培养基的制备与微生物接种技术(2)
(9)搁置斜面:将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上,搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。(10)无菌检验:灭菌后的培养基放入37℃恒温箱中培养24h,以检验灭菌效果,无污染方可使用。(二)制备马铃薯蔗糖琼脂培养基1、配方:马铃薯(去皮)200g、蔗糖15—20g、琼脂20—30g、蒸馏水1000mL。PH自然。2、步骤:(1)将马铃薯洗净,去皮,切成大小约为1㎝3的小块,称200g,放入1000mL水中煮沸20—30分钟,用双层沙布过滤,取其液滤。(2)定容:加水补足至1000mL。(3)加入蔗糖至全部溶化。(4)加琼脂.至全部溶化。(5)趁热分装试管及三角瓶。(6)加棉塞:分装完毕后,在试管口或三角瓶口塞上棉花,以阻止外界微生物进入培养基而造成污染,并保证有良好的通气性能。(7)包扎:棉塞上包一层牛皮纸,扎紧,即可进行灭菌。(8)灭菌:将上述培养基以0.1Mpa,121℃,高压蒸汽灭菌20min。......阅读全文
常用培养基的制备、细菌接种方法、细菌生长现象观察和...
常用培养基的制备、细菌接种方法、细菌生长现象观察和细菌的分布培养基的制备 原理 培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配置而成的一种混和营养基质,用以培养或分离各种微生物。因此,营养基质应当有微生物所能利用的营养成分(包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素)和水。根据微生物的种类和实
细菌的分离培养与接种技术
绝大多数细菌在适宜的条件下可以生长,细菌感染性患者标本只有经过细菌的分离培养、鉴定和药物敏感试验,才可对感染性疾病进行病原学诊断并指导临床用药。因此,细菌培养对疾病的诊断、预防和治疗具有重要的作用。细菌分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。通过分离,
细菌接种、分离纯化和培养技术(2)
2、涂布平板法首先把微生物悬液通过适当的稀释,取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上,然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上,经恒温培养便可以得到单个菌落。(图3-5,b)3、平板划线法最简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的
常用培养基的选择、制备、灭菌与消毒
选择基本培养基时,除待培养植物的基因型外,通常应考虑培养基的种类,其总离子浓度、总氮水平及氮源种类(硝态氮和铵态氮)与比例、钙和氯化物的含量等。草本植物组织培养广泛使用的MS培养基,而木本植物组织培养通常采用低盐基本培养基如1/2或1/4MS或WPM(Woody Plant Medium,木
培养基制备方法与注意事项
1、培养基配方选择同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH
抗体的制备方法与原理2
骨髓瘤细胞的培养可用一般的培养液,如RPMI1640,DMEM培养基。小牛血清的浓度一般在10%~20%,细胞浓度以104~5×105/ml为宜,最大浓度不得超过106/ml。当细胞处于对数生长的中期时,可按1:3~1:10的比例传代。每3~5天传代一次。细胞在传代过程中,部分细胞可能有返祖现象,
细菌的接种与分离技术的种类
细菌的接种与分离技术:(1)常用的平板划线分离法有以下两种:①连续划线分离法:此法主要用于杂菌不多的标本。②分区划线分离法:本法适用于杂菌量较多的标本。(2)斜面接种法:该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。(3)液体接种法:多用于一些液体生化试验管的接种。(4)穿刺接种法:此
微生物取样、样品制备技巧及稀释、接种、培养方法汇总!
一、取样准备(1)取样时该样品必须是代表该批产品情况。从车间取回样品冷冻品按要求进行解冻,干燥食品可放在常温冷暗处,易腐和冷却样品应放入10℃环境。冷冻样品来不及检验应放入-15℃以下冰箱内,待检样品存放时间不应超过36h。(2)解冻原则上冷冻样品取出后,按包装原样在室温下自然解冻;也可在0-4℃环
培养基的制备
目的要求 1.掌握一般培养基制备的原则和要求。 2.熟悉一般培养基制备的过程。 操作步骤 一、培养基的制备原则和要求 培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择
微生物学技术:微生物的接种、分离和培养
一、目的要求1、掌握各种分离、接种方法。2、掌握无菌操作基本环节。二、实验说明微生物在自然界中呈混杂状态存在,要获得所需菌种,必需从中把它们分离出来。在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。微生物分离和纯化的方法很多,但基本原理却是相似的,即将待分离的样品进行一定的稀释,并使微生物的细胞(或孢子)尽
微生物接种、分离纯化和培养技术(一)
(一)接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面要将菌
微生物接种、分离纯化和培养技术(二)
(二)分离纯化含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。1、倾注平
酿酒酵母培养基的制备实验——YPAD培养基的制备
试剂、试剂盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,琼脂 10.0 g,加水到 6
微生物如何接种?微生物三点接种法
接种是微生物技术中最基本的操作之一,接种技术在微生物的分离纯化、生理生化等试验中都非常重要。由于接种的目的不同,所采用的接种方式也不同,接种可分成斜面接种、穿刺接种和三点接种等。选择正确的接种方法,对于微生物的分离、纯化、增殖和鉴别都有重要作用。因接种方法的不同,常常采用不同的接种工具,如接种环、接
