病理制片技术——封片

封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易散开,易产生气泡,难以驱除,并影响折光率。(2)树胶用量多少应根据组织大小、厚薄而定。(3)应迅速敏捷滴胶。(4)封片时,切片上应保留适当的二甲苯,以防干封,产生气泡。(5)为防止气泡,封片时,树胶不宜搅动。(6)如遇有小气泡时可用镊子轻压盖玻片,排除气泡。(7)封片时,若离面部较近,鼻、口呼出的气体会有水分造成切片云雾状甚至模糊不清,需引起注意。二、机器胶带封片机机器胶带封片机不用树胶,只用少量二甲苯即可封片。使用方便,切片诊断后即可归档,不会因树胶不干造成粘片等。使用封片机时,首先检查二甲苯瓶,并检查滴 液分注量,检查胶带可用......阅读全文

病理制片技术——封片

封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易

LSCM的无荧光封固剂封片

对于荧光标记过的样品应该用无荧光封固剂封片,并尽量选择封片后可以凝固的无荧光封固剂,如 Mowiol  4 ~ 88 ( SIGMA,Produce No.:81381)。如果临时封片,也可以封于 50% 甘油中,此时应尽量使用最少体积的液体,以减少样品移动。配制 Mowiol 封固剂时,在50mL

关于病理切片的染色和封片的介绍

  病理切片常用的染色方法是苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数

抗荧光衰减封片剂使用说明及注意事项

抗荧光衰减封片剂是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。以甘油为基础,加入抗荧光淬灭剂,有强烈的防荧光衰减作用,用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片后,样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。本试剂操作简单,在封片时用枪滴一滴抗荧光淬灭封片液,盖上盖玻片就可以了。当然,此产品不象树胶一样能固定盖玻片。所以

β半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验

实验方法原理 实验材料 小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液(PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材 5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片

β半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验

半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测 准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色             实验方法原理 实验材料

高品质FluoromountG荧光封片剂助你顺利get精美免疫荧光图

同为科研打工人,熬过的夜、绕过的弯、入过的坑、踩过的雷,小艾不说你肯定秒懂,科研路漫漫,小艾与你来作伴。若干年前,作为一名刚进实验室的小菜鸟,就是从做IF开始启蒙的。看了一下师姐的实验记录文档,那叫一个漂亮: 这样的  这样的 这样的  。。。。。。 兴致勃勃的开始,一筹莫展的结局,我的是这样的  

半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测

实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液(PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片纤光照明的解剖显微镜

荧光和化学发光标记

连接于二抗的标记物是为了检测抗体的结合,选择标记物依赖于几个参数:检测方法:荧光或着色沉淀,荧光标记物用特殊波长的光激发时发射出可见光封片介质(仅免疫组化):AEC, Fast Red, INT 或其它水性发光基团是可以醇溶的并要求水性封片. 除上述之外的发光基团是有机的所以最好使用有机性封片介质。

免疫荧光的标本怎么制作

免疫荧光的标本制作的基本程序和DAB显色的组化类似:1 免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同2 免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定3 二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察4、免疫荧光在封片使用专用封片剂(如果你经费比较充足)或甘油:0.0

常规共聚焦显微镜的样品制备有哪些要求

   共聚焦显微镜样品制备是检测前的关键步骤。样品需经荧光探剂标记(单标、双标、三标)。  标本可以是固定的或活的组织,也可以是固定的或活的贴壁培养,细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片。样品的Zda厚度约1~2mm,使用的盖玻片厚度应小于0.17

常规共聚焦显微镜的样品制备有哪些要求?

