生物化学实验的基本操作1
一、玻璃仪器的使用及清洁 (一)玻璃仪器的洗涤及干燥 1、一般仪器:烧杯、试管、离心管等普通玻璃仪器,可直接用毛刷蘸餐洗净刷洗,然后用自来水冲洗,直至容器内不挂水珠即可。最后用少量蒸馏水冲洗内壁2-3次,倒置晾干即可。 2、容量分析仪器:容量瓶、滴定管及吸管等容量仪器,用后用自来水多次冲洗,如能清洁(壁不挂水珠),再用蒸馏水少量冲洗2~3次晾干即可备用。若仍不干净附有油污等,则须于干后放入铬酸洗液内浸泡数小时,然后倒净(或捞出)洗液,用自来水充分冲洗至水不显黄色后再冲几次,最后用少量蒸馏水冲洗2~3次晾干备用。 在做酶学实验时,对仪器的清洁要求更高,因如有极微量的污物(如重金属离子)即可导致整个实验失败。因此,必要时仪器经上述方法洗涤后,还需用稀盐酸或稀硝酸洗涤,以除去铬及其它金属离子,然后再用自来水、蒸馏水冲洗。生化实验室常用的洗液有以下几种: (1)铬酸洗液:为最常用的洗液,......阅读全文
生物化学实验的基本操作1
一、玻璃仪器的使用及清洁 (一)玻璃仪器的洗涤及干燥 1、一般仪器:烧杯、试管、离心管等普通玻璃仪器,可直接用毛刷蘸餐洗净刷洗,然后用自来水冲洗,直至容器内不挂水珠即可。最后用少量蒸馏水冲洗内壁2-3次,倒置晾干即可。 2、容量分析仪器:容量瓶、滴定管及吸管等容
生物化学实验的基本操作2
二、一般操作技术1、混匀法:欲使一化学反应充分进行,必须使反应体系内各种物质迅速地相互接触,因此除特别规定外,一般都需要将反应物彻底混匀。混匀方式大致有以下几种,可随使用的器皿的液体容量而选用。(1)旋转混匀法:手持容器作离心旋转,适用以未盛满液体的试管或小口器皿,如三角瓶等。(2)弹指混匀法:左手
动物实验的基本操作技术1
实验动物实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。一、常用实验动物的种类和特点(一)狗(do
生物化学实验基本技术:破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生物化学实验基本技术:破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生物化学实验基本技术—破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生物化学实验基本技术:破碎技术
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植
生化实验的基本操作和常用仪器使用1
(一)搅拌和振荡1.配制溶液时,必须随时搅拌或振荡混合。配制完了时,必须充分搅拌或振荡混合。2. 搅拌使用的玻璃搅棒,必须两头都烧圆滑。3.搅棒的粗细长短,必须与容器的大小和所配制的溶液的多少呈适当比例关系。不能用长而粗的搅棒去搅拌小离心管中的少量溶液。4.搅拌时,尽量使搅棒沿着器壁运动,不搅入空气
电泳技术:生物化学实验常用技术1
带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。如带正电荷的粒子向负极移动,带负电荷的粒子向正极移动。电泳技术是生物化学与分子生物学中的重要研究方法之一,利用电泳技术可分离许多生物物质,包括氨基酸、多肽、蛋白质、脂类、核苷、核苷酸及核酸等,并可用于分析物质的纯度和分子量的测定等。电泳的
层析技术:生物化学实验常用技术(1)
层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质(吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等)的差异,在物质经过两相中,不断地进行交换、分配等过程。任何层析都具有两个相,即固定相和流动相。固定相固定不动,流动相对固定相作单相的相对运动,从而推动样品中各组分通
生物化学实验的基本要求:实验的准确性
生物化学实验是以活的生命体为对象,对生物体内存在的主要大分子物质,如糖、脂肪、蛋白质、核酸等进行定性或定量的分析测定。定性分析是确定存在物质的种类,或粗略计算物质所占的比例;而定量分析则需要确定物质的精确含量。因此分析工作者要根据实验要求对实验结果进行分析和总结,要善于分析和判断结果的准确性,认真查
酵母实验操作方案(1)
一.质粒酶切及线性化1)用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2,可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液,终体积80ul。2)线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒 70μl内切酶(SacI, SalI, BglⅡ) 2μl10 x buffer 8μl3)酶切3-16小时,一般3小时即
解剖操作的基本实验
实验材料尸体仪器、耗材解剖器骨锯骨凿骨剪锤磨石实验步骤一、常用解剖器械的使用方法解剖时,经常使用的解剖器械有两把解剖刀和两把解剖镊。其他解剖器械在需要时使用。(一)解剖刀一把是圆刃,用于切开皮肤、切断肌肉或大的脏器;另一把是尖刃,用于修整各种重要而精细的结构,如血管、淋巴管、神经以及各种导管等。持刀
解剖操作的基本实验