自动培养基制备分装器的技术指标
1、可制备从1升到10升的培养基。 2、高效电加热器,方便腔体的清洗。 3、自带磁力搅拌装置,每分钟50-200转可调。 4、温度控制范围:70℃到122℃。 5、微处理器控制温度精度为0.1度,显示温度精度0.1度。 6、机器有培养基灭菌模式、巧克力平板模式、水浴锅模式及高压锅模式。
微生物检测:接种
微生物检测:接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 接种和分离工具 1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.玻璃涂棒 5.接种圈 6.接种锄 7.小解剖刀 常用的接种方法有以下几种: 1、划线接种 这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直
微生物实验市培养基的制备和质量控制要点
微生物实验市培养基的制备和质量控制要点 使用脱水培养基和培养基组分来制备培养基时要准确称量。使用己校正的具有适合的称量范围的天平。使用清洁的容器和工具,防止配方中带入外来物质,改变培养基的zui终组成。科恩电子天平称量也应该记录。 脱水培养基先在水中分散,并完
明胶培养基的制备
成分: 蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 明胶 120g 蒸馏水 1000mL 制法: 将上述成分混合,置流动蒸气灭菌器内,加热溶解,校正pH至7.0~7.2,用绒布过滤
条件培养基的制备
实验方法原理收集对数生长晚期的同源或异源细胞系的培养基,过滤,根据需要用新鲜培养基稀释。实验材料条件细胞仪器、耗材克隆用培养基除菌滤器实验步骤1. 条件细胞(条件细胞:同一种细胞、其他细胞系(如,3T 3 细胞),或小鼠胚胎成纤维细胞)生长至 50 % 汇合。2. 更换培养基,继续培养 48 h 。
MFC培养基的制备
成分:胰胨 5g 酵母浸膏 3g 氯化钠 5g 乳糖 12.5g 胆盐3号(bile salt No.3) 1.5g 或混合胆盐 琼脂15g 苯胺蓝(aniline blue)
条件培养基的制备
实验方法原理 收集对数生长晚期的同源或异源细胞系的培养基,过滤,根据需要用新鲜培养基稀释。 实验材料 条件细胞
条件培养基的制备
实验方法原理收集对数生长晚期的同源或异源细胞系的培养基,过滤,根据需要用新鲜培养基稀释。实验材料条件细胞 仪器、耗材克隆用培养基
食品微生物检测实验室培养基制备要求
培养基制备的质量将直接影响微生物生长,因为,各种微生物对其营养要求不完全相同,培养目的的不同,各种培养基制备要求如下: 1.根据培养基配方的成分按量称取,然后溶于蒸馏水中,在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。 2.pH测定及调节:pH测定要在培养基冷至室温时进行,因在热或冷的情况下,其p
细菌的接种与分离技术方法有哪些?
(一)平板划线分离法在被检标本中,常混杂有多种细菌,平板划线分离法可使这多种细菌在培养基表面分散生长,各自形成菌落,以便根据菌落的形态及特征,挑选单个菌落进行纯培养。常用的平板划线分离法有以下两种:1.连续划线分离法 此法主要用于杂菌不多的标本。用接种环取标本少许,于平板1/5处密集涂布,然后来回作
微生物学技术:斜面培养基移种技术
(1)材料琼脂斜面培养基经分离培养的平板培养物。(2)方法①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。②左手持长有细菌的平板底,右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后,沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处,立即用此手取斜面培养基斜持,用右手小指与手掌
微生物接种方法之斜面接种法
该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。(1)左手平托两支试管,拇指按住试管的底部。外侧一支试管是斜面上长有菌苔的菌种试管,内侧一支是待接的空白斜面,两支试管的斜面同时向上。用右手将试管塞旋松,以便在接种时容易拔出。(2)右手拿接种环(如握毛笔一样),在火焰上先将环端烧红灭菌,然
肉汤培养基制备
贵阳中医学院基础医学实验教学中心网站肉汤培养基制备实验仪器、耗材 鲜牛肉末蛋白胨氯化钠蒸馏水实验步骤 去脂、去筋鲜牛肉末50g,加水100ml,搅匀,放冰箱过夜,取出煮沸30分钟,用纱布过滤,补足水量为100ml,即为牛肉浸液。加入蛋白胨1g,氯化钠0.5g,加热溶解。调整PH值为7.6,煮沸10分
电镜与样品制备技术
电镜样品取材方法 1 动物及人体组织的取材 动物组织的取材,应在麻醉(1%戊巴比妥钠按5ml/kg体重腹腔注射)或断头急性处死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小块组织,放在干净的纸板上,滴一滴冷却的固定液,用新的、无油污锋利的(双面)刀片将材料切成大约1㎜宽,2~3㎜长的小块,从中挑选损伤小的小条
硫乙醇酸盐流体培养基制备与培养条件
酪胨(胰酶水解) 15.0g 酵母浸出粉 5.0g无水葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5gL-胱氨酸 0.5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0 ml硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.75g(或硫乙醇酸) (0.3ml) 水 1000 ml除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节pH 为
中和或灭活用培养基制备与培养条件
按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法,在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂,其用量同验证试验。