   共聚焦显微镜样品制备是检测前的关键步骤。样品需经荧光探剂标记(单标、双标、三标)。  标本可以是固定的或活的组织,也可以是固定的或活的贴壁培养,细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片。样品的Zda厚度约1~2mm,使用的盖玻片厚度应小于0.17

共聚焦显微镜常规样品的制备要求

  共聚焦显微镜是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今分子生物学和生命科学重要的分析仪器之一。共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸多生理信号机细胞形态的变化,成为形

离心式压缩机的密封形式介绍

  在离心式压缩机中,为了减少压缩机转子与固定元件之间的间隙漏气,必须有密封。密封按其位置可分为四种:轮盖密封、级间密封、平衡盘密封和(前、后)轴封。密封的形式通常采用梳齿式的迷宫密封,此外尚可采用石墨环密封、固定套筒液膜密封、浮动环密封以及机械密封等。  迷宫密封的工作原理:当气流通过梳齿形密封片

细胞免疫荧光操作步骤

1.细胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封闭30min;7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;8.

免疫荧光的标本要如何制作?

荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位。因此标本制作的好坏直接影响到检测的结果。在制作标本过程中应力求保持抗原的完整性,并在染色、洗涤和封埋过程中不发生溶解和变性,也不扩散至临近细胞或组织间隙中去。标本切片要求尽量薄些,以利抗原抗体接触和镜检。标本中干扰抗原抗体反应的

显微镜的盖玻片怎么才能很好的盖在载玻片上

必须先斜45°角左右一边先接触到载玻片,然后缓缓的放下另一边。这样可以减少封片过程中气泡的产生,另外封片树胶也会均匀些

基本方案2-G-显带后的染色体原位杂交实验

实验材料未封片或 Entdlan 封片 G 显带的中期细胞试剂、试剂盒二甲苯浓度梯度乙醇丙酮 甲醇固定剂2 X SSC仪器、耗材全染色体涂染探针Coplin 缸实验步骤

免疫荧光必备ProLong-Gold--SlowFade-Gold抗淬灭效果比照明细

如果荧光染色的目标分子丰度比较低或者样本在强激发光下长时间放置,很容易出现明显的光漂白作用,即荧光淬灭作用。Life Technologies公司专门开发了 ProLong 和 SlowFade 两个系列抵抗荧光信号淬灭的试剂。其主要原理是可以有效避免荧光染色后的固定细胞或组织等样品不被氧化,从而防

免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项

一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化,不同点如下:1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同。2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。4、免疫荧光在封片使用专用封片剂或甘油:0.0

免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项

一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化,不同点如下: 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油

免疫荧光双标技术中操作要点和经验

一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化,不同点如下: 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油

免疫酶标技术

1) 直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色

细胞免疫化学:免疫酶标技术

1) 直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色

免疫酶标技术

免疫酶标技术1)  直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟

elisa试剂盒对免疫荧光实验的具体方法步骤

现代的经济在发展、科研技术也在发展,我们的生活水平质量在提高,我们对实验技术的视野也是同样的在不断开拓。elisa试剂盒为您细说免疫荧光实验的具体方法步骤,上海劲马精益求精,力求销售的高质量试剂产品能够为科研事业做出贡献。今天,我们要给朋友们讲说的也是相关实验方法,免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和

激光扫描共聚焦荧光显微镜的样品要求

  1,样品经荧光探针标记;  2,固定的或活的组织;  3,固定的或活的贴壁培养细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上;  4,悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片;  5,载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,盖玻片应光洁,厚度在0.17mm左右  6,标本不能太厚,如太厚激发光大部

激光共聚焦显微镜的样品要求

  1、样品经荧光探针标记;  2、固定的或活的组织;  3、固定的或活的贴壁培养细胞应培养在Confocal专用小培养皿或盖玻片上;  4、悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片;  5、载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,盖玻片应光洁,厚度在0.17mm左右  6、标本不能太厚,如太厚激发光大部

冰冻切片免疫荧光

实验概要冰冻切片免疫荧光实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片1.提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定;2.梯度蔗糖脱水:10%-20%-30%;3

正常角膜缘干细胞的免疫染色

正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料:1.一抗:(1)ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2)连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3)细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5---