一、常用解剖器械的使用方法解剖时,经常使用的解剖器械有两把解剖刀和两把解剖镊。其他解剖器械在需要时使用。(一)解剖刀一把是圆刃,用于切开皮肤、切断肌肉或大的脏器;另一把是尖刃,用于修整各种重要而精细的结构,如血管、淋巴管、神经以及各种导管等。持刀方法有四种(图16),使用时应根据操作的要求,选用相应
Northern-blot实验操作步骤(1)
一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Miller
动物实验基本技术1
第一节 实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物
动物实验基本技术1
第一节 实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物
动物实验的基本操作技术
动物实验的基本操作技术实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。 一、常用实验动物的种类
有机实验的基本知识及基本操作
1.安全知识 有机溶剂大都易燃,如乙醇、丙酮、苯等,特别是乙醚。常用气体如氢气、乙炔等也易燃易爆。常用药品如浓硫酸、浓硝酸、浓盐酸、烧碱及溴等有腐蚀性。有毒药品也不少,如氰化钠、硝基苯和某些有机磷化合物等。因此应十分注意安全操作。 引起火灾有两个条件: (
化学实验常用仪器的基本操作
1. 试管的握持 出错点:用手一把抓或将无名指和小指伸展开;位置靠上或靠下。 正确方法:“三指握两指拳”.即大拇指、食指、中指握住试管,无名指和小指握成拳,和拿毛笔写字有点相似。手指握在试管中上部。 2. 药品的取用 出错点:A.取粉末状药品,由于药匙大,加药品时不能深入容器内致使洒落或
动物实验的基本操作技术2
5.非纯系动物(no-sheer series)一般是指任意交配繁殖的杂种动物。此类动物具有生命力旺盛、适应性强、繁殖率高、生长快、易于饲养管理等优点。其缺点是个体差异大、反应性不规则、实验结果的重复性差。由于其中包含有最敏感的与最不敏感的两种极端的个体,因此适用于筛选性实验。杂种动物比较经济、教学
生物化学标记的基本内容介绍
生化遗传标记(Biochemical Genetic Markers )是以动物体内的某些生化性状为遗传标记,主要指血型、血清蛋白及同工酶。 20世纪60年代以来,蛋白电泳技术作为检测遗传特性的一种主要方法得到了广泛的应用。蛋白电泳所检测的主要是血浆和血细胞中可溶性蛋白和同工酶中氨基酸的变化,通
化学实验基本操作之天平的使用
实验中由于对质量度的要求不同,需要用不同类型的天平进行称量。常用的天平有台式天平(又称为台秤、托盘天平)、化学天平和分析天平等。一般来说,台式天平的感量(称量的程度,即精密度)是0.1g,化学天平的感量是0.01g,而分析天平的感量则为0.0001g。 台式天平 台式天平的构造如图0-29所示。由
化学实验基本操作之天平的使用
实验中由于对质量度的要求不同,需要用不同类型的天平进行称量。常用的天平有台式天平(又称为台秤、托盘天平)、化学天平和分析天平等。一般来说,台式天平的感量(称量的程度,即精密度)是0.1g,化学天平的感量是0.01g,而分析天平的感量则为0.0001g。 台式天平 台式天平的构造如图0-29所示。由
RNAi的实验原理和操作实用技术(1)
几十年来生物学上最重要的进展,也许是关于RNA分子能调节基因表达的发现。RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。此后,科学家们明白,RNAi还有其他形式,它既是一种了解基因功能的强大工具,又是很多生物的基因组所
实验室试剂基本操作规定
1) 安全操作 a. 所有药品、溶液都应有标签。绝对不可以在容器内装入与标签不符的物品。 b. 禁止使用化验室器皿盛装食物,也不要用茶杯、食具装药品,更不要用烧杯当茶具使用。 c. 稀释硫酸时必须在硬质耐热烧杯或锥形瓶中进行,只能将浓硫酸慢慢注入水中,边倒边搅拌,温度过高时,应等冷却或降温
实验动物外科基本操作技术
1. 切开根据实验要求确定手术部位切口的大小。切开时先绷紧皮肤,将刀刃与皮肤垂直,用力要得当,1 次切开皮肤全层,切缝整齐而不偏斜。切开皮肤及皮下组织时,要求按解剖层次切开,尽量避开血管并注意止血,避免损伤深层的重要组织器官。2. 止血止血是手术操作中的重要环节。手术过程中止血完善与否,不仅直接影响
生物化学实验常用试剂的配制方法
1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。 2、0.5mol/L盐酸溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离
凝胶迁移(Gel-Shift)实验操作方法1
1.探针的标记:(1) 如下设置探针标记的反应体系:待标记探针 (1.75pmol/微升) 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X) 1微升Nuclease-Free Water 5微升[γ-32P]ATP(3,000Ci/mmol at 10mCi/ml)
RTPCR原理与实验操作步骤1
一、知识背景:1、基因表达:DNA RNA Protein单拷贝基因表达存在逐步放大机制,如一个蚕丝心蛋白基因 104个丝心蛋白mRNA(每个mRNA存活4d,可以合成105个丝心蛋白) 共合成109个丝心蛋白 。因此单拷贝基因的mRNA表达水平对于其功能水平的调控是非常重要的。2、PCR技术(ol