技术。[实验原理]1.限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶

全球首例“三父母”婴儿技术细节公布

  世界首个细胞核移植“三父母”婴儿有关技术细节3日正式公布。开发有关技术的美国新希望生殖医学中心张进等人称,目前这名婴儿健康状况良好,为受线粒体遗传病困扰的家庭诞生健康后代带来了新希望。  每个人都从父母那里继承三份遗传物质,分别是父亲精子的细胞核DNA(脱氧核糖核酸)、母亲卵子的细胞核DNA,以

核相仪简介

  高压核相器即无线高压核相器是最新研制出的新型核相产品,分别用于35、110kV系统,确定两个电网(发电机组)相位是否相同,以便确定并网。高压核相器绝缘管采用高性能绝缘材料,核相仪表采用塑料外壳配合活动支架,可方便地将核相仪表在绝缘管上灵活地改变观看角度,使用安装简便易行。