用纸层析法(PaperChromatography)鉴定转氨酶的转氨基作用

【基本原理】转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中,是体内氨基酸代谢的重要途径。氨基酸反应时均由专一的转氨酶催化,此酶催化氨基酸的α-氨基转移到另一α-酮基酸上。各种转氨酶的活性不同,其中肝脏的谷丙转氨酶(Glutamic Pyruvic Transaminase ,GPT)活性较高,它催化如下反应:α—酮戊二酸 + 丙氨酸 谷氨酸 + 丙酮酸本实验以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物,加肝匀浆保温后,用纸层析法检查谷氨酸的出现,以证明转氨基作用。纸层析属于分配层析。以滤纸为支持物,滤纸纤维与水亲合力强,能吸收20~22 %的水。而且其中6~7 %的水是以氢键形式与纤维素的羟基结合,在一般情况下很难脱去,而滤纸纤维与有机溶剂的亲和力甚弱。所以纸层析是以滤纸纤维结合水作为固定相,以有机溶剂作为流动相。在用纸层析法分离氨基酸时,由于各种氨基酸在此二相中的分配系数不同,各有一定的迁移率。极性弱的氨基酸,易溶于有机溶剂即分配系数小,随流......阅读全文

金标免疫层析法和荧光免疫层析法的区别

酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。就是用酶标记抗原或抗体,抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色),颜色的深浅与抗

蒸腾强度的测定(钴纸法)

原理   本实验方法系根据氯化钴纸在干燥时为蓝色,当吸收水分后变为粉红色,根据变色所需时间的长短,然后按钴纸标准吸水量计算出作物蒸腾强度。   仪器药品     扭力天平    烘箱   干燥器     瓷盘   镊子      剪刀   玻璃板     载玻

纸层析鉴定转氨基作用实验的关键步骤

  (一)实验目的:1、学习氨基酸纸层析的基本原理.2、掌握氨基酸纸层析的操作原理.(二)实验原理:转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反应,在转氨酶的催化下,氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反应称为转氨基作用.转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中,是体内氨基酸代谢的重要途径.氨基酸反应时均由专

氨基酸纸层析为什么会出现拖尾现象

究其原因,经自己多次亲手操作,多次反复对比,始悟出一些道理,叙述如下:拖尾现象是指展层,显色后在层析分配图上,所看到的某一种氨基酸的分子位移,不是如标准图谱所示的那样,完整地显示在某一位置上,而是形成象笤帚似的那样,前端粗圆而逐渐细小下来,宛如拖着一个尾巴。其图所呈颜色也是由浓渐淡。其图象的出现,原

柱层析法的原理

柱层析原理:柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。硅胶柱层析流动

凝胶层析法生化检验

凝胶层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。 凝胶层析又称分子筛过滤或排阻层析等。固定相是多孔凝胶,各组分的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度也不同。本法的优点是所用凝胶属于惰性载体,吸附力弱,操作条件温和,不需要有机溶剂,对高分子物质有很好的分离效果

高效液相层析法

高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋白质

凝胶层析法生化检验

凝胶层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。凝胶层析又称分子筛过滤或排阻层析等。固定相是多孔凝胶,各组分的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度也不同。本法的优点是所用凝胶属于惰性载体,吸附力弱,操作条件温和,不需要有机溶剂,对高分子物质有很好的分离效果医学

柱层析法的原理

柱层析原理:柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。硅胶柱层析流动

薄层层析法原理

层析须在两相系统间进行。一相是固定相,需支持物,是固体或液体。另一相为流动相,是液体或气体。当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带,这

离子交换层析法

离子交换层析法(ion exchange chromatography,简称IEC)是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性、极性,也就是所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离

亲和层析法概述

亲和层析法是利用生物大分子与某些对应的专一分子特异识别和可逆结合的特性而建立起来的一种分离生物大分子的色谱方法,也叫做生物亲和或生物特异性亲和色谱。这种特异可逆结合的物质很多,见表6–3。如抗原与抗体、底物与酶、激素与受体等,他们间的这种特异亲和能力又叫亲和力。亲和色谱中,一对互相识别的分子互称对方

凝胶层析法生化检验

凝胶层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。凝胶层析又称分子筛过滤或排阻层析等。固定相是多孔凝胶,各组分的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度也不同。本法的优点是所用凝胶属于惰性载体,吸附力弱,操作条件温和,不需要有机溶剂,对高分子物质有很好的分离效果医学

简述层析法的原理

  层析法利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异(溶解度、分子极性、分子大小、分子形状、吸附能力、分子亲合力等),使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。  层析法进行时有两个相,一个相称为固定相,另一相称为流动相。由于各组分所受固定相的阻力和流动相的推力影响不同,各组分移动速度也

薄层层析法原理

薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度

柱层析法的原理?

   柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解du吸的过程,吸附力较强的组分,zhi移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。  硅胶柱

现代层析法技术特点

色谱法或是层析法是简单点说,就是依据被分离物的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。

离子交换层析法

离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处

薄层层析法原理

  层析须在两相系统间进行。一相是固定相,需支持物,是固体或液体。另一相为流动相,是液体或气体。当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带

离子交换柱层析法(层析实验简介)概略

一、    原理:有些高分子物质含有一些可以分离的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-  —————  R-NH3CL+OH-这类高分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由

滤胶过滤层析法蛋白质的纯化实验_凝胶过滤层析法

凝胶过滤层析是一项重要的蛋白质纯化技术,又称为大小排阻、凝胶排阻、分子筛或凝胶过滤层析这种方法利用分级分离,而不需要蛋白质的化学结合,这就明显降低了因不可逆结合所致的蛋白质损失和失活。另外,可利用此法更换蛋白质的缓冲液或降低缓冲液的离子强度。在蛋白质纯化操作中何时使用凝胶过滤,还不能一概而论,有时纯

什么叫薄层层析法

薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度

什么叫薄层层析法

薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度

高效液相层析法简介

高效液相层析(HPLC)在经典液相层析法基础上,引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点,对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等尤其有利,根据流动相和固定相相对极性,高效液相色谱分析可分为正相和反相两种。

柱层析法的技术介绍

柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。

离子交换层析法原理

离子交换层析法(ionexchangechromatography,简称IEC)是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性、极性,也就是所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离出来

层析法的原理生化检验

层析法的原理:层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量比)不同,且随流动相向前移动,各组分不

亲和层析法生化检验

亲和层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。 亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离的目的。将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂,当含混合组分的样品通过此固定相时,只有和固定相分子有特异

亲和层析法生化检验

亲和层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离的目的。将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂,当含混合组分的样品通过此固定相时,只有和固定相分子有特异亲和力的

金标免疫层析法简介

  金标免疫层析法(goldimmunochromatographicas say,GICA)是20世纪90年代初发展起来的快速免疫分析技术,是一种建立在免疫层析技术、单克隆抗体技术和金纳米晶标记技术基础上的一种固相检测技术。  金纳米晶标记技术是以金纳米晶作为示踪标记物或显色剂,应用于抗原抗体反应